用于治疗白癜风的黑色素细胞的培养方法及应用技术

本发明专利技术公开了用于治疗白癜风的黑色素细胞的培养方法及应用，所述黑色素细胞的培养方法包括以下步骤：步骤一，确定供皮区；步骤二，使用负压分离方法负压吸引，使得供皮区产生丰满水疱；步骤三，用虹膜剪将供皮区水疱沿基底部剪下，分离水疱中黑色素细胞，黑色素细胞置于添加有碱性成纤维细胞生长因子的培养基中进行体外培养繁殖

【技术实现步骤摘要】
用于治疗白癜风的黑色素细胞的培养方法及应用


[0001]本专利技术涉及细胞培养
，特别是涉及用于治疗白癜风的黑色素细胞的培养方法及应用
。

技术介绍

[0002]白癜风是一种比较常见的后天色素性皮肤病，表现为局限性或泛发性皮肤黏膜色素完全脱失，由于皮肤的黑素细胞功能消失引起，全身各部位可发生，常见于指背
、
腕
、
前臂
、
颜面
、
颈项等
。
[0003]黑色素细胞培植术是治疗白癜风理想技术，从患者自身细胞中分离处活性黑色素细胞，进行培养繁殖
。
应用的治疗系统会将足量的黑色素细胞精准种植于白癜风病灶，同时提供多种黑色素营养液，此时黑色素细胞不会凋亡，还能促进黑色素细胞成活
、
分裂
、
恢复自我养护功能，以消除白癜风
。
[0004]但是由于自体黑色素细胞取自皮肤，面临着数量有限且分离困难
、
培养工艺复杂
、
不容易推广等缺陷，虽然市面上的确有一些快速分离细胞的方法，但由于其细胞来源需要大量的皮肤，所移植的细胞不易固定
、
不易成活，分布也不均匀，疗效尚不确切，治疗费用较高，所以该方法尚存在一定的弊端，为此，我们提供用于治疗白癜风的黑色素细胞的培养方法及应用
。

