【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及纳豆肽的制备领域。更具体地说，本专利技术涉及一种纳豆肽及其制备方法和应用。
技术介绍
1、纳豆起源于中国秦汉时代，已有悠久的食用历史。由唐代传入日本，在日本家庭中饮食普及率超过90％，用于心血管疾病的预防和治疗。纳豆是以黄色大豆为主要原料，经一种枯草芽孢杆菌纳豆亚种发酵制成的一种具有独特风味的发酵豆制品。纳豆中富含纳豆激酶、纳豆肽、大豆异黄酮、皂苷、维生素b2、维生素k2等功能因子，对人体大有裨益。
2、大豆的蛋白质具有不溶解性，而做成纳豆后，变得可溶并产生纳豆肽和氨基酸，进一步发挥生理活性作用。但是传统工艺纳豆里的纳豆肽含量低不足2％，含量过低，因此需要研发一种纳豆肽的高效制备方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种纳豆肽的制备方法，该方法不需要外源蛋白和外源酶，利用纳豆发酵本身的物质基础，采用固态发酵、液态酶解分步结合发酵的方式，通过离心、超滤和凝胶层析等先进工艺制备获得高纯度、高浓度的纳豆肽，而且还具有较好祛斑和降血脂作用。
2、为了实现根据本专利技术的这些目的和其它优点，本专利技术的一优选技术方案提供了一种纳豆肽的制备方法，包括以下步骤：
3、s1、大豆清洗浸泡
4、将大豆和营养液按照质量体积比1:2～1:4进行混合，2～30℃浸泡6～12小时后沥干；
5、所述营养液包含：葡萄糖15～45g/l，十二水磷酸氢二钠5～10g/l，一水磷酸二氢钠0.5～2g/l，硫酸镁0.1～1g/l，ph7
6、s2、大豆蒸煮
7、将大豆置于105℃～115℃，0.02mpa环境中进行蒸制30～60分钟；
8、s3、接种纳豆菌并固体发酵
9、待蒸煮大豆冷却后，按照大豆浸泡前质量的5％～10％ml/100g接种纳豆菌菌液，进行固体发酵；
10、所述纳豆菌菌液由以下步骤制备得到：纳豆菌按照0.1～1％接种量接种于液体培养基中，通过摇瓶或者发酵罐培养菌液，培养结束后纳豆菌菌液od600值大于3.0。
11、其中液体培养基包含：葡萄糖15～25g/l，蛋白胨10～20g/l，酵母提取物5～10g/l，十二水磷酸氢二钠5～10g/l，一水磷酸二氢钠0.5～2g/l，硫酸镁0.1-0.5g/l，ph7.0～7.6。
12、s4、酶解
13、将经固体发酵制备的大豆进行粉碎并酶解，得到纳豆多肽粗提物。
14、优选地，所述的纳豆肽的制备方法还包括以下步骤：
15、s5、分离
16、对纳豆多肽粗提物进行分离，得到不同分子量范围的纳豆肽。
17、优选地，所述s4，酶解，具体包括以下步骤：
18、将经固体发酵制备的大豆进行粉碎后，按照质量体积比10～30％g/100ml加入纯水，混匀搅拌，50℃、180～220r/min进行液态酶解2h～6h酶解结束后，离心去沉淀，收集并干燥上清液，得到纳豆多肽粗提物。
19、优选地，所述s3中的固体发酵的条件为：物料厚度1～4cm，物料盘上覆纱布一层，37～40℃，湿度75％～85％，发酵时间为24～48h。
20、优选地，所述s5，分离，具体包括以下步骤：
21、将纳豆多肽粗提物通过分子筛填料进行分离，分别收取并干燥得到分子量范围为＜100d、＜200d、小于1000d、小于2500d的4种纳豆肽。
22、优选地，所述s5，分离，具体包括以下步骤：
23、利用超滤膜对纳豆多肽粗提物进行超滤分离，分别收取并干燥得到分子量范围为＜200d、200～2000d、＞2000d的3种纳豆肽。
24、优选地，所述s3中采用的纳豆菌选用保存于国家典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no：m2022132的枯草芽孢杆菌菌种。其保藏地址为中国武汉，保藏日期为2022年2月18日。
25、另一方面，本专利技术的一优选实施方案还提供一种根据所述制备方法得到的纳豆肽。
26、优选地，纳豆肽可应用于食品、保健食品、药品和化妆品的开发
27、本专利技术至少包括以下有益效果：
28、本专利技术应用大豆为发酵原料，利用纳豆发酵本身的物质基础，采用固态发酵、液态酶解分步结合发酵的方式，通过离心、超滤和凝胶层析等先进工艺制备获得高纯度、高浓度的纳豆肽，全过程不需要额外添加蛋白和酶。可以实现按需获得＜2500d、＜1000d、＜200d、＜100d等不同分子量的多肽；且各分子量多肽含量可达95％以上。也可通过膜分离工艺与技术，根据g25填料分离结果，建立更加高效的纳豆肽制备工艺，可以实现同时回收分子量范围为小于200d的多肽、200d-2000d的多肽、大于2000d的多肽，其中大于2000d的多肽含有纳豆激酶，也可作为纳豆粉原料。
29、本专利技术方法无需添加外源蛋白和外源酶，利用纳豆自身的酶和蛋白基础，结合固体发酵和二次液体发酵及酶解，获得高含量纳豆肽。
30、本专利技术方法制备的纳豆肽具有较好祛斑和降血脂作用。本专利技术制备的纳豆肽在化妆品、保健品和心血管防治药物上有巨大商用价值。
31、本专利技术的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本专利技术的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
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1.一种纳豆肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的纳豆肽的制备方法，其特征在于，还包括以下步骤：
3.根据权利要求1所述的纳豆肽的制备方法，其特征在于，所述S4，酶解，具体包括以下步骤：
4.根据权利要求1所述的纳豆肽的制备方法，其特征在于，所述S3中的固体发酵的条件为：物料厚度1～4cm，物料盘上覆纱布一层，37～40℃，湿度75％～85％，发酵时间为24～48h。
5.根据权利要求2所述的纳豆肽的制备方法，其特征在于，所述S5，分离，具体包括以下步骤：
6.根据权利要求2所述的纳豆肽的制备方法，其特征在于，所述S5，分离，具体包括以下步骤：
7.根据权利要求1所述的纳豆肽的制备方法，其特征在于，所述S3中采用的纳豆菌选用保存于国家典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2022132的枯草芽孢杆菌菌种。
8.根据权利要求1-7任一所述的制备方法得到的纳豆肽。
9.根据权利要求8所述的纳豆肽的应用，其特征在于，纳豆肽应用于食品、保健食品、药品和化
...【技术特征摘要】
1.一种纳豆肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的纳豆肽的制备方法，其特征在于，还包括以下步骤：
3.根据权利要求1所述的纳豆肽的制备方法，其特征在于，所述s4，酶解，具体包括以下步骤：
4.根据权利要求1所述的纳豆肽的制备方法，其特征在于，所述s3中的固体发酵的条件为：物料厚度1～4cm，物料盘上覆纱布一层，37～40℃，湿度75％～85％，发酵时间为24～48h。
5.根据权利要求2所述的纳豆肽的制备方法，其特征在于，所...
【专利技术属性】
技术研发人员：廖园园，董艳山，张建宇，高雅，何瑜林，王业富，
申请(专利权)人：武汉真福创新生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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