用于使用分子内到分子间构象转换控制蛋白质二聚化的方法技术

本文提供了一种用于调节蛋白质二聚化动力学的系统

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于使用分子内到分子间构象转换控制蛋白质二聚化的方法
[0001]相关申请交叉引用
[0002]本申请要求于
2021
年3月5日提交的美国临时申请
63/200,428
的权益，所述美国临时申请的公开内容特此通过引用整体并入本文中
。
[0003]序列表的引用
[0004]题为“Sequence_Listing_354096.txt”的序列表是
ASCII
文本文件并且通过引用整体并入本文中
。
所述文本文件创建于
2021
年3月5日并且大小为
134KB。


[0005]本公开总体上涉及用于使用分子内到分子间构象转换来控制生物传感器的蛋白质二聚化或寡聚化的组合物
、
多肽
、
方法和系统
。

技术介绍

[0006]对生物或环境样品中的分析物的快速
、
廉价和灵敏的检测将极大地改善健康和安全
。
例如，在家中或护理点检测病毒或细菌感染和生理生物标志物将使诊断更加准确和快速，同时限制对他人的暴露
。
快速和廉价的测试还允许对供水
、
餐厅表面和其它潜在暴露源进行频繁测试，以进一步减少现有或新出现疾病的传播
。
然而，目前的方法由于时间
、
专业知识和通常需要的特殊设备而受到限制，导致高成本和缓慢的周转时间
。
[0007]一种用于简化这些测定的建议方法是产生一种在分析物结合时重构的分裂酶或多聚体蛋白复合物
。
然而，目前这些方法的灵敏度有限，因为需要与分析物连续结合以获得酶活性，这阻止了直接的信号扩增
。
因此，系统必须被设计成尽可能有利于酶形成，但这可能导致在没有分析物的情况下酶的非特异性重构，从而导致大量的假阳性
。
为了解决这些问题，需要复杂的机制来将解决方案分成各种组件或预处理步骤，但是这增加了系统的成本和复杂性
。

