H5N6制造技术

本发明专利技术提供了一种

【技术实现步骤摘要】
H5N6禽流感广谱性疫苗的开发及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，涉及
H5N6
禽流感广谱性疫苗的开发及其应用，具体地，本专利技术是基于一种
H5
亚型流感病毒毒株的血凝素为骨架蛋白的一种
H5N6
禽流感广谱性疫苗的开发及其应用
。

技术介绍

[0002]H5N1、H5N6
和
H5N8
高致病性禽流感已经引起了近千人感染，造成半数以上的人死亡
。1997
年，由
H5N1
亚型高致病性禽流感
A/goose/Guangdong/1/96(GS/GD/1/96)
病毒株的
HA
与
H6N1
或
H9N2
病毒的其他基因形成的重组流感病毒引起多人感染
。
至
2020
年底共有
H5N1
高致病性禽流感
862
人感染，
455
人死亡，死亡率为
52.8
％，感染的病例分布在
17
个国家，这些病例主要分布在亚洲，其次是非洲
。
现在散发的人类感染
H5
亚型高致病性禽流感感染病例，致死率超过
50
％，如果病毒持续进化，具备了持续稳定的人与人之间传播能力，它将引起全球的大流行，给人类的健康带来严重的威胁
。
[0003]疫苗是
H5
亚型高致病性禽流感疫情最有效的防控手段
。
自
H5
亚型高致病性禽流感大规模流行以来，多种禽用
H5
亚型高致病性禽流感疫苗被研发出来，包括灭活疫苗
、
载体疫苗和
DNA
疫苗等
。
全球包括我国在内的多个国家也进行了人用
H5
亚型高致病性禽流感储备疫苗的开发，包括灭活疫苗和载体疫苗
。
但
H5
亚型高致病性禽流感的病毒已经进化出了十个亚类，其中，
1、2
和7亚类则进一步分化出二级亚类
、
三级亚类等
。
多个亚类同时流行和新的亚类持续地出现，不同亚类之间
、
甚至同亚类不同时间和不同地域流行的病毒株之间的血清交叉反应弱，导致现有的禽用和人用
H5
亚型高致病性禽流感疫苗无法提供的很好的保护效果
。
[0004]因此，本领域迫切需要开发一种
H5
亚型禽流感广谱性疫苗
。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种
H5
亚型禽流感广谱性疫苗
。
[0006]本专利技术的第一方面，提供了一种血凝素重组蛋白，所述重组蛋白含有来自第一
H5
亚型流感病毒毒株的血凝素骨架，来自第二
H5
亚型流感病毒毒株的
AS1
表位，所述
AS1
表位为
AS1
表位突变型，所述
AS1
表位突变型在野生型的
AS1
表位的对应于来自第二
H5
亚型流感病毒毒株的血凝素序列
(
氨基酸序列
GISAID
登录号：
EPI533583)
中的
98
位
,129
‑
138
位
,153
‑
161
位
,183
位
,186
‑
194
位和
221
‑
228
位氨基酸
(H3numbering)
的选自下组的氨基酸发生突变：
[0007]第
159
位的天冬氨酸
(Asparticacid,Asp,D)
；和
[0008]第
160
位的丙氨酸
(Alanine,Ala,A)
；
[0009]并且，所述第一
H5
亚型流感病毒毒株包括
A/commonmagpie/HongKong/5052/2007(H5N1)
；
[0010]所述第二
H5
亚型流感病毒毒株包括
A/Sichuan/26221/2014(H5N6)。
[0011]在另一优选例中，所述来自第一
H5
亚型流感病毒毒株的血凝素骨架氨基酸序列的序列号为
ACJ26242(NCBI
登录号
)。
[0012]在另一优选例中，通过
159
位和
160
位氨基酸突变，在所述重组蛋白的
158
位
、159
位和
160
位氨基酸位置形成“Asn
‑
Ser
‑
Thr(N
‑
S
‑
T)”序列，并且在所述重组蛋白的第
158
位的天冬酰胺
(Asparagine,Asn,N)
位点形成
N
‑
糖链，且所述
N
‑
糖链位于受体结合位点外缘的高变区
。
[0013]在另一优选例中，通过
159
位和
160
位氨基酸突变，
160
位丙氨酸
(Alanine,Ala,A)
突变为苏氨酸
(Threonine,Thr,T)
，
159
位的天冬氨酸
(Asparticacid,Asp,D)
突变为除丝氨酸和脯氨酸以外的氨基酸，在所述重组蛋白的
158
位
、159
位和
160
位氨基酸位置形成“Asn
‑
X
‑
Thr(N
‑
X
‑
T)”序列
(X
氨基酸选自下组：甘氨酸
、
丙氨酸
、
缬氨酸
、
亮氨酸
、
异亮氨酸
、
苯丙胺酸
、
酪氨酸
、
色氨酸
、
苏氨酸
、
半胱氨酸
、
蛋氨酸
、
天冬酰胺
、
谷氨酰胺
、
天冬氨酸
、
谷氨酸
、
赖氨酸
、
精氨酸
、
组氨酸
、
或其组合
)
，并且在所述重组蛋白的第
158
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种血凝素重组蛋白，其特征在于，所述重组蛋白含有来自第一
H5
亚型流感病毒毒株的血凝素骨架，来自第二
H5
亚型流感病毒毒株的
AS1
表位，所述
AS1
表位为
AS1
表位突变型，所述
AS1
表位突变型在野生型的
AS1
表位的对应于来自第二
H5
亚型流感病毒毒株的血凝素序列
(
氨基酸序列
GISAID
登录号：
EPI533583)
中的
98
位
,129
‑
138
位
,153
‑
161
位
,183
位
,186
‑
194
位和
221
‑
228
位氨基酸
(H3 numbering)
的选自下组的氨基酸发生突变：第
159
位的天冬氨酸
(Aspartic acid
，
Asp
，
D)
；和第
160
位的丙氨酸
(Alanine
，
Ala
，
A)
；并且，所述第一
H5
亚型流感病毒毒株包括
A/common magpie/Hong Kong/5052/2007(H5N1)
；所述第二
H5
亚型流感病毒毒株包括
A/Sichuan/26221/2014(H5N6)。2.
一种疫苗多肽，其特征在于，所述疫苗多肽包括权利要求1所述的重组蛋白
。3.
一种
DNA
或
mRNA
疫苗，其特征在于，所述的疫苗含有用于表达权利要求1所述的重组蛋白的编码
m...

【专利技术属性】
技术研发人员：王桂芹，王海坤，常小艳，周保罗，刘冬平，
申请(专利权)人：中科南京生命健康高等研究院，
类型：发明
国别省市：