甲状腺乳头状癌的术前诊断和制造技术

本发明专利技术涉及甲状腺乳头状癌的诊断和风险评估技术领域，尤其涉及一种用于甲状腺乳头状癌的术前诊断和

【技术实现步骤摘要】
甲状腺乳头状癌的术前诊断和/或风险评估的组合物、应用和系统


[0001]本专利技术涉及甲状腺乳头状癌的诊断和风险评估
，尤其涉及一种用于甲状腺乳头状癌的术前诊断和
/
或风险评估的组合物
、
应用和系统
。

技术介绍

[0002]甲状腺癌是内分泌系统最常见的恶性肿瘤，全球发病率以每年
3.6%
的增幅上升，成为增长速度最快的恶性肿瘤之一
。2020
年全球癌症统计数据显示
,
甲状腺癌新增病例高达
58.6
万，在全球癌症发病率中排名第9位，其中女性甲状腺癌发病率
10.1/10
万，为全球女性第5大高发癌症，占全部恶性肿瘤新发人数的
3.8%。2018
年全国肿瘤登记年报显示，我国甲状腺癌发病率为
13.17/10
万，女性发病率为
20.28/10
万，在恶性肿瘤和女性恶性肿瘤中分别是第7位和第4位，是增长速度最快的恶性肿瘤之一
。
因此，甲状腺癌逐渐成为我国公共卫生健康方面的一个亟需解决的问题
。
[0003]甲状腺癌常见的病理类型有甲状腺乳头状癌（
papillary thyroid carcinoma, PTC
）
、
甲状腺滤泡状癌（
follicular thyroid carcinoma, FTC
）
、
甲状腺髓样癌（
medullary thyroid carcinoma, MTC
）和甲状腺未分化癌（
anaplastic thyroid carcinoma, ATC
）
。
其中
PTC
占所有甲状腺癌的
90%
以上
。
在甲状腺乳头状癌中，最常见的临床表现为甲状腺结节，超声引导下细针穿刺细胞学检查（
Fine Needle Aspiration Biopsy
，
FNAB
）对甲状腺结节的诊断尤为重要，其虽然大大提高了甲状腺癌的检出率和诊断准确率，但仍有
25%
～
30%
的
FNA
样本诊断不明确，这一部分为“不确定细胞学”，即意义不明的非典型或滤泡状病变（
FNA
ꢀⅢ
类）和滤泡状肿瘤或可疑滤泡状肿瘤（
FNA
ꢀⅣ
类），以上均有不能忽略的恶性风险（
10%
～
30%
和
25%
～
40%
）
。
根究一项研究统计，考虑到小结节直径和病理学家的诊断经验，据报告，大约
17%
（
10%
‑
26%
）的
FNAB
不确定，
6%
（
1%
‑
11%
）无法诊断
[9, 10]。
这些结果不确定或无法诊断的患者大多接受重复的
FNAB
或不必要的诊断手术，使他们遭受甲状腺激素的终身替代治疗和相应的手术并发症
。
因此，对甲状腺结节进行精确的良恶性诊断至关重要，这不仅可以使甲状腺癌的病人得到及时有效的治疗，提高患者的生存率，还可以使甲状腺良性的病人避免过度治疗
。
同时，
PTC
是一种侵袭性相对较低
、
预后良好的肿瘤，五年生存率可达
90%
以上，因此已有一些研究认为，部分低危的
PTC
，尤其是甲状腺乳头状微小癌，可以通过密切的随访来替代手术治疗
。
然而在临床中，仍有高达
10%
的
PTC
患者，易出现转移，肿瘤的复发率和死亡率高
。
针对该部分患者缺乏有效的术前预测模型，如果仅凭借医生的临床经验对甲状腺癌病人进行随访或手术治疗，往往导致低危病人的过度治疗，而部分高危病人延误手术治疗时机，从而造成手术范围和难度的扩大
。
因此，鉴于甲状腺癌的预后差异性，迫切需要建立一套术前风险评估体系来精准区分不同危险分层的甲状腺癌，指导临床手术决策和术后随访计划
。
[0004]申请人申请的中国专利技术专利申请（公开号：
CN114606315A
，公开日：
2022
‑
06
‑
10
）公开了一种甲状腺乳头状癌的生物标记物及
PIM1
基因抑制剂在制备抗甲状腺乳头状癌制剂
中的应用，所述生物标记物为受
BRAF V600E
突变调控的
PIM1
蛋白
。
该专利技术研究
PIM1
基因及
BRAF V600E
突变在
PTC
病理发展过程中的作用，发现
PIM1
在
PTC
的发生发展中可能起着重要的致癌作用，并且，
PIM1
在
PTC
中的作用是受到了上游
BRAF V600E
突变和
NOX4
的调控，即
BRAF V600E
突变调控
NOX4
，然后
NOX4
再调控
PIM1。
[0005]申请人申请的中国专利技术专利申请（公开号：
CN112852960A
，公开日：
2021
‑
05
‑
28
）公开了一种甲状腺乳头状癌的生物标记物及
PIM1
