一种检测非季节性发情母绵羊自然周期成熟卵泡的方法技术

技术编号:39806979 阅读:7 留言:0更新日期:2023-12-22 02:41
本发明专利技术涉及一种检测非季节性发情母绵羊自然周期成熟卵泡的方法,包括:在母羊配种前

【技术实现步骤摘要】
一种检测非季节性发情母绵羊自然周期成熟卵泡的方法


[0001]本专利技术涉及一种检测非季节性发情母绵羊自然周期成熟卵泡的方法,属于动物繁育



技术介绍

[0002]对非季节性发情母绵羊而言,虽一个情期有四次卵泡波峰,每次卵泡波峰的出现都有成熟卵母细胞排出,具有很强的繁殖性能

但受现有繁殖方法如:自然排卵交配

药物诱发排卵交配

同期发情定时输精

胚胎移植等限制,普遍存在空怀羊多

母羊群体产羔间隔长

繁殖率低下

成本高等问题,致使绵羊养殖场亏损严重

因此有必要对现有技术加以改进


技术实现思路

[0003]本专利技术旨在提供一种检测非季节性发情母绵羊自然周期成熟卵泡的方法,以便及时输精配种,避免母羊空怀,缩短母羊的产羔间隔,提高母羊的繁殖率,降低养殖成本,同时排除激素类药物对母羊发情行为的干扰,优选高繁殖力的母羊群体,高质量提升母羊的产羔效率,增加养殖效益

[0004]本专利技术通过下列技术方案完成:一种检测非季节性发情母绵羊自然周期成熟卵泡的方法,其特征在于包括下列步骤:1)在母羊配种前
72
小时
、48
小时
、24
小时或当日,采集1‑‑
10 ml
母羊血,于阴凉处静置1‑2小时,分离出血清;2)将羊的促黄体生成素
LH
及卵泡刺激素
FSH
检测试纸插入步骤1)的血清中5‑‑
10
秒,取出,于
15

18
分钟后,观察该检测试纸中的质控线
C
与检测线
T1、T2
是否显色:3)显色结果如下:羊的促黄体生成素
LH
及卵泡刺激素
FSH
检测试纸质控线
C
未显色

检测线
T1

T2
显色,表明检测结果无效,需要重新检测;羊的促黄体生成素
LH
及卵泡刺激素
FSH
检测试纸质控线
C
显色,检测线
T1

T2
未显色,表明母羊的
LH

FSH
水平低下,需要隔日进行检测;羊的促黄体生成素
LH
及卵泡刺激素
FSH
检测试纸质控线
C
及检测线
T1

T2
都显色,用该显色与
LH

FSH
比色卡进行下列对比;
31
)当
LH≥5

15mIU/ml、FSH≥30

65mIU/ml
,表明母羊卵泡为3‑4毫米,于
48
小时后配种;
32
)当
LH≥15

30 mIU/ml、FSH≥30

65mIU/ml
,表明母羊卵泡为4‑5毫米,于
24
小时后配种;
33
)当
LH≥30

100mIU/ml、FSH≥65

100mIU/ml
,表明母羊卵泡
≥5
毫米以上,卵泡成熟,于当日配种;
34
)当
LH≤5mIU/ml、 FSH<5mIU/ml
,表明母羊卵泡为
1—2
毫米,于
72
小时后,重复
步骤1)
‑3),并按步骤
31
)或
32
)或
33
)进行处理

[0005]所述步骤2)羊的促黄体生成素
LH
及卵泡刺激素
FSH
检测试纸经过下列方法制备:
21
)按下列制备各组分:金溶液:将质量浓度为
2%
的氯金酸溶液
20ml、
质量浓度为
1%
的柠檬酸钠加入纯化水至
100ml
,加热至溶液呈现紫红色后,冷却至室温,得金溶液;封闭液:将
0.005g
牛血清白蛋白溶解在
300ul
纯化水中,加入
30ul 碳酸钾溶液,混合均匀,得
330ul
封闭液;样本垫处理液:将
0.605g
三羧甲氨基甲烷
、1.5g
氯化钠完全溶解在
100ml
纯化水中,得样本垫处理液;胶体金结合物稀释液:将
0.605g
三羧甲氨基甲烷,
0.2g
聚乙烯吡咯烷酮,
5g
蔗糖,
0.9g
氯化钠,
0.5g
牛血清白蛋白,
3ml
羊血清,
0.15ml
吐温
20
,与
100ml
纯化水混合均匀,得胶体金结合物稀释液;
LH
包被液:将
100

