一种超灵敏数字化免疫传感方法技术

本发明专利技术公开了一种超灵敏数字化免疫传感方法，磁颗粒与初级抗体偶联；次级抗体利用单链信号

【技术实现步骤摘要】
一种超灵敏数字化免疫传感方法


[0001]本专利技术属于分析传感领域，主要涉及一种超灵敏数字化免疫传感方法
。

技术介绍

[0002]复杂介质中蛋白质的超灵敏检测对于医学诊断
、
生物标志物发现和药物研发等至关重要
。
例如，在神经源性疾病中，如帕金森病（
PD
）和阿尔茨海默病（
AD
），蛋白的生物标志物由于血脑屏障的存在而以极低的水平存在于外周血中
。
使用如酶联免疫吸附测定（
ELISA
）或化学发光等传统分析方法定量检测这些生物标志物是具有挑战性的
。
因此，目前
PD
和
AD
在临床诊断上仍依赖于医学成像和病理分析，而不是分子图谱
。
近年来，超灵敏的免疫传感取得了快速发展，有代表性的如单分子免疫传感技术和超灵敏电化学发光等
。
其中，数字免疫传感在超高灵敏度（如亚飞摩尔检测）方面引起了越来越多的关注
。
原则上，数字免疫传感依赖于将本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种超灵敏数字化免疫传感方法，其特征在于：磁颗粒与初级抗体偶联；次级抗体利用单链信号
DNA
修饰；所述的初级抗体
、
次级抗体分别识别目标蛋白形成三明治结构的磁颗粒免疫复合物；分离除去磁颗粒，得到游离的三明治结构的免疫复合物；通过液滴发生器将游离的三明治结构的免疫复合物加载到油包水（
W/O
）微滴中；扩增单链信号
DNA
，产生荧光微滴；计数荧光微滴从而得到目标蛋白的含量
。2.
根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的磁颗粒为金包磁纳米颗粒（
Au@MNPs
）
。3.
根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的磁颗粒与初级抗体偶联使用两端分别带不同基团的双链链接
DNA
，磁颗粒与双链链接
DNA
之间形成金硫共价键，初级抗体和双链链接
DNA
之间形成酰胺键
。4.
根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的单链信号
DNA
修饰的次级抗体使用生物素和链霉亲和素之间的相互共价结合
。5.
根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述的双链链接
DNA
使用限制性核酸内切酶特异性酶切的方法处理，释放三明治结构的免疫复合物
。6.
根据权利要求1所述的方法，其特征在于：通过液滴发生器将游离免疫复合物加载到油包水（
W/O
）微滴中，...

【专利技术属性】
技术研发人员：程潇羽，何赛灵，张川，郑凯欣，张冉冉，朱易成，夏林骁，马一承，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：