基因抑制剂在制备抗甲状腺乳头状癌制剂中的应用，所述生物标记物为
PIM1
基因及其表达产物
。
本专利技术研究
PIM1
基因在
PTC
病理发展过程中的作用，发现
PIM1
在
PTC
的发生发展中可能起着重要的致癌作用，并且
PIM1
与
NOX4
的表达显著相关，即
PIM1
在
PTC
中受
NOX4
的调控，从而发挥其在氧化损伤中的作用
。
可见，该专利技术对
PTC
的发病机制的理论研究具有重要的意义和价值，并且，该专利技术中的生物标记物能作为
PTC
诊断的标记物，从而提高
PTC
诊断的准确性，为
PTC
诊断产品的研究提供理论基础
。
[0006]中国专利技术专利申请（公开号
CN111808950A
，公开日： 2020
‑
10
‑
本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种用于甲状腺乳头状癌的术前诊断和
/
或风险评估的组合物，其特征在于，该组合物包括用于测量
CLAUDIN
‑
16
蛋白（
NCBI Gene: 10686
）表达水平，和
/
或编码
CLAUDIN
‑
16
蛋白的基因的
mRNA
表达水平的试剂
。2.
根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，该组合物还包括用于测量
BRAF 基因
V600E
位点的突变的试剂
。3.
根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，所述用于测量蛋白表达水平的试剂包含抗体
、
寡肽
、
配体
、PNA
或适体，所述试剂可特异性结合至所述蛋白；和
/
或，所述用于测量
mRNA
表达水平的试剂包含引物
、
探针或反义核苷酸，所述试剂可特异性结合至编码所述标记物蛋白的基因的
mRNA
；测试方法包括
PCR、
基因芯片
、
二代高通量测序中的任意一种或至少两种的组合
。4.
权利要求1‑3中任意一项权利要求所述的组合物在制备用于甲状腺乳头状癌的术前诊断和
/
或风险评估的试剂中的应用
。5.
一种用于甲状腺乳头状癌的术前诊断和
/
或风险评估的系统，该系统包括：1）权利要求1‑3中任意一项权利要求所述的组合物；2）采用所述的组合物进行蛋白表达水平和
/
或编码蛋白的基因的
mRNA
表达水平测试的设备；3）计算机设备，所述计算机设备包括存储器和处理器，存储器存储甲状腺乳头状癌的术前诊断模型和
/
或风险评估模型；处理器执行通过所述的术前诊断模型和
/
或风险评估模型对甲状腺乳头状癌的原发灶和转移灶进行精准的诊断，和
/
或对甲状腺乳头状癌的疾病风险进行精准预测
。6.
根据权利要求5所述的系统，其特征在于，受试者样品是血液
、
血清或血浆
。7.
根据权利要求5所述的系统，其特征在于，蛋白表达水平的测量或比较通过使用选自以下的至少一种来进行：蛋白芯片测定
、
免疫测定
、
配体结合测定
、MALDI
‑
TOF(
基质辅助激光解吸
/
电离飞行时间质谱
)、SELDI
‑
TOF(
表面增强激光解吸
/
电离飞行时间质谱
)、
补体结合试验
、2
‑
D
电泳
、
液相色谱
‑
质谱
(LC
‑
MS)、
液相色谱
‑
质谱
/
质谱
(LC
‑
MS/MS)
；和
/
或，
mRNA
表达水平的测量通过使用反转录聚合酶链式反应
(RT
‑
PCR)、
核糖核酸酶保护测定
、RNA
印迹法
、DNA
芯片或二代高通量测序方法来进行；作为优选，编码
CLAUDIN
‑
16
蛋白的基因的
mRNA
表达水平的测量采用二代高通量测序方法，包括以下的步骤：1）将
mRNA
打断成
200nt
至
700nt
的短片段后以
mRNA
为模板，用六碱基随机引物合成第一条
eDNA
链；2）加入缓冲液
、dNTPs、RNaseH
和
DNA
聚合酶
I
合成第二条
eDNA
链；3）在经过
QiaQuickPCR
试剂盒纯化并加
EB
缓冲液洗脱之后做末端修复，加
polyA
并连接测序接头，然后采用琼脂糖凝胶电泳进行片段大小选择，最后进行
PCR
扩增建立测序文库；4）构建转录组文库，凝胶电泳进行质检后上机，进行测序得到测序序列；5）在测序后过滤掉原始数据中不合格的序列，得到有效数据用于后续分析
。8.
根据权利要求7所述的系统...

【专利技术属性】
技术研发人员：葛明华，蔡业丰，郑国湾，宋法寰，朱磊，郭雅文，段艳婷，蒋烈浩，胡逸群，马文丽，丁玲玲，梁瑞敏，华特波，
申请(专利权)人：浙江省人民医院，
类型：发明
国别省市：