一种制造技术

本发明专利技术提供了一种

【技术实现步骤摘要】
一种circRNA circNOP14及其应用


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种
circRNA circNOP14
及其应用
。

技术介绍

[0002]肝脏是人体最大的实质性脏器，血运丰富，原发性肝癌和肝转移癌的发病率较高，肝癌对常见的治疗手段如化疗
、
放疗等敏感度低，肝癌理想的治疗方法是肿瘤根治切除术，但在临床上肝癌被发现时多已属中晚期，能手术切除者仅占
10
％
‑
15
％
。
[0003]放射性粒子植入术治疗恶性肿瘤是近年来新兴的恶性肿瘤治疗手段，具有疗效确切，创伤小，并发症少的特点，特别适用于实体肿瘤的保守治疗，目前已经广泛应用于临床
。125I
粒子放射治疗是其中一种，即将
125I(
碘的放射性同位素
)
粒子植入到肿瘤病灶时，微型粒子持续地发射出
γ
射线，在
125I
半衰期内，局部组织吸收剂量可达
140
‑
160Gy
，以低剂量
、
连续照射的方式持续作用于肿瘤细胞，能够有效地破坏肿瘤细胞的
DNA、
诱导肿瘤细胞的凋亡并抑制其增殖和迁移
。125I
粒子的组织半价层为
1.7cm
，剂量随距离的增加迅速衰减，因此正常组织器官吸收剂量很少，这就达到了既治疗肿瘤，又保护正常组织的目的
。
[0004]但是，提高实体肿瘤对放射线敏感性是临床放射治疗难题，影响放射
125I
粒子疗效
。
[0005]目前，肿瘤放射抵抗的主流观点是肿瘤微环境的形成：肿瘤细胞将耐辐射的信号
(
转录因子
、RNA
等
)
分泌到肿瘤以外，形成肿瘤微环境，从而促进肿瘤进展
。
近年来备受关注的“外泌体
(exosome)”被证实是形成转移前微环境的主要载体
。Exosome
是一种由细胞分泌的
30
‑
100nm
膜性小囊泡，广泛存在于各种体液中，是细胞与细胞间通讯的重要的分子，通过调节免疫功能以及直接作用于肿瘤细胞等途径参与诸多生理与病理过程
。
外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括微小
RNA(microRNA
，
miRNA)、mRNA、
长链非编码
RNA
及环状
RNA(circular RNA
，
circRNA)。circRNAs
是一种具有环状结构
、
无
polyA
尾
、
具有重要生物学功能的
RNA
，其表达具有细胞特异性
、
组织特异性及发育阶段特异性，拥有非常稳定的特性，不易被
RNA
酶降解
。circRNAs
具有参与调控多种信号通路，近年来在肝癌中发现大量
circRNAs
表达失调，研究表明，
circRNAs
对于肝癌发生发展机制研究
、
临床预测
、
治疗靶标的寻找都具有很大的应用价值
。
提示
circRNAs
可能是一类新型有潜力的生物标记物和肿瘤治疗靶标，在疾病诊断
、
预防
、
治疗等方面具有潜在价值
。
尽管越来越多研究表明非编码
RNA
通过表观遗传调控机制在恶性肿瘤发生发展耐药耐辐射中担任极为重要的角色，但迄今是否存在特异
circRNAs
参与肿瘤放射抵抗的相关研究未见报道
。
[0006]因此，急需寻找有效的提高近距离放疗疗效的方案，采取有针对性放射增敏的措施，提高局部肿瘤控制率，改善患者预后至关重要
。

技术实现思路

[0007]针对上述问题，本专利技术提供了一种
circRNA circNOP14
及其应用，通过对放射
125I
粒子作用机制的研究深入，首次发现了
circNOP14(hsa_circ_0006737)
是
125I
粒子治疗前
后有表达差异的
circRNA
之一，首次发现
circNOP14
可抑制肝癌生长转移并诱导凋亡；可增强
125I
粒子的放射生物效应
。
并发现了其作用机理：
circNOP14
通过结合
RBP
结合蛋白
XRCC6
，增强
125I
粒子所作用的
DNA
损伤信号通路
。
这表明
circNOP14
能够实现治疗肝癌的效果和对
125I
粒子放射增敏的效果，具有广阔的应用前景
。
[0008]本申请前期从临床上收集了
12
例珍贵的接受放射粒子
125I
治疗前
、
后的肝癌患者外周血作为研究对象
。
成功分离患者外周血的
exosome
，通过
longRNA 高通量测序及生物信息数据分析，获得显著差异
56
个
lncRNAs、405
个
mRNAs
和
106
个
circRNAs。
结合
125I
粒子放射作用于
DNA
损伤应答
(DNA damage response
，
DDR)
信号通路的结果，通过深入分析
GO
数据发现
circRNAs
主要参与调节
DDR
介导的肿瘤细胞凋亡信号通路
。
为进一步确认测序结果，我们在放射粒子治疗前后的配对肝癌组织样本
、
血浆样本
、
细胞样本中，通过
qPCR
的方式选取
10
个显著差异表达的
circRNAs
进行了验证，确认其中
circRNA
‑
NOP14(has_circ_0006737)
差异显著表达，并运用
RNA Scope
检测到
circRNA
‑
NOP14
在肝癌组织样本有表达；而其余9个
circRNA
经过后续试验判定，与肝癌进程
、
预后
、125I
粒子治疗疗效等均无明显相关性
。
[0009]人类
本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种
circRNA
用于制备治疗肝癌的药物的用途，其特征在于，所述
circRNA
为
has_circ_0006737
，核酸序列如
Seq ID NO.1
所示
。2.
一种
circRNA
用于制备抑制肝癌细胞增殖的制剂的用途，其特征在于，所述
circRNA
为
has_circ_0006737
，核酸序列如
Seq ID NO.1
所示
。3.
一种
circRNA
用于制备抑制肝癌细胞迁移的制剂的用途，其特征在于，所述
circRNA
为
has_circ_0006737
，核酸序列如
Seq ID NO.1
所示
。4.
一种
circRNA
用于制备诱导肝癌细胞凋亡的制剂的用途，其特征在于，所述
circRNA
为
has_circ_0006737
，核酸序列如
Seq ID NO.1
所示
。5.
一种
circRNA
用于制备增强
125I
粒子放射的生物效应的制剂的用途，其特征在于，所述
circRNA
为
has_circ_0006737
，核酸序列如
Seq ID NO.1
所示
。6.
如权利要求5所述用途，其特征在于，所述
has_c...

【专利技术属性】
技术研发人员：张艳玲，张福君，林乐涛，黄涛，
申请(专利权)人：中山大学肿瘤防治中心中山大学附属肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：