一种高浓度纳米金溶液的制备及抗体偶联方法技术

本发明专利技术属于体外诊断试剂领域，涉及一种高浓度纳米金溶液的制备及抗体偶联方法

【技术实现步骤摘要】
一种高浓度纳米金溶液的制备及抗体偶联方法


[0001]本专利技术属于体外诊断试剂领域，涉及一种高浓度纳米金溶液的制备及抗体偶联方法
。

技术介绍

[0002]1971
年
Faulk
和
Taylor
首次采用免疫金染色
(immunogold staining
，
IGS)
将兔抗沙门氏菌抗血清与纳米金颗粒结合，用直接免疫细胞化学技术检测沙门氏菌的表面抗原，开创了纳米金免疫标记技术
。
[0003]目前在体外诊断试剂领域，胶体金法试纸条的市场规模达到了百亿级别，随之而来的问题是胶体金试纸条的产能问题
。
例如许多新冠抗原厂家每天的订单都达到了百万人份
。
常规的纳米金溶液浓度普遍在万分之一到万分之4之间，
1L
的纳米金溶液可以生产2～5万人份的胶体金试纸条
。
利用常规纳米金溶液生产极大的受到了离心设备的制约，因此需要一种高浓度的纳米金溶液和新的抗体偶联方法，以提高生产效率
。
[0004]本专利技术研发了一种高浓度纳米金溶液的制备方法和新的抗体偶联方法，纳米金的浓度可以达到1％，是常规纳米金溶液的
25
～
100
倍
。
利用本专利技术的纳米金溶液和偶联方法可以将胶体金试纸条生产时溶液的体积缩小
25
～
100
倍，可以极大的提高生产效率
。/>
技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种高浓度纳米金溶液的制备方法及其抗体偶联方法
。
本专利技术制备的纳米金溶液浓度高
、
分散性好
、
粒径均匀
、
偶联方法简单，可以用于提高体外诊断试剂生产企业胶体金生产线的生产效率
。
[0006]为了实现本专利技术的目的，本专利技术的技术方案如下：
[0007](
一
)
试剂准备
[0008](1)
将去离子水中加入氯金酸，配制成浓度为
2g/L
的氯金酸溶液；
[0009](2)
将装有去离子水的容器置于冰浴中，加入硼氢化钠，配制成浓度为
0.75g/L
的硼氢化钠溶液；
[0010](3)
将去离子水中加入盐酸羟胺，配制成浓度为
3.75g/L
的盐酸羟胺溶液；
[0011](4)
将去离子水中加入柠檬酸，配制成浓度为
0.258g/L
的柠檬酸溶液；
[0012](5)
将去离子水中加入硼砂，配制成浓度为
1.9g/L
的硼砂溶液；
[0013](6)
将去离子水中加入牛血清白蛋白，配制成浓度为
100g/L
的牛血清白蛋白溶液；
[0014](
二
)
实验步骤
[0015](1)
在
20
～
100mL
去离子水中加入
100
～
200
μ
L
氯金酸溶液，然后加入
0.1
～
10g
十六烷基三甲基氯化铵，充分混匀后，再加入
0.1
～
10mL
硼氢化钠溶液，缓慢混匀
0.5
～
5h
，得到种子溶液；
[0016](2)
在种子溶液中加入
100
～
1000mL
盐酸羟胺溶液并搅拌均匀，一边搅拌一边以
10mL/min
的速度加入
100
～
1000mL
的氯金酸溶液；
[0017](3)
将
(2)
中得到的纳米金溶液以
8000
～
15000rpm
的转速离心
0.5
～
5h
，弃掉上清液，将沉淀溶解至
100mL
即得到高浓度纳米金溶液；
[0018](4)
取
0.1
～
1mL
柠檬酸溶液，加入1～
10mL
硼砂溶液，加入1～
10mL
高浓度纳米金溶液混合均匀，加入
100
～
1000
μ
g
抗体，缓慢混匀
0.5
～
5h
；
[0019](5)
加入
100
～
1000
μ
L
牛血清白蛋白溶液，继续缓慢混匀
0.5
～
5h
，在2～
8℃、8000
～
15000rpm
的转速离心
0.5
～
5h
，弃掉上清，将沉淀用
pH
为
7.2
浓度为
0.02mol/L
的
PBS
溶解即得到抗体偶联的纳米金溶液
。
[0020]有益效果：本专利技术提供了一种高浓度的纳米金溶液的制备方法和抗体偶联方法，可以将胶体金试纸条生产中抗体偶联工艺的体积显著缩小，从而提高生产效率
。
同时按本专利技术制备出的纳米金溶液浓度高
、
分散性好
、
粒径均匀
、
偶联方法简单
。
具体实施方式
[0021]结合实施例对本专利技术做进一步说明，但不以任何方式对本专利技术加以限制，基于本专利技术教导所做出的任何变更或改进，均属于本专利技术的保护范围
。
[0022]实施例一
[0023]制备高浓度纳米金溶液：
[0024](1)
在
50mL
去离子水中加入
170
μ
L
氯金酸溶液，然后加入
3.2g
十六烷基三甲基氯化铵，充分混匀后，再加入
90
μ
L
硼氢化钠溶液，缓慢混匀
1h
，得到种子溶液；
[0025](2)
在种子溶液中加入
250mL
盐酸羟胺溶液并搅拌均匀，一边搅拌一边以
10ml/min
的速度加入
500mL
的氯金酸溶液；
[0026](3)
将
(2)
中得到的纳米金溶液以
10000rpm
的转速离心
0.5h
，弃掉上清液，将沉淀溶解至
100mL
即得到高浓度纳米金溶液；
[0027]实施例二
[0028]高浓度纳米金溶液的抗体偶联：
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种高浓度纳米金溶液的制备及抗体偶联方法，其特征在于所述方法步骤如下：
(1)
在
20
～
100mL
去离子水中加入
100
～
200
μ
L
氯金酸溶液，然后加入
0.1
～
10g
十六烷基三甲基氯化铵，充分混匀后，再加入
0.1
～
10mL
硼氢化钠溶液，缓慢混匀
0.5
～
5h
，得到种子溶液；
(2)
在种子溶液中加入
100
～
1000mL
盐酸羟胺溶液并搅拌均匀，一边搅拌一边以
10ml/min
的速度加入
100
～
1000mL
的氯金酸溶液；
(3)
将
(2)
中得到的纳米金溶液以
8000
～
15000rpm
的转速离心
0.5
～
5h
，弃掉上清液，将沉淀溶解至
100mL
即得到高浓度纳米金溶液；
(4)
取
0.1
～
1mL
柠檬酸溶液，加入1～
10mL
硼砂溶液，加入1～
10mL
高浓度纳米金溶液混合均匀，加入
100
～
1000
μ
g
抗体，缓慢混匀
0.5
～
5h
；
(5...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘浩，孙萌，韩建勋，杨柏崇，魏海燕，
申请(专利权)人：北京谱尼生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：