基于制造技术

本发明专利技术公开了一种基于

【技术实现步骤摘要】
基于3D DNA Walker的点击式电化学发光生物传感器及其应用


[0001]本专利技术涉及生物分析检测领域，具体涉及基于
3D DNA Walker
的点击式电化学发光生物传感器及其在制备用于检测心梗
miRNA
的检测体系中的应用
。

技术介绍

[0002]急性心肌梗死
(AMI)
是一种严重的心血管疾病
。
长期缺血会导致心肌组织死亡，甚至心力衰竭，对健康具有重大影响
。
因此，
AMI
的早期诊断和治疗尤为重要
。
目前的研究表明，血液循环系统中存在与
AMI
相关的
miRNA。
这些
miRNA
是一类约由
22
个核苷酸组成的非编码单链
RNA
，在基因表达中通过抑制
mRNA
翻译或促进
mRNA
降解起核心调控作用，与多种生物学过程相关，如细胞分化
、
增殖r/>、
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种基于
3D DNAWalker
的点击式电化学发光生物传感器，采用包括下述步骤的方法得到：
(1)
预处理电极；
(2)
将叠氮
DNA
即
Azido
‑
S3
修饰于电极表面；
(3)
加
MCH
防止非特异性结合；
(4)
将行走粒子
WPs
和轨道粒子
TPs
混合并加入
miRNA
建构粒子间相对运动的
3D DNA Walker
，生成连接器
S1
；所述行走粒子
WPs
由巯基
DNA、walking strand、locking strand
和
AuNPs
退火形成，轨道粒子
TPs
由巯基
DNA、Si
‑
Hp(rA)
和
AuNPs
退火形成；
(5)
加入炔基
DNA
即
Alkynyl
‑
S2、
连接器
S1、
催化剂
Cu
2+
和抗坏血酸钠
AA
，将其共同修饰于电极表面，发生具有三明治结构的点击化学反应；
(6)
将
AgNO3溶液滴到修饰好电极的表面，再用
NaBH4进行还原得到修饰电极，将其与其他电极结合形成
ECL
生物传感器
。2.
如权利要求1所述生物传感器，其特征在于，步骤
(1)
预处理包括抛光
、
清洗
、
干燥
。3.
如权利要求1所述生物传感器，其特征在于，步骤
(2)
修饰于电极表面是指将
Azido
‑
S3
于电极上孵育；所述
Azido
‑
S3
序列为序列表中
SEQ ID NO.1。4.
如权利要求1所述生物传感器，其特征在于，步骤
(2)
先电化学沉积
HAuCl4再将
Azido
‑
S3
修饰于电极表面
。5.
如权利要求1所述生物传感器，其特征在于，步骤
(4)
中行走粒子
WPs
由巯基
DNA、walking strand、locking strand
和
AuNPs
于
90℃
退火
10
分钟形成，轨道粒子
TPs
由巯基
DNA、Si
‑
Hp(rA)
和
AuNPs
于
90℃
退火
10
分钟形成；将退火形成的两种粒子混合后加入
miRNA,
再加
Mg
2+
孵育
24h
离心；所述巯基
DNA、walking strand、locking strand、Si
‑
Hp(rA)
序列分别为序列表中
SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3
和
SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5。6.
如权利要求1所述生物传感器，其特征在于，步骤
(5)
将经退火的
Alkynyl
‑
S2、
...

【专利技术属性】
技术研发人员：张奎，张喆，程熙，孙玉蝶，
申请(专利权)人：安徽工业大学，
类型：发明
国别省市：