一种生物药样本的痕量制造技术

本发明专利技术公开了一种生物药样本的痕量

【技术实现步骤摘要】
一种生物药样本的痕量DNA提取试剂盒及其使用方法


[0001]本专利技术涉及
DNA
试剂盒的
，尤其涉及一种生物药样本的痕量
DNA
提取试剂盒及其使用方法
。

技术介绍

[0002]在生物药产品质量检查中，宿主细胞残留
DNA
的量，受到严格的控制
(
参考
《
中国药典通则
3407
外源性
DNA
残留量测定法第三法公示稿
》)。
由于
qPCR
方法检测灵敏度高，检测结果可靠，检测速度快，因此，
FDA
，欧洲食品药品管理局，
CFDA
，都将其列为生物医药中宿主细胞残留
DNA
的标准检测方法之一
。
然而，由于生物药大部分都为蛋白类物质，比如抗体药，融合蛋白，疫苗等等，其药物本身会跟残留的
DNA
类物质进行非特异性结合，使其无法自然游离于液体体系中，从而无法用于
qPCR
的检测本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种生物药样本的痕量
DNA
提取试剂盒，其特征在于，包括：样本稀释液
、
第一裂解液
、
第二裂解液
、
磁微粒
、
洗涤液和洗脱液；所述第一裂解液包含如下组分：
0.01
‑
1.0M
的硫酸钠
、5
‑
50%
的甲醇
、1
‑
500mM
的十二烷基苯磺酸钠和
1%
‑
10%
的硫氢化钠；所述第二裂解液包含丝氨酸蛋白酶，且蛋白酶的浓度为
10
‑
30mg/mL
；所述磁微粒为四氧化三铁磁性颗粒，所述洗涤液包含无水乙醇，且无水乙醇的浓度为
10%
‑
90%。2.
根据权利要求1所述的生物药样本的痕量
DNA
提取试剂盒，其特征在于：所述样本稀释液包括生物药生产过程中的发酵过滤原液
、
离心上清原液
、
纯化过程中的层析液
、
清洗液
、
洗脱液
、
制剂过程中的物料原液
、
浓缩液
、
成品生物药注射剂
、
成品生物药冻干剂
。3.
根据权利要求2所述的生物药样本的痕量
DNA
提取试剂盒，其特征在于：所述四氧化三铁磁性颗粒的平均直径为
500nm
‑
3000nm。4.
根据权利要求3所述的生物药样本的痕量
DNA
提取试剂盒，其特征在于：所述洗脱液为包含一种或多种化学试剂，具体包括二乙醇胺
、
丙烯酰胺
、
十二烷基硫酸钠
、
十二烷基苯磺酸钠
、
丁二酸丁二醇酯中的一种或几种
。5.
根据权利要求1所述的生物药样本的痕量
DNA
提取试剂盒，其特征在于：所述生物药样本的痕量
DNA
提取试剂盒的提取方法包括以下步骤：步骤一：按照加样表，在
96
孔深孔板中完成试剂分装；步骤二：依次向
96
孔深孔板在第1列及第7列中分别加入
10
‑
100
μ
L
样品
、10
‑
200
μ
L
第二裂解液；步骤三：通过设置核酸自动提取仪将第6列及第
12
列的洗脱液转移至干净的离心管中，所得液体即为样本纯化液
。6.
根据权利要求5所述的生物药样本的痕量
DNA
提取试剂盒，其特征在于：所述
DNA
提取试剂盒提取完成后对样本纯化液进行
qPCR
荧光定量检测，具体步骤如下：步骤1：标准品稀释：用
DNA
稀释液将
CHODNA
定量参考品（
20ng/
μ
L
）进行梯度稀释，稀释浓度依次为
2000pg/
μ
L、200pg/
μ
L、20pg/
μ
L、2pg/
μ
L、0.2pg/
μ
L、0.02pg/
μ
L、0.002pg/
μ
L
；步骤2：加标回收样品制备：称量
0.04gBSA
溶解于
2mLPBS
溶液中，然后取
90
μ
LBSA
溶液至...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵正阳，丁艳清，吴凡，
申请(专利权)人：南京正扬生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：