技术实现思路

[0008]提供了一种用于调节蛋白质二聚化动力学的系统
。
所述系统包含第一多肽，所述第一多肽包括第一
α
螺旋形成氨基酸序列，所述第一
α
螺旋形成氨基酸序列被配置成与由第一柔性连接子肽连接的第二
α
螺旋形成氨基酸序列结合；以及第二多肽，所述第二多肽包括第三
α
螺旋形成氨基酸序列，所述第三
α
螺旋形成氨基酸序列被配置成与由第二柔性连接子肽连接的第四
α
螺旋形成氨基酸序列结合
。
所述第一
α
螺旋形成氨基酸序列和所述第三
α
螺旋形成氨基酸序列被配置成形成卷曲螺旋
。
所述第二
α
螺旋形成氨基酸序列和所述第四
α
螺旋形成氨基酸序列被配置成形成卷曲螺旋
。
[0009]本文提供了一种生物传感器
。
所述生物传感器包含：第一多肽，所述第一多肽包括第一
α
螺旋形成氨基酸序列，所述第一
α
螺旋形成氨基酸序列被配置成与由第一柔性连接子肽连接的第二
α
螺旋形成氨基酸序列结合；第二多肽，所述第二多肽包括第三
α
螺旋形成氨基酸序列，所述第三
α
螺旋形成氨基酸序列被配置成与由第二柔性连接子肽连接的第四
α
螺
旋形成氨基酸序列结合；以及与所述第一多肽可操作地连接的第一信号生成组分和与所述第二多肽可操作地连接的第二信号生成组分，以及与所述第一多肽可操作地连接的第一分析物结合组分和与所述第二多肽可操作地连接的第二分析物结合组分，所述第一分析物结合组分和所述第二分析物结合组分被配置成在分析物结合时促进二聚体的形成，所述二聚体在从所述分析物解离之后将持续存在
。
所述第一
α
螺旋形成氨基酸序列和所述第三
α
螺旋形成氨基酸序列被配置成形成卷曲螺旋
。
所述第二
α
螺旋形成氨基酸序列和所述第四
α
螺旋形成氨基酸序列被配置成形成卷曲螺旋
。
[0010]本文提供了一种用于分析物检测的方法
。
所述方法包含将含有分析物的样品与测试溶液混合，所述测试溶液包括：第一多肽，所述第一多肽包括第一
α
螺旋形成氨基酸序列，所述第一
α
螺旋形成氨基酸序列被配置成与由第一柔性连接子肽连接的第二
α
螺旋形成氨基酸序列结合；第二多肽，所述第二多肽包括第三
α
螺旋形成氨基酸序列，所述第三
α
螺旋形成氨基酸序列被配置成与由第二柔性连接子肽连接的第四
α
螺旋形成氨基酸序列结合；以及与所述第一多肽可操作地连接的第一信号生成组分和与所述第二多肽可操作地连接的第二信号生成组分，以及与所述第一多肽可操作地连接的第一分析物结合组分和与所述第二多肽可操作地连接的第二分析物结合组分，所述第一分析物结合组分和所述第二分析物结合组分被配置成在分析物结合时促进二聚体的形成，所述二聚体在从所述分析物解离之后将持续存在
。
所述第一
α
螺旋形成氨基酸序列和所述第三
α
螺旋形成氨基酸序列被配置成形成卷曲螺旋
。
所述第二
α
螺旋形成氨基酸序列和所述第四
α
螺旋形成氨基酸序列被配置成形成卷曲螺旋；以及检测信号
。
[0011]前文广泛地概述了本公开的特征和技术优势，以便可以更好地理解下面的详细描述
。
下文中将对本公开的形成本申请的权利要求的主题的另外的特征和优点进行描述
。
本领域的技术人员应当理解，本文中公开的概念和特定方面可以容易地用作修改或设计其它方面的基础，以在本公开的精神和范围内实施本公开的相同目的，并且在所附权利要求书中提供
。
附图说明
[0012]本专利或申请文件含有至少一张彩色附图
。
在请求并支付必要的费用后，将由专利局提供带有彩色附图的本专利或专利申请公开物的副本
。
[0013]下文具体参考附图提供本专利技术的详细描述，其中：图
1A
示出了结合以形成卷曲螺旋的两个
α
螺旋之间的相互作用
。
[0014]图
1B
示出了各种取代对结合自由能的作用
。
[0015]图
2A
示出了由各个实施例的分子内
α
螺旋结合引起的发夹结构
。
[0016]图
2B
示出了各个实施例的可能构象和分子本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】NO:62、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:65、SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:67、SEQ ID NO:68、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:70、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:72
和
SEQ ID NO:73。10.
根据权利要求1所述的系统，其中所述第一多肽是选自由以下组成的组的氨基酸序列：
SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:61、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:65、SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:67、SEQ ID NO:68、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:70、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:72
和
SEQ ID NO:73。11.
根据权利要求1所述的系统，其中所述第二多肽是选自由以下组成的组的氨基酸序列：
SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:61、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:65、SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:67、SEQ ID NO:68、SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:70、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:72
和
SEQ ID NO:73。12.
根据权利要求1所述的系统，其进一步包括与所述第一多肽可操作地连接的第一信号生成组分和与所述第二多肽可操作地连接的第二信号生成组分以及与所述第一多肽可操作地连接的第一分析物结合组分
。13.
根据权利要求
12
所述的系统，其中所述第一信号生成组分和所述第二信号生成组分是分裂酶的亚基
。14.
根据权利要求
13
所述的系统，其中所述分裂酶是荧光蛋白
、
过氧化物酶
、
生物发光生成酶
、FRET
对或多聚体酶复合物
。15.
一种生物传感器，其包括：第一多肽，所述第一多肽包括第一
α
...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔纳森，
申请(专利权)人：杨百翰大学，
类型：发明
国别省市：