一种鸡腿菇液体培养的优化方法技术

本发明专利技术公开了一种鸡腿菇液体培养的优化方法，包括以下步骤：

【技术实现步骤摘要】
一种鸡腿菇液体培养的优化方法


[0001]本专利技术涉及鸡腿菇
，具体为一种鸡腿菇液体培养的优化方法
。

技术介绍

[0002]鸡腿菇学名为毛头鬼伞，其营养丰富
、
味道鲜美，是我国主要的食用菌生产品种之一
。
鸡腿菇还具有降血糖
、
益脾胃
、
降血脂
、
增强免疫和抗肿瘤等多种药用功能是一种重要的食药用真菌
。
[0003]现有技术中，如中国专利申请号为
CN114875096A
的“一种鸡腿菇液体优化培养及多糖提取的方法”，制备液体培养基，将液体培养基分装到三角瓶中，将鸡腿菇固体菌种接种至三角瓶中进行发酵培养，培养结束后进行离心过滤，得到菌丝体；在菌丝体中加入石油醚洗涤
、
过滤
、
烘干，得到脱脂后的鸡腿菇干菌丝体；脱脂后的鸡腿菇干菌丝体粉碎后，用无水乙醇浸泡
、
过滤
、
烘干，得到鸡腿菇菌丝体干品；将鸡腿菇菌丝体干品用蒸馏水浸泡，回流提取，过滤后得到提取液，将滤渣再次回流提取，将两次提取液合并浓缩，加入无水乙醇后，静置
、
过滤
、
蒸馏水溶解，得到粗多糖提取液，将粗多糖提取液通过聚酰胺树脂柱和
AB
‑8树脂柱，用乙醇洗脱，蒸馏后得到高纯多糖提取液
。
[0004]现有技术中，目前我国多数鸡腿菇生产行业还在使用传统的固体发酵方式来进行鸡腿菇生产培育，但其发酵效率较低且对环境要求高，使得鸡腿菇产业的投入较高，不利于进行工业化生产
。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种鸡腿菇液体培养的优化方法，以解决上述
技术介绍
提出的目前我国多数鸡腿菇生产行业还在使用传统的固体发酵方式来进行鸡腿菇生产培育，但其发酵效率较低且对环境要求高，使得鸡腿菇产业的投入较高，不利于进行工业化生产的问题
。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种鸡腿菇液体培养的优化方法，包括以下内容：
[0007]S1、
菌种活化：将斜面菌种活化
2—3
次，使菌种充分活化，取长势好的菌种剐取苔，在超净工作台上转接为试管种；
[0008]S2、
试管种制备：制备固定培养基，培养后的菌种直接用于转接液体菌种；
[0009]S3、
液体实验种制备：制备液体培养基，将制备的液体培养基分为九组，之后使菌丝体均匀分布在液体母种中，吸取定量的液体母种液体培养基在无菌条件下转接到九组液体培养基中，每组中装液
100ml
；
[0010]S4、
液体母种制备：将试管种中的菌丝体在无菌条件下转接到
PDA
液体培养基上，每瓶装液量
100ml
，静置一天后，将其放入
26℃、160
转
/
分的恒温振荡培养箱中，直到菌丝球均匀地生长于三角瓶中；
[0011]S5、
过滤提取菌丝球：用纱网过滤获得菌丝体，观察菌丝球的形态和数量，观察发
酵液的颜色
、
气味
、
液固相状态，剔除污染；
[0012]S6、
烘干
、
称重：将
S5
中取出的菌丝球在
50
‑
60℃
下烘干至恒重，再进行称重；
[0013]S7、
数据收集和总结：使用正交分析法分析结果，找出较优处理组合
。
[0014]优选的，在步骤
S3
中，液体培养基的制备包括以下步骤：
[0015]A1、
称量：用分析天平称量去皮马铃薯，蔗糖，玉米粉，麸皮备用，共需要做九组，每组用量不同；
[0016]A2、
将玉米粉和麸皮在
60℃
水浴条件下内加热溶解
1h
；
[0017]A3、
将马铃薯去皮处理成小块，放入铝锅中，加入
1000ml
蒸馏水，煮沸
30
分钟，用四层纱布滤去马铃薯残渣；
[0018]A4、
将滤液放回铝锅中，加入
1.5g
的
MgSO4，
3g
的
KH2PO4加热熔化，加入溶解后的玉米粉和麸皮，煮沸
30min
，用四层滤纸过滤，将滤液放回锅内加入相应量的蔗糖搅拌至溶解在滤液中
。
加入适量的蒸馏水用来补充加热过程中丢失的水分，在量杯中定容至
1000ml
；
[0019]A5、
分装；
[0020]A6、
包扎：在棉塞外包上两三层报纸，以防止灭菌过程中冷凝水润湿棉塞，另外再在其外包扎三四道皮筋，用记号笔注明培养基相关信息，配制日期
、
组别
、
制作人等信息；
[0021]A7、
