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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一株链球菌及其应用,属于微生物。
技术介绍
1、目前,人们对身体健康愈发重视,对功能性食品的需求量也与日俱增,其中益生菌类食品及保健品得到了快速发展。链球菌属是人体的共生菌属之一,是婴儿肠道菌群的重要组成部分。分离自健康人体的链球菌已被证实具有安全性和益生特性,使其得到了普遍认可。能够通过自身生理活性促进宿主机体健康的有嗜热链球菌、唾液链球菌和乳链球菌等。
2、母乳低聚糖(human milk oligosaccharides,hmo)是一类不能被人体消化吸收的水溶性复合物,主要由半乳糖(gal)、葡萄糖(glc)、n-乙酰氨基葡糖(glcnac)、唾液酸(sia)、岩藻糖(fuc)五种基本的单糖以各种糖苷键组合形成。母乳低聚糖在母乳中的含量较高,仅次于乳糖和脂类。母乳低聚糖被证实对新生儿的健康发育有益。母乳低聚糖可以通过调节婴儿肠道组织细胞的免疫反应,系统影响免疫系统应答,发挥抗炎、抗病毒和抑菌作用。
3、肠道微生物对母乳低聚糖的利用是其发挥生理活性的重要方式。母乳低聚糖是母乳喂养婴儿肠道微生物的主要碳源,肠道微生物以不同的方式代谢母乳低聚糖,以乳酸和scfas作为代谢产物,促进不同细菌的生长。这些细菌通过协调不同的糖利用系统来利用饮食和宿主衍生的糖聚糖,共享消化的低聚糖、碳水化合物活性酶和可发酵的中间分子,以维持肠道微生物共生和改善自身或其他群落的适应能力。此外,利用hmo产生的代谢产物使肠道环境酸性增加,能够抑制致病菌的生长,保护婴儿免受有害的肠道感染。因此,具有母乳低聚糖利用能力的菌
技术实现思路
1、本专利技术旨在解决现有技术中存在的问题,提供一种能够分解利用母乳低聚糖的链球菌。
2、本专利技术提供了一株链球菌(streptococcus sp.)ccfm1328,所述链球菌ccfm1328保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为gdmcc no:63647,保藏日期为2023年7月14日,保藏地址:广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。
3、所述链球菌ccfm1328来源于健康女性的母乳,该菌株经基因组dna提取、16s rdna特异引物pcr扩增、扩增产物纯化、dna测序、序列比对等步骤进行种属鉴定,结果显示菌株为链球菌属,命名为链球菌ccfm1328,保存于江南大学食品生物技术菌种保藏中心。
4、所述链球菌ccfm1328在m17固体培养基上的菌落突起,光滑、圆形、乳白色、半透明、直径为0.45mm。
5、本专利技术提供了含有所述链球菌ccfm1328的微生物制剂。
6、在一种实施方式中,所述微生物制剂中链球菌的活菌数不低于4×108cfu/ml或4×108cfu/g。
7、本专利技术提出了一种食品,所述食品含有所述的链球菌ccfm1328。所述链球菌ccfm1328具有分解利用母乳低聚糖的能力,可以以母乳低聚糖为碳源生长,特别是可以以人乳低聚糖为唯一碳源生长。因此,所述食品能够为利用母乳低聚糖的益生菌产品开发提供理论依据和可行性。
8、在一种实施方式中,所述食品中,链球菌的活菌数为不低于2×109cfu/ml或2×109cfu/g。
9、在一种实施方式中,所述食品是冻干粉。
10、在一种实施方式中,所述冻干粉的制备方法为:将所述链球菌ccfm1328接种至培养基中进行培养,得到种子液;将种子液接种到培养基中进行培养,得到培养液;将培养液离心,收集菌泥;将菌泥用生理盐水清洗后重悬,得到重悬液;向重悬液中添加冻干保护剂,得到混合液;将混合液真空冷冻干燥,得到冻干粉。
11、在一种实施方式中,将种子液按2~4%(v/v)的接种量接种到培养基中进行培养。
12、在一种实施方式中,所述冻干保护剂的成分包括脱脂乳粉、海藻糖、蔗糖和水。
13、在一种实施方式中,所述冻干保护剂成分为80~120g/l脱脂乳粉、80~140g/l海藻糖、140-180g/l蔗糖和水。
14、在一种实施方式中,所述冻干保护剂的成分包括100g/l脱脂乳粉、100g/l海藻糖、160g/l蔗糖和水。
15、在一种实施方式中,所述冻干保护剂在重悬液中的添加量为菌泥总重量的2~4倍。
16、在一种实施方式中,种子培养基为mrs固体培养基,发酵培养基为mrs液体培养基。
17、在一种实施方式中,所述mrs液体培养基是加了半胱氨酸盐酸盐的mrs液体培养基。
18、在一种实施方式中,所述半胱氨酸盐酸盐的添加量为按质量分数0.04~0.1%。
