一种重组菌及其在合成L-3,4-二羟基苯丙氨酸中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种重组菌及其在合成L‑3,4‑二羟基苯丙氨酸中的应用。该重组菌共表达富马酸酶和富马酸还原酶，其能以3,4‑二羟基苯基丝氨酸等无毒性的原料为底物生产L‑3,4‑二羟基苯丙氨酸，其表达的富马酸酶和富马酸还原酶具有活性高、光学专一性强等优势。通过该重组菌生产L‑3,4‑二羟基苯丙氨酸，不仅提高了生产效率，还具有较高的平均摩尔转化率，最高可达98％以上，具有良好的工业化应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体而言，涉及一种重组菌及其在合成l-3,4-二羟基苯丙氨酸中的应用。

技术介绍

1、l-3,4-二羟基苯丙氨酸，又名左旋多巴、l-多巴，是生物体内一种重要的活性氨基酸。目前，l-3,4-二羟基苯丙氨酸因其强效性、前期副作用小等特点已成为临床治疗帕金森病最有效的药物，此外，其也可以用于治疗弱视、非药源性震颤麻痹综合征急性肝功能衰竭引起的肝性脑病等。

2、l-3,4-二羟基苯丙氨酸的制备方法主要有提取法、化学合成法及生物转化法。l-3,4-二羟基苯丙氨酸多存在于豆科植物中，藜豆属植物中l-3,4-二羟基苯丙氨酸含量最多，是提取l-3,4-二羟基苯丙氨酸的主要原料，但是原料来源狭隘、提取效率低、成本高限制了其工业化应用。化学合成法具有反应条件苛刻、底物转化率低、目标产物选择性低、对环境不友好等缺陷，不适合大规模工业化生产。目前，国内外学者报道了多种l-3,4-二羟基苯丙氨酸的生物法制备路线，例如r.krishnaveni等以5g/l的l-酪氨酸为底物，通过酪氨酸酶将其转化为l-3,4-二羟基苯丙氨酸，经120h的发酵培养，最终仅本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种合成L-3,4-二羟基苯丙氨酸的重组菌，其特征在于，所述重组菌包含编码富马酸酶和富马酸还原酶的基因；

2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述重组菌的宿主为大肠杆菌。

3.一种全细胞催化剂，其特征在于，含有权利要求1或2所述的重组菌。

4.一种核酸分子，编码具有将3,4-二羟基苯基丝氨酸转化为L-3,4-二羟基苯丙氨酸功能的蛋白，其特征在于，包括编码富马酸酶和富马酸还原酶的基因；

5.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体携带权利要求4所述的核酸分子。

6.含有权利要求4所述的核酸分子或权利要求5所述表达载体的微...

【技术特征摘要】

1.一种合成l-3,4-二羟基苯丙氨酸的重组菌，其特征在于，所述重组菌包含编码富马酸酶和富马酸还原酶的基因；

2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述重组菌的宿主为大肠杆菌。

3.一种全细胞催化剂，其特征在于，含有权利要求1或2所述的重组菌。

4.一种核酸分子，编码具有将3,4-二羟基苯基丝氨酸转化为l-3,4-二羟基苯丙氨酸功能的蛋白，其特征在于，包括编码富马酸酶和富马酸还原酶的基因；

5.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体携带权利要求4所述的核酸分子。

6.含有权利要求4所述的核酸分子或权利要求5所述表达载体的微生物细胞。

7.权利要求1或2所述的重组菌，或权利要求3所...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦勇，杨波，张炜，
申请(专利权)人：杭州唯铂莱生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：