技术实现思路

[0005]为了克服现有技术的不足，本专利技术提供用于治疗白癜风的黑色素细胞的培养方法及应用，以解决上述背景技术中提出的问题
。
[0006]为解决上述技术问题，本申请的一个方面提供：用于治疗白癜风的黑色素细胞的培养方法，所述黑色素细胞的培养方法包括以下步骤：
[0007]步骤一，确定供皮区；
[0008]步骤二，使用负压分离方法负压吸引，使得供皮区产生丰满水疱；
[0009]步骤三，用虹膜剪将供皮区水疱沿基底部剪下，分离水疱中黑色素细胞，黑色素细胞置于添加有碱性成纤维细胞生长因子的培养基中进行体外培养繁殖
、
分裂
。
[0010]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述供皮区选择腹部或四肢近端正常皮肤
。
[0011]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述负压分离方法采用负压吸引装置负压吸引供皮区，产生
0.8
‑
1cm
大小的丰满水疱
。
[0012]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述培养基为
DMEM、RPM l 1640
培养基
、MCDB153
的其中一种
。
[0013]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述培养基放置于
36
‑
38℃、4
‑6％
CO2
饱和湿度环境的培养箱，每2‑4天添加一次平衡剂及补充剂
。
[0014]作为本专利技术的一种优选技术方案，通过虹膜剪将剪下的表皮组织再分剪成1‑
2cm
×1‑
2cm
的小片，紫外线处理
10
‑
15
分钟
。
[0015]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述平衡剂为氯化钠
、
碳酸氢钠和无水磷酸二氢钠的混合溶液，且浓度分别为氯化钠
5g/L、
碳酸氢钠
2g/L、
无水磷酸二氢钠
0.62g/L。
[0016]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述补充剂为氨基酸
20
‑
25
％
、25
‑
30
％葡萄糖
。
[0017]作为本专利技术的一种优选技术方案，所述黑色素细胞的培养方法包括以下步骤：
[0018]步骤一，使用皮肤打孔器从患者头部取少量含有毛囊的头皮，分离毛囊中黑色素细胞；
[0019]步骤二，黑色素细胞置于添加有碱性成纤维细胞生长因子的培养基中进行体外培养繁殖
、
分裂
。
[0020]本申请的另一个方面，提供一种上述用于治疗白癜风的黑色素细胞的培养方法在治疗白癜风中应用
。
[0021]与现有技术相比，本专利技术能达到的有益效果是：
[0022]通过在培养基中添加的碱性成纤维细胞生长因子，碱性成纤维细胞生长因子可刺激黑色素细胞的生长，提高黑色素细胞的存活率，提高了扩增效率；
[0023]每2‑4天添加一次平衡剂及补充剂，保证培养基环境的稳态，防止由于
pH
值和渗透压的波动影响细胞活性，同时，培养期间不需要补充培养基，防止培养基污染，避免了安全隐患，具有安全性高的优点
。
具体实施方式
[0024]为了使本专利技术实现的技术手段
、
创作特征
、
达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术，但下述实施例仅仅为本专利技术的优选实施例，并非全部
。
基于实施方式中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得其它实施例，都属于本专利技术的保护范围
。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，下述实施例中所用的材料
、
试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到
。
[0025]本专利技术提供用于治疗白癜风的黑色素细胞的培养方法，黑色素细胞的培养方法包括以下步骤：
[0026]步骤一，确定供皮区，供皮区选择腹部或四肢近端正常皮肤；
[0027]步骤二，使用负压分离方法负压吸引，使得供皮区产生丰满水疱；
[0028]步骤三，用虹膜剪将供皮区水疱沿基底部剪下，分离水疱中黑色素细胞，黑色素细胞置于添加有碱性成纤维细胞生长因子的培养基中进行体外培养繁殖
、
分裂
。
[0029]本实施例公开了，负压分离方法采用负压吸引装置负压吸引供皮区，产生
0.8
‑
1cm
大小的丰满水疱
。
可理解为，水疱为
0.8
‑
1cm
之间的任意值，例如：
0.8cm、0.85cm、0.9cm、0.95cm、1cm
等
。
[0030]本实施例公开了，培养基为
DMEM、RPM l 1640
培养基
、MCDB153
的其中一种
。
可理解为选用培养基为
DMEM
或
RPM l 1640
培养基或
MCDB153。
[0031]本实施例公开了，培养基放置于
36
‑
38℃、4
‑6％
CO2
饱和湿度环境的培养箱，每2‑4天添加一次平衡剂及补充剂
。
可理解为，培养基放置于
36...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
用于治疗白癜风的黑色素细胞的培养方法，其特征在于，所述黑色素细胞的培养方法包括以下步骤：步骤一，确定供皮区；步骤二，使用负压分离方法负压吸引，使得供皮区产生丰满水疱；步骤三，用虹膜剪将供皮区水疱沿基底部剪下，分离水疱中黑色素细胞，黑色素细胞置于添加有碱性成纤维细胞生长因子的培养基中进行体外培养繁殖
、
分裂
。2.
根据权利要求1所述的用于治疗白癜风的黑色素细胞的培养方法，其特征在于，所述供皮区选择腹部或四肢近端正常皮肤
。3.
根据权利要求1所述的用于治疗白癜风的黑色素细胞的培养方法，其特征在于，所述负压分离方法采用负压吸引装置负压吸引供皮区，产生
0.8
‑
1cm
大小的丰满水疱
。4.
根据权利要求1所述的用于治疗白癜风的黑色素细胞的培养方法，其特征在于，所述培养基为
DMEM、RPMl 1640
培养基
、MCDB153
的其中一种
。5.
根据权利要求1所述的用于治疗白癜风的黑色素细胞的培养方法，其特征在于，所述培养基放置于
36
‑
38℃、4
‑6％
CO2
饱和湿度环境的培养箱，每2‑4天添加一次平衡剂及补充剂
。6.
根据权利要求3所述的用于治...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐忆琳，邓丹霞，
申请(专利权)人：中莱美康再生医学科技广州有限公司，
类型：发明
国别省市：