19、在一种实施方式中,将种子液按2~4%的接种量接种到mrs液体培养基中进行培养的培养条件为:34~38℃厌氧培养24h~36h,7000~12000rpm离心20~30min,收集菌泥,用生理盐水清洗3~4次后重悬。
20、本专利技术还提供了所述链球菌ccfm1328在分解人乳低聚糖中的应用。
21、在一种实施方式中,所述人乳低聚糖包括2’-岩藻糖基乳糖(2’-fl)、6’-唾液酸乳糖(6’-sl)、乳酰-n-四糖(lnt)中的一种或多种。
22、本专利技术还提供了所述链球菌ccfm1328在促进短双歧杆菌生长方面的应用。
23、在一种实施方式中,所述应用是在含人乳低聚糖的环境中促进短双歧杆菌生长和/或数量增加。
24、在一种实施方式中,人乳低聚糖包括2’-岩藻糖基乳糖、6’-唾液酸乳糖、乳酰-n-四糖中的一种或多种。
25、在一种实施方式中,所述应用是将所述链球菌ccfm1328与短双歧杆菌共培养。
26、有益效果:
27、(1)本专利技术提供的链球菌ccfm1328分离自母乳,该菌株对人体无毒副作用,因此采用本专利技术提供的链球菌ccfm1328制备的食品,相对于传统食品具有一定的优势,并且该菌株可用于制作益生菌制剂等,具有广阔的市场前景。
28、(2)本专利技术所提供的链球菌ccfm1328具有分解母乳低聚糖的能力,可以以母乳低聚糖为碳源生长,特别是可以以人乳低聚糖为唯一碳源生长,所述母乳低聚糖为包括2’-岩藻糖基乳糖(2’-fl)、6’-唾液酸乳糖(6’-sl)和乳酰-n-四糖(lnt)中的一种或多种。
29、(3)本专利技术所提供的链球菌ccfm1328对母乳低聚糖的利用率较高,可利用其维持自身生长代谢,其中对2’-fl的利用率为99.78%,对6’-sl的利用率为97.65%,对lnt的利用率为95.98%。
30、(4)本专利技术所提供的链球菌ccfm1328能分解2’-fl,产生中间产物乳糖和岩藻糖;能分解6’-sl,产生中间产物乳糖和唾液酸;能分解lnt,产本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一株链球菌(Streptococcus sp.)CCFM1328,所述链球菌CCFM1328保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为GDMCC NO:63647,保藏日期为2023年7月14日。
2.含有权利要求1所述链球菌CCFM1328的微生物制剂。
3.根据权利要求2所述的微生物制剂,其特征在于,所述微生物制剂中链球菌CCFM1328的活菌数不低于4×108CFU/mL或4×108CFU/g。
4.含有权利要求1所述链球菌CCFM1328的食品。
5.权利要求1所述的链球菌CCFM1328在分解人乳低聚糖中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述人乳低聚糖包括2’-岩藻糖基乳糖、6’-唾液酸乳糖、乳酰-N-四糖中的一种或多种。
7.权利要求1所述的链球菌CCFM1328在促进短双歧杆菌生长方面的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述应用是在含人乳低聚糖的环境中促进短双歧杆菌生长和/或数量增加。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述人
10.根据权利要求7~9任一所述的应用,其特征在于,所述应用是将所述链球菌CCFM1328与短双歧杆菌共培养。
...【技术特征摘要】
1.一株链球菌(streptococcus sp.)ccfm1328,所述链球菌ccfm1328保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为gdmcc no:63647,保藏日期为2023年7月14日。
2.含有权利要求1所述链球菌ccfm1328的微生物制剂。
3.根据权利要求2所述的微生物制剂,其特征在于,所述微生物制剂中链球菌ccfm1328的活菌数不低于4×108cfu/ml或4×108cfu/g。
4.含有权利要求1所述链球菌ccfm1328的食品。
5.权利要求1所述的链球菌ccfm1328在分解人乳低聚糖中的应用。
6.根...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨波,陈卫,周叶,刘小鸣,陈海琴,赵建新,张灏,
申请(专利权)人:江南大学,
类型:发明
国别省市:
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