一种海藻糖中杂质的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种海藻糖中杂质的检测方法，包括如下步骤：

【技术实现步骤摘要】
一种海藻糖中杂质的检测方法


[0001]本专利技术涉及化学物质检测技术，特别是涉及一种海藻糖中杂质的检测方法
。

技术介绍

[0002]海藻糖是一种典型应激代谢物，能够在高温
、
高寒
、
高渗透压及干燥失水等恶劣环境条件下在细胞表面形成独特的保护膜，有效地保护生物分子结构不被破坏，从而维持生命体的生命过程和生物特征
。
海藻糖广泛用于食品工业
、
医药工业
、
化妆品等领域
。
海藻糖在医药工业可用作试剂药和诊断药的稳定剂
。
目前，正从海藻糖具有的非还原性
、
稳定性
、
对生物大分子的保护作用及提供能源等功能和特性出发，探讨多方面应用
。
用海藻糖干燥抗体如疫苗
、
血球蛋白
、
病毒等生物活性物质，无需冷冻，待复水后均能恢复活力
。
海藻糖代替血浆作为生物制品和稳定剂，不仅能常温保存，还可防止污染，从而保证生物制品的保存
、
运输和安全性
。
[0003]然而海藻糖在生产过程中可能会存在麦芽三糖
、
葡萄糖等杂质，这些糖类杂质的存在会影响海藻糖的使用性能，因此需要对海藻糖中的糖类杂质进行有效的分离
、
检测
。
但目前业界在海藻糖中杂质糖分的分离
、
检测等方面仍为空白
。

技术实现思路

[0004]本专利技术通过提供一种海藻糖中杂质的检测方法
。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种海藻糖中杂质的检测方法，包括如下步骤：
[0006](1)
配置供试品溶液：称取一定量海藻糖样品置于容量瓶中，加水溶解
、
定容后，得到供试品溶液；
[0007](2)
配置对照溶液
A
：称取海藻糖对照品于容量瓶中，加水溶解并定容，得到对照溶液
A
；
[0008](3)
配置对照溶液
B
：取步骤
(1)
中制备的供试品溶液，加水稀释成所需的浓度，作为对照溶液
B
；
[0009](4)
配置对照溶液
C
：称取步骤
(2)
中制备的对照溶液
A、
麦芽三糖和葡萄糖混合，加水溶解
、
定容，得到对照溶液
C
；
[0010](5)
高效液相色谱测试：将上述供试品溶液
、
对照溶液
A、
对照溶液
B
和对照溶液
C
注入到液相色谱仪中，并进行谱图比较，计算供试品溶液中麦芽三糖和葡萄糖的杂质含量；
[0011]所述高效液相色谱测试采用的条件包括：
[0012]固定相：
Carbomix H
‑
NP
色谱柱；
[0013]流动相：纯化水
。
[0014]在本专利技术一个较佳实施例中，所述高效液相色谱测试的柱温为
58
～
60℃。
[0015]在本专利技术一个较佳实施例中，所述高效液相色谱测试的柱温为
60℃。
[0016]在本专利技术一个较佳实施例中，所述高效液相色谱测试的流速为
0.3
～
0.5ml/min
；
[0039][0040]由上述测试结构可知，本专利技术的检测方法能够有效检测出海藻糖中葡萄糖
、
麦芽三糖等杂质的含量，且测试结果的准确度高，相对标准偏差
RSD
值
≤10
％，结果的重现性好
。
[0041]下面结合实验对本专利技术的应用效果作进一步的说明
。
[0042](
一
)
专属性和系统适用性
[0043]空白溶剂：纯化水
。
[0044]配置对照溶液
A
：称取海藻糖对照品
10mg
，精密称定，置于
10ml
容量瓶中，加水溶解并定容后摇匀，作为对照溶液
A。
[0045]配置对照溶液
C
：精密量取
2.5ml
对照溶液
A
，称取麦芽三糖和葡萄糖对照品各
25mg
，置于
10ml
容量瓶中，加水稀释至刻度后摇匀
。
[0046]采用同实施例1的测试条件，向高效液相色谱中先进样空白溶剂，再重复进样对照溶液
C 6
次，测试结果如下表2所示，测试谱图如附图1所示，峰结果如表3所示
。
[0047]表2[0048][0049]表3[0050][0051]由谱图
(
附图
2)、
表2和表3的结果可知，空白溶剂无干扰，6针系统适应性溶液主峰面积
RSD
为
0.32
％，以海藻糖为对照，麦芽三糖
、
海藻糖和葡萄糖的相对保留时间分别为
0.9、1.0
和
1.2。
海藻糖和麦芽三糖的分离度为
2.27
，线性相关系数为
R
，专属性和系统适用性均符合可接受标准
。
[0052](
二
)
检测限与定量限
[0053]称取上述对照溶液
A
，加水配置成适当浓度的溶液，逐级稀释，注入液相色谱仪，确
认检测限与定量限
。
[0054]按信噪比
10
：1计算定量限
。
再重新制备不高于限度浓度
10
％的定量限确认溶液，注入液相色谱仪，按照信噪比
≥10
确定定量限，信噪比
≥3
确定检测限
。
定量限与检测限测试结果如下表4所示
。
定量限精密度试验结果如下表5所示
。
[0055]表4[0056][0057]表5[0058][0059]由上述测试结果可知，基线噪声为
0.014mV
；定量限的浓度为
9.59
╳
10
‑
3mg/ml
，定量限浓度的信噪比为
10.00
；检测限的浓度为
2.88
╳
10
‑
3mg/ml
，检测限浓度的信噪比为
3.16
；定量限精密度试验的
RSD
为
2.15
％
。
定量限和检测限均符合可接受标准
。
[0060]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种海藻糖中杂质的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)
配置供试品溶液：称取一定量海藻糖样品置于容量瓶中，加水溶解
、
定容后，得到供试品溶液；
(2)
配置对照溶液
A
：称取海藻糖对照品于容量瓶中，加水溶解并定容，得到对照溶液
A
；
(3)
配置对照溶液
B
：取步骤
(1)
中制备的供试品溶液，加水稀释后，作为对照溶液
B
；
(4)
配置对照溶液
C
：称取步骤
(2)
中制备的对照溶液
A、
麦芽三糖和葡萄糖混合，加水溶解
、
定容，得到对照溶液
C
；
(5)
高效液相色谱测试：将上述供试品溶液
、
对照溶液
A、
对照溶液
B
和对照溶液
C
注入到液相色谱仪中，并进行谱图比...

【专利技术属性】
技术研发人员：史加桂，孙征宇，卫耿虎，
申请(专利权)人：江苏汉斯通药业有限公司，
类型：发明
国别省市：