一种基于适配体和荧光微球的阿尔茨海默症相关神经丝蛋白检测试纸制造技术

本发明专利技术公开了一种基于适配体和荧光微球的阿尔茨海默症相关神经丝蛋白检测试纸，属于生物检测技术领域

【技术实现步骤摘要】
一种基于适配体和荧光微球的阿尔茨海默症相关神经丝蛋白检测试纸


[0001]本专利技术涉及一种基于适配体和荧光微球的阿尔茨海默症相关神经丝蛋白检测试纸，属于生物检测

。

技术介绍

[0002]阿尔茨海默症相关神经丝蛋白
(AD
‑
associated neuronalthread protein
，
AD7C
‑
NTP)
是一种安全
、
有效的生物标记物，在
AD
诊断有着重要意义，具有广阔的应用前景
。AD7C
‑
NTP
自神经元胞体中表达后，广泛存在于神经细胞发生的轴突中，并大量出现在
AD
患者脑中的
NFTs
里，呈分泌性上调表达
。
研究表明，
AD7C
‑
NTP
在神经元中的沉积在神经元变性早期即可出现，并且发生在
NFTs
形成之前，在早期
AD
患者的脑组织抽提物
、
脑脊液
、
尿液中均可以检测到
AD7C
‑
NTP。
同时
AD7C
‑
NTP
含量水平随病程延长和痴呆严重程度呈正相关逐渐增高，这可能是由于
AD
患者脑组织
NTP
免疫活性及信使
RNA
表达增强，导致神经元细胞凋亡增多，继而使死亡细胞释放大量的
AD7C
‑
NTP。
神经元胞体和神经突触的丢失
、
神经元结构蛋白功能受损等病理过程，可以使
AD7C
‑
NTP
表达升高
。
[0003]目前，检测阿尔茨海默症相关神经丝蛋白
(AD7C
‑
NTP)
的方法主要包括：酶联免疫分析法
、
免疫层析法等
。
尽管这些传统方法可以准确地检测
AD7C
‑
NTP
，但由于其检测易受环境
、
时间等条件干扰，耗时长，需要专业操作技术人员开展，且每次检测需要带标准品，因此适合较多样本同时分析，其应用受到很大限制
。
因此，有必要建立一种快速，高效，灵敏，适合单人份的方法来床旁检测
AD7C
‑
NTP。

技术实现思路

[0004]为解决上述问题，本专利技术提供了一种特异性结合阿尔茨海默症相关神经丝蛋白的
ssDNA
适配体，该序列具有良好的亲和力及特异性，并根据该适配体序列建立了一种荧光微球检测方法，能够实现靶标
AD7C
‑
NTP
的定性及定量检测
。
[0005]本专利技术的第一个目的是提供一种特异性识别阿尔茨海默症相关神经丝蛋白的核酸适配体，所述核酸适配体的序列如
SEQ ID NO.1
所示
。
[0006]进一步地，所述核酸适配体的5′
端或3′
端修饰有功能基团或分子
。
[0007]进一步地，所述功能基团或分子选自同位素
、
电化学标记物
、
酶标记物
、
荧光基团
、
生物素
、
亲和配基
、
巯基
、
氨基中的至少一种
。
[0008]本专利技术的第二个目的是提供上述核酸适配体在制备阿尔茨海默症相关神经丝蛋白检测产品中的应用，包括但不限于试剂盒
、
试纸等
。
[0009]本专利技术的第三个目的是提供上述核酸适配体在制备阿尔茨海默症检测产品中的应用
。
[0010]本专利技术的第四个目的是提供一种用于检测阿尔茨海默症相关神经丝蛋白的产品，该产品中包括上述核酸适配体
。
[0011]进一步地，所述产品中包括：
[0012]样品垫；
[0013]结合垫，所述结合垫上含有荧光微球标记的兔
IgG
与核酸适配体的复合物
(
荧光微球
‑
兔
IgG
‑
Apt
偶联物
)
，其中，核酸适配体与兔
IgG
与荧光微球均为共价连接；
[0014]包被膜，所述包被膜上设置有检测线和质控线；其中，所述检测线上设置有
AD7C
‑
NTP
单克隆抗体，所述质控线上设置有抗兔
IgG
的第二抗体
(
可与第一抗体特异性结合
)
；
[0015]吸水垫
。
[0016]本专利技术检测试纸的原理为：在毛细管虹吸作用下，待测溶液由样品垫向吸水垫移动，通过在检测线和质控线位置聚集荧光微球从而形成荧光条带
。(1)
当检测液中不存在
AD7C
‑
NTP
时，随液体移动过程中，
Apt
‑
兔
IgG
‑
荧光微球复合物依次到达
T
线和
C
线，兔
IgG
‑
Apt
偶联物不能和检测线的
AD7C
‑
NTP
抗体结合，但是可以和质控线的抗兔
IgG
抗体结合
。
因此，只能在质控线上捕获到微球进而发出荧光
。(2)
当检测液中存在
AD7C
‑
NTP
时，
Apt
会特异性地与
AD7C
‑
NTP
结合形成
AD7C
‑
NTP
‑
Apt
‑
兔
IgG
‑
荧光微球复合物，经过检测线时被检测线上的
AD7C
‑
NTP
抗体捕获，在随液体继续移动的过程中，复合物中微球表面兔
IgG
可进一步被质控线上的抗兔
IgG
第二抗体捕获从而发光
。
[0017]进一步地，样品垫搭设于结合垫的一端；包被膜搭设于结合垫远离样品垫的一端，检测线设于靠近结合垫的一端，质控线设于远离结合垫的一端，吸水垫搭设于包被膜远离结合垫的一端
。
[0018]进一步地，所述用于检测阿尔茨海默症相关神经丝蛋白的产品中还包括阿尔茨海默病相关神经丝蛋白标准液
。
[0019]进一步地，检测阿尔茨海默症相关神经丝蛋白包括以下步骤：将待测样本加于样品垫上，反应一段时间后，根据检测线上是否有荧光判断待测样本中是否含有阿尔茨本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种特异性识别阿尔茨海默症相关神经丝蛋白的核酸适配体，其特征在于，所述核酸适配体的序列如
SEQ ID NO.1
所示
。2.
根据权利要求1所述的核酸适配体，其特征在于，所述核酸适配体的5′
端或3′
端修饰有功能基团或分子
。3.
根据权利要求2所述的核酸适配体，其特征在于，所述功能基团或分子选自同位素
、
电化学标记物
、
酶标记物
、
荧光基团
、
生物素
、
亲和配基
、
巯基
、
氨基中的至少一种
。4.
权利要求1‑3任一项所述的核酸适配体在制备阿尔茨海默症相关神经丝蛋白检测产品中的应用
。5.
权利要求1‑3任一项所述的核酸适配体在制备阿尔茨海默症检测产品中的应用
。6.
一种用于检测阿尔茨海默症相关神经丝蛋白的产品，其特征在于，含有权利要求1‑3任一项所述的核酸适配体
。7.
根据权利要求6所述的产品，其特征在于，所述产品中含有：样品垫；结合垫，所述结合垫上含有荧光微球标记的兔
IgG
与核酸适配体的复合物；包被膜，所述包被膜上设置有检测线和质...

【专利技术属性】
技术研发人员：张艺，周衍，范俊，李文新，郭明明，周彬，丁坚，王晨，冯非雨，杨润琳，张珏，
申请(专利权)人：无锡市江原实业技贸有限公司，
类型：发明
国别省市：