一种特异性结合人制造技术

本发明专利技术涉及一种特异性结合人

【技术实现步骤摘要】
一种特异性结合人CD318的VHH抗体或其抗原结合片段及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物免疫治疗
，具体而言，涉及一种特异性结合
CD318
的抗体或其抗原结合片段及其制备方法和应用
。

技术介绍

[0002]CD318
，也称为
CDCP1(
含
CUB
结构域的蛋白
1)
，该基因编码一种高度糖基化的，单通道
I
型跨膜蛋白，在间充质干细胞
、
神经干细胞
、
成纤维细胞和造血祖细胞中表达
。CDCP1
由一个大的细胞外结构域
(ECD)
组成，其中包含三个
CUB(
分别为：补体
C1r/C1s
，
Uegf
和
Bmp1)
结构域和一个短的细胞内部分，该蛋白在酪氨酸磷酸化依赖性调节中起作用
。
[0003]CD318
在多种恶性肿瘤中表达均异常升高，包括结肠癌
、
乳腺癌
、
胰腺癌
、
肺癌
、
肾癌
、
肝癌等
。
在造血细胞中，
CD318
已被鉴定为良性和恶性祖细胞的干细胞标志物
。
在
AML
患者涉及白血病干细胞富集的
CD34CD133
白血病细胞亚群中可观察到明显的/>CD318
表达
。
因此，
CD318
是一个非常有前景的肿瘤免疫治疗靶标
。
[0004]嵌合抗原受体
T
细胞
(Chimeric Antigen Receptor T cell
，
CAR T)
疗法是一种针对肿瘤细胞表面特异性抗原的新型免疫治疗方法
。VHH
抗体又称纳米抗体，是羊驼外周血液中存在的一种天然缺失轻链的抗体，该抗体只包含一个重链可变区
(VHH)
和两个常规的
CH2
与
CH3
区
。
与传统的人工改造的
scFv
相比具有分子量小，易于表达，特异性强，亲和力高，对人的免疫原性弱，开发周期短等优势
。
结合免疫疗法和
VHH
抗体的优势，能够开发出高效的
CAR
‑
T
疗法
。
[0005]目前尚未见如本申请所记载的抗
CD318VHH
抗体以及含该抗
CD318VHH
抗体的免疫效应细胞的报道
。

技术实现思路

[0006]本专利技术提供一种
CD318
结合分子，包含抗
CD318
纳米抗体或其抗原结合片段，所述抗
CD318
纳米抗体的互补决定区
CDR
包含
CDR1、CDR2
和
CDR3
，其中
CDR1
包括
SEQ IDNO:1、4、7、10、13
和
16
中任一所示的序列
、CDR2
包括
SEQ ID NO:2、5、8、11、14
和
17
中任一所示的序列
、
和
CDR3
包括
SEQ ID NO:3、6、9、12、15
和
18
中任一所示的序列
。
[0007]在一个或多个实施方案中，所述
CDR
选自以下任一项：
[0008](1)
序列如
SEQ ID NO:1
所示的
CDR1、
序列如
SEQ ID NO:2
所示的
CDR2、
序列如
SEQ ID NO:3
所示的
CDR3
，
[0009](2)
序列如
SEQ ID NO:4
所示的
CDR1、
序列如
SEQ ID NO:5
所示的
CDR2、
序列如
SEQ ID NO:6
所示的
CDR3
，
[0010](3)
序列如
SEQ ID NO:7
所示的
CDR1、
序列如
SEQ ID NO:8
所示的
CDR2、
序列如
SEQ ID NO:9
所示的
CDR3
，
[0011](4)
序列如
SEQ ID NO:10
所示的
CDR1、
序列如
SEQ ID NO:11
所示的
CDR2、
序列如
SEQ ID NO:12
所示的
CDR3
，
[0012](5)
序列如
SEQ ID NO:13
所示的
CDR1、
序列如
SEQ ID NO:14
所示的
CDR2、
序列如
SEQ ID NO:15
所示的
CDR3
，
[0013](6)
序列如
SEQ ID NO:16
所示的
CDR1、
序列如
SEQ ID NO:17
所示的
CDR2、
序列如
SEQ ID NO:18
所示的
CDR3。
[0014]在一个或多个实施方案中，所述抗
CD318
纳米抗体的重链可变区序列如
SEQ ID NO:19
‑
24
中任一所示
。
[0015]在一个或多个实施方案中，所述抗
CD318
纳米抗体的
FR1
可选自
SEQ ID NO:19
‑
24
中任一所示的
VHH
的
FR1
，
FR2
可选自
SEQ ID NO:19
‑
24
中任一所示的
VHH
的
FR2
，
FR3
可选自
SEQ ID NO:19
‑
24
中任一所示的
VHH
的
FR3
，
FR4
可选自
SEQ ID NO:19
‑
24
中任一所示的
VHH
的
FR4。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种
CD318
结合分子，包含抗
CD318
纳米抗体或其抗原结合片段，所述抗
CD318
纳米抗体的互补决定区
CDR
包含
CDR1、CDR2
和
CDR3
，其中
CDR1
包括
SEQ ID NO:1、4、7、10、13
和
16
中任一所示的序列
、CDR2
包括
SEQ ID NO:2、5、8、11、14
和
17
中任一所示的序列
、
和
CDR3
包括
SEQ ID NO:3、6、9、12、15
和
18
中任一所示的序列，优选地，所述
CDR
选自以下任一项：
(1)
序列如
SEQ ID NO:1
所示的
CDR1、
序列如
SEQ ID NO:2
所示的
CDR2、
序列如
SEQ ID NO:3
所示的
CDR3
，
(2)
序列如
SEQ ID NO:4
所示的
CDR1、
序列如
SEQ ID NO:5
所示的
CDR2、
序列如
SEQ ID NO:6
所示的
CDR3
，
(3)
序列如
SEQ ID NO:7
所示的
CDR1、
序列如
SEQ ID NO:8
所示的
CDR2、
序列如
SEQ ID NO:9
所示的
CDR3
，
(4)
序列如
SEQ ID NO:10
所示的
CDR1、
序列如
SEQ ID NO:11
所示的
CDR2、
序列如
SEQ ID NO:12
所示的
CDR3
，
(5)
序列如
SEQ ID NO:13
所示的
CDR1、
序列如
SEQ ID NO:14
所示的
CDR2、
序列如
SEQ ID NO:15
所示的
CDR3
，
(6)
序列如
SEQ ID NO:16
所示的
CDR1、
序列如
SEQ ID NO:17
所示的
CDR2、
序列如
SEQ ID NO:18
所示的
CDR3
，优选地，所述
CD318
结合分子具有选自以下一项或多项的特征：所述抗
CD318
纳米抗体的重链可变区序列如
SEQ ID NO:19
‑
24
中任一所示，所述
CD318
结合分子是包含一条
、
两条或多条抗
CD318
纳米抗体或其抗原结合片段的单价或多价纳米抗体或单域抗体
、
或多特异性纳米抗体或单域抗体，所述纳米抗体是骆驼重链抗体或软骨鱼重链抗体，所述纳米抗体还包含重链恒定区，所述
CD318
结合分子为嵌合抗体或完全人抗体
。2.
一种嵌合抗原受体，包含任选的信号肽序列
、

【专利技术属性】
技术研发人员：王海鹰，李靖，刘真莹，胡红明，
申请(专利权)人：上海恒润达生生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：