聚体蛋白的纯化方法技术

本发明专利技术涉及一种聚体蛋白的纯化方法，包括如下步骤：S1：对含聚体蛋白的细胞发酵液进行亲和层析，收集亲和层析液；S2：对所述亲和层析液进行超滤，收集超滤浓缩液；S3：对所述超滤液进行阴离子层析，收集阴离子层析液；S4：对所述阴离子层析液进行阳离子层析，收集阳离子层析液；S5：对所述阳离子层析液进行复合膜过滤。上述聚体蛋白的纯化方法，能够实现较大程度地去除如HCPs等杂质，最后得到纯度极高的聚体蛋白。同时，该纯化方法操作简单、回收率高，有利于大规模的工业化生产。于大规模的工业化生产。于大规模的工业化生产。

【技术实现步骤摘要】
聚体蛋白的纯化方法


[0001]本申请涉及蛋白纯化
，特别是涉及一种聚体蛋白的纯化方法。

技术介绍

[0002]疫苗在疾病预防中发挥着极其重要的作用，保证疫苗的质量是保证疫苗始终如一地发挥其特定功效的关键。与单克隆抗体的经典结构相比，疫苗的作用机制往往包括多个结合点位的识别，结构相对比较复杂，这种复杂程度不仅体现在糖型及三维结构上，还体现在疫苗的多聚体结构。
[0003]在传统和新型疫苗的制备中，应用先进的分离纯化技术是提高疫苗效力、减少副作用的有效手段。然而，对于疫苗这一聚体蛋白的纯化而言，由于其结构复杂，浓度低（通常＜1g/L的浓度），利用传统的离心、过滤和沉淀技术进行纯化，所得产品中的单体、聚集体及其他杂质，特别是宿主细胞蛋白（HCP）和宿主DNA的含量较高，副作用明显，无法满足疫苗质量的要求。

技术实现思路

[0004]基于此，本申请提供一种聚体蛋白的纯化方法，该纯化方法能够有效去除聚体蛋白中的杂质，提高聚体蛋白的纯度。
[0005]具体技术方案如下：一种聚体蛋白的纯化方法，包括如下步骤：S1：对含本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种聚体蛋白的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：对含聚体蛋白的细胞发酵液进行亲和层析，收集亲和层析液；S2：对所述亲和层析液进行超滤，收集超滤浓缩液；S3：对所述超滤浓缩液进行阴离子层析，收集阴离子层析液；S4：对所述阴离子层析液进行阳离子层析，收集阳离子层析液；S5：对所述阳离子层析液进行复合膜过滤。2.根据权利要求1所述的聚体蛋白的纯化方法，其特征在于，步骤S1中，所述亲和层析采用亲和层析柱进行，所述亲和层析柱填料以扁豆凝集素为亲和介质的亲和填料。3.根据权利要求1或2所述的聚体蛋白的纯化方法，其特征在于，步骤S1中，所述亲和层析采用的洗脱程序包括：先以0.005M~0.015MPBS缓冲液淋洗3CV~5CV，再以含质量百分比0.3%~0.5%甘露糖的0.005M~0.015M PBS缓冲液淋洗3CV~5CV，再以含质量百分比9%~11%甘露糖的0.005M~0.015M 的PBS 缓冲液进行聚体蛋白洗脱。4.根据权利要求1所述的聚体蛋白的纯化方法，其特征在于，步骤S2中，所述超滤采用的超滤膜的膜孔径为100KDa。5.根据权利要求1或4所述的聚体蛋白的纯化方法，其特征在于，步骤S2中，进行所述超滤之前，先采用0.005M~0.015MPBS缓冲液对所述超滤采用的超滤膜进行平衡。6.根据权利要求1所述的聚体蛋白的纯化方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾如林，陈祖棠，仇金树，阚子义，罗顺，
申请(专利权)人：上海健士拜生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：