200mg
羊的黄体生成素单克隆
α
亚级抗体
LHmAbCoating、
质量浓度为
1%
的海藻糖溶液
1ml
溶解在
0.01M PBS
缓冲液
100ml
中,混合均匀,得
LH
包被液;
FSH
包被液:将
100

200mg
羊的
FSH
单克隆
α
亚级抗体
FSHmAbCoating、
质量浓度为
1%
的海藻糖溶液
1ml
溶解在
0.01M PBS
缓冲液
100ml
中,混合均匀,得
FSH
包被液;
IgG
包被液:将羊抗鼠
IgG
抗体
100mg、
质量浓度为
1%
的海藻糖溶液
1ml
溶解在
0.01M PBS
缓冲液
100ml
中,混合均匀,得
IgG
包被液;
22
)在底板上划膜
22A
)将
NC
膜贴在
PVC
板上表面的中部,得底板;
22B
)用
XYZ3010
喷金划膜仪,并按
0.8
μ
l/cm
的量,以
500mm/s
的速度,将...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种检测非季节性发情母绵羊自然周期成熟卵泡的方法,其特征在于包括下列步骤:1)在母羊配种前
72
小时
、48
小时
、24
小时或当日,采集1‑‑
10 ml
母羊血,于阴凉处静置1‑2小时,分离出血清;2)将羊的促黄体生成素
LH
及卵泡刺激素
FSH
检测试纸,插入步骤1)的血清中5‑‑
10
秒,取出,于
15

18
分钟后,观察该检测试纸中的质控线
C
与检测线
T1、T2
是否显色:3)试纸显色结果如下:羊的促黄体生成素
LH
及卵泡刺激素
FSH
检测试纸质控线
C
未显色

检测线
T1

T2
显色,表明检测结果无效,需要重新检测;羊的促黄体生成素
LH
及卵泡刺激素
FSH
检测试纸质控线
C
显色,检测线
T1

T2
未显色,表明母羊的
LH

FSH
水平低下,需要隔日进行检测;羊的促黄体生成素
LH
及卵泡刺激素
FSH
检测试纸质控线
C
及检测线
T1

T2
都显色,用该显色与
LH

FSH
比色卡进行下列对比;
31
)当
LH≥5

15mIU/ml、FSH≥30

65mIU/ml
,表明母羊卵泡为3‑4毫米,于
48
小时后配种;
32
)当
LH≥15

30 mIU/ml、FSH≥30

65mIU/ml
,表明母羊卵泡为4‑5毫米,于
24
小时后配种;
33
)当
LH≥30

100mIU/ml、FSH≥65

100mIU/ml
,表明母羊卵泡
≥5
毫米以上,卵泡成熟,于当日配种;
34
)当
LH≤5mIU/ml、 FSH<5mIU/ml
,表明母羊卵泡为
1—2
毫米,于
72
小时后,重复步骤1)
‑3),并按步骤
31
)或
32
)或
33
)进行处理
。2.
根据权利要求1所述的检测非季节性发情母绵羊自然周期成熟卵泡的方法,其特征在于所述步骤2)羊的促黄体生成素
LH
及卵泡刺激素
FSH
检测试纸经过下列方法制备:
21
)按下列制备各组分:金溶液:将质量浓度为
2%
的氯金酸溶液
20ml、
质量浓度为
1%
的柠檬酸钠加入纯化水至
100ml
,加热至溶液呈现紫红色后,冷却至室温,得金溶液;封闭液:将
0.005g
牛血清白蛋白溶解在
300ul
纯化水中,加入
30ul 碳酸钾溶液,混合均匀,得
330ul
封闭液;样本垫处理液:将
0.605g
三羧甲氨基甲烷
、1.5g
氯化钠完全溶解在
100ml
纯化水中,得样本垫处理液;胶体金结合物稀释液:将
0.605g
三羧甲氨基甲烷,
0.2g
聚乙烯吡咯烷酮,
5g
蔗糖,
0.9g
氯化钠,
0.5g
牛血清白蛋白,
3ml
羊血清,
0.15ml
吐温
20
,与
100ml
纯化水混合均匀,得胶体金结合物稀释液;
LH
包被液:将
100

200mg
羊的黄体生成素单克隆
α
亚级抗体
LHmAbCoating、
质量浓度为
1%
的海藻糖溶液
1ml
溶解在
0.01M PBS
缓冲液
100ml
中,混合均匀,得
LH
包被液;
FSH
包被液:将
100

200mg
羊的
FSH
单克隆
α
亚级抗体
FSHmAbCoating、
质量浓度为
1%
的海藻糖溶液
1ml
溶解在
0...

【专利技术属性】
技术研发人员:金义达马海鹏
申请(专利权)人:昆明天沃生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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