一种ＡＢＯ血型基因分型的ＰＣＲ－ＳＢＴ方法及试剂技术

本发明专利技术提供一种用于ＡＢＯ血型分型的ＰＣＲ－ＳＢＴ方法，它包括下述步骤：制备人基因组ＤＮＡ；扩增ＡＢＯ基因外显子１、外显子２－４、外显子５－７的片段；得到扩增产物进行双酶切纯化；将纯化产物进行测序ＰＣＲ反应；将测序产物进行醋酸钠－乙醇沉淀法纯化，进行毛细管电泳测序；将获得的序列通过软件分析，确定其基因型。本发明专利技术解决了ＡＢＯ亚型的鉴定、疑难血型的判定、新突变位点的发现、基因之间的重组现象、基因多态性检测等问题，发挥ＰＣＲ－ＳＢＴ对ＡＢＯ基因定型操作高通量，结果精确的特点，在临床输血医学研究和遗传学等领域的相关应用受到高度重视，对于医学研究单位、药学研究和试剂开发单位具有重要的现实意义。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种ＡＢＯ血型基因分型的ＰＣＲ－ＳＢＴ方法，其特征在于它包括以下步骤：　　（１）制备基因组ＤＮＡ；　　（２）设计扩增引物，用聚合酶链反应分别扩增人基因组ＤＮＡ中ＡＢＯ基因外显子１、外显子２－４、外显子５－７的三个片段，其中１号外显子采用含ＧＣ缓冲液的ＰＣＲ扩增；　　（３）将步骤（２）得到的扩增产物进行双酶切纯化；　　（４）设计测序引物，将步骤（３）得到的纯化产物进行测序ＰＣＲ反应；　　（５）将步骤（４）得到的测序产物进行醋酸钠－乙醇沉淀法纯化，进行毛细管电泳测序；　　（６）将步骤（５）获得的序列通过软件分析，确定其基因型。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：严力行，朱发明，许先国，
申请(专利权)人：浙江省血液中心，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]