一种食物过敏特异性抗原及其提取方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种食物过敏特异性抗原及其提取方法和应用，涉及蛋白提取领域

【技术实现步骤摘要】
一种食物过敏特异性抗原及其提取方法和应用


[0001]本专利技术涉及蛋白提取领域，尤其涉及一种食物过敏特异性抗原及其提取方法和应用
。

技术介绍

[0002]食物过敏等过敏性疾病在全球的发病率日益增高，影响了全世界近四分之一的人口，过敏原是指食物中能够引起机体免疫系统异常反应的成分，是诱发过敏的重要因素
。
目前过敏原检测的方法除了使用皮肤点刺试验进行体内检测，主要是通过食物特异性抗体检测试剂盒进行体外诊断
。
食物特异性抗体检测试剂盒的原理是将血清样本
(
血清中特异性抗体
)
与试剂盒中包被有食物特异性抗原的载体结合，从而形成食物特异性抗原
‑
抗体复合物，其余没有结合上的物质则通过清洗而被去除，之后再加入辣根过氧化物酶标记的羊抗人
IgG
形成新的免疫复合物，该免疫复合物可与显色底物液结合，发生颜色反应，继而可以根据色度判断血清中食物特异性抗体水平
。
[0003]针对食物特异性抗原的检测方法，需要研究出适用于不同食物中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种食物过敏特异性抗原的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)
取样品洗净
、
组织破碎
、
细胞破碎后，离心获得粗蛋白溶液；
(2)
在粗蛋白溶液中加入正己烷，混匀后离心收集水相，过滤后得滤液；
(3)
在冰浴条件操作，在滤液中少量多次加入超微粉碎的硫酸铵搅拌后静置，离心收集沉淀；
(4)
沉淀用
Tris
‑
Hcl
溶解，冰上放置，离心留上清，弃沉淀；
(5)
上清利用超滤离心管浓缩，再次加入
Tris
‑
Hcl
置换缓冲液至浓缩前体积，得蛋白溶液；在步骤
(1)
中，所述样品为肉类
、
植物或奶制品
。2.
如权利要求1所述的一种食物过敏特异性抗原的提取方法，其特征在于，在步骤
(1)
中，所述样品为文蛤
、
龙虾
、
对虾
、
鸡肉
、
牛肉
、
鳕鱼
、
带鱼
、
蟹
、
大豆
、
小麦
、
大米
、
香菇
、
玉米
、
芒果
、
香蕉或西红柿，取样品用水洗净，吸干水分，剪碎
、
切碎或超微破碎，随后液氮速冻，研磨成肉糜，按照质量
/
体积比为1：
(10
‑
20)
加入
50mmol/L Tris
，超声处理，离心取上清，得粗蛋白溶液
。3.
如权利要求1所述的一种食物过敏特异性抗原的提取方法，其特征在于，在步骤
(1)
中，所述样品为鸡蛋
、
牛奶或羊奶，取样品按照质量
/
体积比为1：
(2
‑
5)
加入
50mmol/L Tris
，超声处理，离心取上清，得粗蛋白溶液
。4.
如权利要求1所述的一种食物过敏特异性抗原的提取方法，其特征在于，在步骤
(2)
中，所述粗蛋白溶液和正己烷的体积比为2：
1。5.
如权利要求1所述的一种食物过敏特异性抗原的提取方法，其特征在于，在步骤
(5)
中，满足以下
a)
或
b)
的保存条件：
a)
在步骤
(5)
中，将总蛋白溶液按...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊晓明，姜源盛，刘旭昭，沈顺章，陈芬玲，
申请(专利权)人：厦门奥姆莱特生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：