灭菌：将配制好的培养基以
0.103Mpa,121℃
，高压蒸汽灭菌
20—30min。
[0022]优选的，所述步骤
S7
中的以初筛基础培养基中的蔗糖含量
、
玉米粉含量
、
麸皮含量和马铃薯为因素，采用正交表
L9(34)
进行4因素3水平的正交实验筛选出最优组合，所述一共9个组，每个组重复五次，试验结果取其平均数
。
[0023]优选的，所述步骤
S2
中固体培养基的制备步骤为：
[0024]B1、
称量：用分析天平称量去皮马铃薯
200g
，蔗糖
20g
，琼脂
15—20g
，备用；
[0025]B2、
将马铃薯处理成小块，放入铝锅中，加入
1000ml
的蒸馏水，煮沸
30
分钟，然后用四层的纱布过滤掉残渣；
[0026]B3、
将滤液放回到铝锅中，再加入琼脂，加热熔化，然后用四层的纱布过滤，其中在琼脂熔化的中，需要用玻璃棒不停地搅拌着，并且要控制火力小心点不要使培养基溢出或烧焦；
[0027]B4、
将滤液放回铝锅中，加入蔗糖熔化后，加入适量的蒸馏水，用以补充加热时损失的水分，在量杯中定容至
1000ml
；
[0028]B5、
分装；
[0029]B6、
包扎：在棉塞外包两三层报纸，用来防止灭菌过程中冷凝水润湿棉塞，它的外面再用两三道皮筋捆好扎好，最后用记号笔注明培养基相关信息，配制日期
、
组别和制作人等；
[0030]B7、
灭菌：将制作好的培养基以
0.103Mpa,121℃
，高压蒸汽灭菌
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种鸡腿菇液体培养的优化方法，其特征在于，包括以下内容：
S1、
菌种活化：将斜面菌种活化
2—3
次，使菌种充分活化，取长势好的菌种剐取苔，在超净工作台上转接为试管种；
S2、
试管种制备：制备固定培养基，培养后的菌种直接用于转接液体菌种；
S3、
液体实验种制备：制备液体培养基，将制备的液体培养基分为九组，之后使菌丝体均匀分布在液体母种中，吸取定量的液体母种液体培养基在无菌条件下转接到九组液体培养基中，每组中装液
100ml
；
S4、
液体母种制备：将试管种中的菌丝体在无菌条件下转接到
PDA
液体培养基上，每瓶装液量
100ml
，静置一天后，将其放入
26℃、160
转
/
分的恒温振荡培养箱中，直到菌丝球均匀地生长于三角瓶中；
S5、
过滤提取菌丝球：用纱网过滤获得菌丝体，观察菌丝球的形态和数量，观察发酵液的颜色
、
气味
、
液固相状态，剔除污染；
S6、
烘干
、
称重：将
S5
中取出的菌丝球在
50
‑
60℃
下烘干至恒重，再进行称重；
S7、
数据收集和总结：使用正交分析法分析结果，找出较优处理组合
。2.
根据权利要求1所述的一种鸡腿菇液体培养的优化方法，其特征在于，在步骤
S3
中，液体培养基的制备包括以下步骤：
A1、
称量：用分析天平称量去皮马铃薯，蔗糖，玉米粉，麸皮备用，共需要做九组，每组用量不同；
A2、
将玉米粉和麸皮在
60℃
水浴条件下内加热溶解
1h
；
A3、
将马铃薯去皮处理成小块，放入铝锅中，加入
1000ml
蒸馏水，煮沸
30
分钟，用四层纱布滤去马铃薯残渣；
A4、
将滤液放回铝锅中，加入
1.5g
的
MgSO4，
3g
的
KH2PO4加热熔化，加入溶解后的玉米粉和麸皮，煮沸
30min
，用四层滤纸过滤，将滤液放回锅内加入相应量的蔗糖搅拌至溶解在滤液中，加入适量的蒸馏水用来补充加热过程中丢失的水分，在量杯中定容至
1000ml
；
A5、
分装；
A6、
包扎：在棉塞外包上两三层报纸，以防止灭菌过程中冷凝水润湿棉塞，另外再在其外包扎三四道皮筋，用记号笔注明培养基相关信息，配制日期
、
组别
、
制作人等信息；
A7、
灭菌：将配制好的培养基以
0.103Mpa,121℃
，高压蒸汽灭菌
20—30min。3.
根据权利要求1所述的一种鸡腿菇液体培养的优化方法，其特征在于，所述步骤
S7
中的以初筛基础培养基中的蔗糖含量
、
玉米粉含量
、
麸皮含量和马铃薯为因素，采用正交表
L9(34)
进行4因素3水平的正交实验筛选出最优组合，所述正交实验共分...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄一航，
申请(专利权)人：卫可心，
类型：发明
国别省市：