【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种生产最短脂多糖分子的大肠杆菌的构建与应用，属于基因工程与生物工程。
技术介绍
1、脂多糖(lps)是革兰氏阴性菌外膜中普遍存在的成分。它通过与宿主防御系统相互作用产生炎症介质，从而增强革兰氏阴性细菌感染的致病过程。lps通常由类脂a和多糖组成。多糖通过3-脱氧-d-甘露聚糖(kdo)连接到类脂a上。在大肠杆菌中，kdo转移酶waaa(也称为kdta)是双功能的，lipidiva在waaa的催化下连续连接上两个kdo分子，生成kdo2-lipidiva；kdo2-lipidiva再经酰基转移酶lpxl和lpxm逐步催化，分别在c2’脂肪酸链和c3’脂肪酸链上连接次级十二烷基和次级十四烷基，从而生成kdo2-lipida。kdo2-lipida分子再经waac和waaf等多个膜相关的糖基转移酶作用，在kdo基团上进一步连接生成多糖长链，并被逐步转运至内膜外侧、外膜内侧，最终形成完整的lps分子，转运定位于外膜外侧。
2、kdo2-lipida的生物合成过程在细菌细胞中是保守的。kdo2-lipida是lps的生...
【技术保护点】
1.一种敲除大肠杆菌waaA基因的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述waaA基因的核苷酸序列的NCBI登录号为NC_007779.1:3830598-3831875。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述大肠杆菌包括大肠杆菌W3110。
4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述Red重组辅助质粒包括质粒pKD46。
5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述重组酶FLP的质粒包括以质粒pCP20为载体，表达重组酶FLP。
6.一种能够生产最短脂...
【技术特征摘要】
1.一种敲除大肠杆菌waaa基因的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述waaa基因的核苷酸序列的ncbi登录号为nc_007779.1:3830598-3831875。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述大肠杆菌包括大肠杆菌w3110。
4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述red重组辅助质粒包括质粒pkd46。
5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述重组酶flp的质粒包括以质粒pcp20为载体，表达重组酶flp。
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