一种胰腺癌组织类器官消化液及培养方法技术

本发明专利技术涉及肿瘤类器官培养技术领域的包括2％

【技术实现步骤摘要】
一种胰腺癌组织类器官消化液及培养方法


[0001]本专利技术涉及肿瘤类器官培养
，特别涉及一种胰腺癌组织类器官消化液及培养方法
。

技术介绍

[0002]胰腺癌是最致命的恶性肿瘤之一，严重危害人类健康，因为它诊断较晚，对治疗反应有限，因此迫切需要一种易于处理的方法来识别和诊断胰腺肿瘤发生的途径
。Sylvia F.Boj
团体在
2014
年首次建立了原发性胰腺癌类器官，且成功建立了8例患者来源的胰腺癌类器官样本库，来源于胰腺癌患者切除和活检肿瘤组织所建立的胰腺癌类器官保留了肿瘤组织病理学和肿瘤基因突变特征，可用于药物筛查
、
高通量药物筛选及个性化治疗
。
[0003]申请号为
【CN202210817864.7】
的专利文本中公开了一种胰腺癌类器官及其培养方法
、
培养用培养基和用途，该专利通过将胰腺癌组织细胞与培养基和基质胶混合，得到待培养物，其中，培养基中含有苯丁酸钠和
H
‑
1152
，以所述本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种胰腺癌组织类器官消化液，其特征在于，包括2％
‑4％的青霉素
‑
链霉素
、1
％的
HEPES、
烟酰胺1‑
20mM、N
‑
乙酰半胱氨酸1‑
10mM、Y
‑
27632 1
‑
50
μ
M、
胶原酶
II 0.1
‑
0.5mg/mL、
胶原酶
IV 0.2
‑
0.8mg/mL、
胶原酶
V 0.3
‑
0.8mg/mL、
透明质酸酶
0.1
‑
0.8mg/mL
和1％
GlutaMAXSupplement
；所述消化液配合
Advanced DMEM/F
‑
12
培养基用于培养胰腺癌组织类器官
。2.
根据权利要求1所述的一种胰腺癌组织类器官消化液，其特征在于，所述
AdvancedDMEM/F
‑
12
培养基包括添加成分，所述添加成分如下：
R
‑
spondin1500ng/ml、1
％的
N2、1
％的
B27、1
％的
GlutaMAX Supplement、1
％的
HEPES、
烟酰胺1‑
10mM、
青霉素
‑
链霉素1％
、N
‑
乙酰半胱氨酸
1.25mM、A8301 5
μ
M、
胃泌素
I15nM、EGF 30ng/ml、Noggin 30ng/ml、Y
‑
27632 15
μ
M、
前列腺素
E21
μ
M/ml、Wnt
‑
3a 30ng/ml、
成纤维细胞生长因子
10 30ng/ml。3.
一种使用如权利要求1‑3任意一项所述的一种胰腺癌组织类器官消化液培养胰腺癌组织类器官的方法，其特征在于，包括步骤如下：
S1、
获取胰腺癌类器官组织样本，将胰腺癌组织类器官样本用预冷的
PBS
缓冲液反复清洗，剪碎并切成面积为
1mm2的碎片，加入3‑
5ml
所述消化液至
50ml
离心管中；
S2、
加入
S1
步骤中获取的组织混合液的3倍体积的预冷的
PBS
缓冲液至离心管，终止原代消化，通过移液管反复吹打组织混合液直至组织碎片消失，取出部分消化后的溶液放在显微镜下观察，当观察到为均匀的细胞团时，通过低温低速离心，重悬细胞团，通过显微镜对细胞团数量进行计数，根据需要接种的孔数，将相应的细胞团转移至
1.5ml
或
2ml
离心管
300g
离心
5min
...

【专利技术属性】
技术研发人员：方国庆，李长杰，高玉婷，吴佳欢，
申请(专利权)人：上海捷方凯瑞生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：