包含制造技术

一种包含

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含CLDN18.2单域抗体的嵌合抗原受体及其应用
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于
2022
年5月
27
日提交的专利申请
CN2022105948645
的优先权，其全部内容通过引用的方式并入本文
。


[0003]本专利技术涉及生物医药
，具体而言，涉及包含
CLDN18.2
单域抗体的嵌合抗原受体及其应用
。

技术介绍

[0004]目前，晚期胃癌的治疗原则仍是以全身化疗为主的综合治疗，包括全身化疗
、
手术切除
、
放射治疗
、
靶向治疗
、
免疫治疗以及中医中药治疗等
。
随着化疗药物及化疗方案的不断优化，晚期胃癌患者的生存期有明显延长，但患者的中位生存时间仍难以超过1年
。
[0005]近些年免疫疗法的发展为肿瘤治疗领域带来深刻的改变，尤其是以
CTLA
‑4，
PD1/PDL1
通路抑制剂为代表的免疫检查点疗法和以
CAR
‑
T
为代表的过继性细胞疗法
。
过继性细胞疗法包括
TIL,NK,TCR
‑
T,CAR
‑
T/NK/NKT/TIL/
等
。
其中靶向
CD19
的
CAR
‑
T
疗法在
B
细胞肿瘤中取得了优秀的临床疗效，并且在
2017
年有两款
CAR
‑
T
产品被
FDA
批准用于
B
细胞白血病或者淋巴瘤的治疗
。
[0006]虽然靶向治疗和免疫检查点抑制剂已经为特定人群带来福音，但在进展期胃癌中寻找其他靶点势在必行
。
[0007]Claudins
是一个蛋白质家族，其作用是维持控制细胞间分子交换的紧密连接
。
其广泛分布于胃
、
胰腺和肺组织，可用于诊断和治疗
。CLDN18.2
亚型是一种胃特异性亚型，自从
Sahin
发现
CLDN18.2
是一种高度选择性的分子，并且只在癌细胞中广泛表达，它就成为一种理想的靶点
。CLDN18.2
通常埋藏在胃粘膜中，正常组织中的单克隆抗体基本上接触不到，恶性肿瘤的发生会导致紧密连接的破坏，使肿瘤细胞表面的
CLDN18.2
表位暴露出来，成为特定的靶点
。
因此，
CLDN18.2
赋予靶向治疗的特异性
。
它在多种癌症中有表达，包括
80
％的胃肠道腺癌
、60
％的胰腺癌以及胆道癌
、
卵巢癌
、
肺癌
。
[0008]目前，全球针对
CLDN18.2
的产品类型包括单克隆抗体
、
双特异性抗体
、CAR
‑
T
和
ADC。
其中，开发中的单克隆抗体数量最多
。
目前针对
CLDN18.2
开发的药物中进展最快的是德国
Ganymed
公司开发的
IMAB362(Zolbetuximab
，
claudiximab)。IMAB362
是一种人鼠嵌合型抗体，能特异性识别并结合
claudin18.2
蛋白的细胞膜外结构域
ECL1
而不与任何其他
claudin
家族成员结合
(
包括与
claudin18.1)。
目前，已经进入
III
期临床试验
。
[0009]虽然
CAR
‑
T
在血液瘤中取得了重大进展，但
CAR
‑
T
在实体瘤治疗中效果差，其中一个重要原因为实体肿瘤没有像血液瘤中一样很好的靶点，且传统
CAR
‑
T
的受体序列来源于鼠源，亲和力较强，造成实体瘤
CAR
‑
T
往往有更强的
on
‑
target off
‑
tumor
作用，副作用较大，另外来源于鼠的
scfv
摩尔质量较大，免疫原性较强，很容易在患者体内形成抗抗体，导致
CAR
‑
T
在体内快速被宿主产生的抗体清除，无法起到持续缓解患者肿瘤的作用，这也造成
了
CAR
‑
T
在实体瘤上效果较差的原因之一
。

技术实现思路

[0010]本专利技术的目的之一在于提供一种嵌合抗原受体，其胞外域包含
CLDN18.2
单域抗体，所述单域抗体的重链互补决定区的氨基酸序列如
SEQ ID NO
：1～3所示
。
[0011]本专利技术还涉及如上所述嵌合抗原受体相关的核酸及载体
。
[0012]本专利技术还提供免疫细胞，其表达有如上所述嵌合抗原受体
。
[0013]本专利技术还涉及药物组合物，其包含如上所述的免疫细胞
。
[0014]本专利技术还涉及如上所述的免疫球蛋白可变结构域或免疫细胞在制备用于杀伤
CLDN18.2
阳性的肿瘤细胞的药物中的应用
。
[0015]本专利技术的专利技术人经过试验，意外发现本专利技术所选用的单域抗体在构建为嵌合抗原受体时能获得优异的技术效果
。
所构建的嵌合抗原受体特异性好，在体内使用具有更高的安全性，毒性更小，能够为目前放化疗及手术治疗晚期胃癌高表达等
CLDN18.2
蛋白的患者提供的一种可能更好的治疗方案
。
附图说明
[0016]为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图
。
[0017]图1为
IMC002 CAR
‑
T
结构示意图；
[0018]图2为
CLDN18.2
在人正常组织上的
IHC
染色；
[0019]图3为
CLDN18.2
在人胃癌组织上表达；
[0020]图4为
CLDN18.2
在不同靶细胞上本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
嵌合抗原受体，其胞外域包含
CLDN18.2
单域抗体，所述单域抗体的重链互补决定区的氨基酸序列如
SEQ ID NO
：1～3所示
。2.
根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述单域抗体是人源化的
。3.
根据权利要求2所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述单域抗体的氨基酸序列如
SEQ ID NO
：4所示
。4.
根据权利要求1～3任一项所述的嵌合抗原受体，其特征在于，其包含铰链区
、
跨膜区和胞内信号传导区
。5.
根据权利要求4所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述铰链区选自
CD8、CD28、IgG1、IgG4、4
‑
1BB、ICOS、OX40、CD40、CD80、CD7
的铰链区，或
CH3、CH2
‑
CH3
恒定区
。6.
根据权利要求4所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述跨膜区选自
CD8a、CD28、CD4、ICOS、CD7、CD2、CD80、CD40、OX40、CD27、LFA
‑
1、4
‑
1BB、ICOS、CD3
ζ
或
CD3
ε
的跨膜区
。7.
根据权利要求4所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述胞内信号传导区包括
CD3
ζ
信号传导域
。8.
根据权利要求4所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述胞内信号传导区还包含选自如下蛋白或其胞内信号传导区中的一种或多种：
CD28、4
‑
1BB、OX40、ICOS、CD27、MYD88、KIR2DS2、DAP10、DAP12、CD3
ζ
、TLRs、CD2、LFA
‑
1、CD8

【专利技术属性】
技术研发人员：李彦涛，钟云鹏，郝瑞栋，
申请(专利权)人：苏州易慕峰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：