一株石油降解菌及其应用制造技术

本发明专利技术一株石油降解菌及其应用，在页岩油泥中分离纯化出一株菌

【技术实现步骤摘要】
一株石油降解菌及其应用


[0001]本专利技术涉及生物工程菌株筛选及应用领域，具体是一株对石油污染物具有显著降解作用的微生物菌株
。

技术介绍

[0002]随着全球石油需求的不断增加，为了降低对国外石油的依赖程度，满足国内日益增长的石油需求，页岩油成为非常规石油资源的主要来源，对页岩油的开发已经作为国家
、
黑龙江省
、
大庆市重点发展战略，但是在开采的同时产生了大量污油泥，爆发式增长的油泥处理给油田页岩油发展提出了挑战
。
这些由水
、
粉
、
油组成的稳定的乳化废弃物，结构复杂，稳定性高，不易在自然界中降解，对环境的危害性较大，且这些危害具有累积效应
。
如果污油泥污染土壤，可改变土壤的形态及理化特性，降低土壤中酶类的活性，抑制植物生长，严重破坏生态环境
。
此前，我国对污油泥的主要处理办法分为热修复法和化学法两种
。
前者对污油泥高温处理以消除部分石油烃污染物，但是处理成本高，二次污染控制较难
。
后者利用一些化学试剂与石油烃反应达到消除目的，但是其反应程度低，二次危害不可控
。
因此，目前生物技术处理成为研究和应用的焦点
。
[0003]近年来，利用微生物降解石油烃污染物的方法得到广泛研究，其生物降解特性解决了传统方法成本高的问题，同时生物处理技术以其巨大的环境友好
、
成本低廉
、
降解彻底等优势成为综合处理污油泥的关键手段之一
。
利用
16S rDNA
测序及宏基因组学分析可以有效地了解在石油污染地区的土著菌分类情况，并根据菌系种类进行分选，培育出高效石油烃类污染物降解菌
。
利用合适的碳源对土著菌进行驯化，使其降解功能大大增强，达到工业上大规模降解污油泥的目的
。
[0004]现有技术中也存在着利用石油降解微生物处理石油污染物的方法，但是至今在菌株的发掘
、
降解效率方面仍然需要进一步研发
。

技术实现思路

[0005]基于上述的现有技术缺陷，本专利技术在大庆页岩油井产出的污油泥中分离鉴定了一株解蛋白芽孢杆菌
Bacillus proteolyticus FM
‑1，降解试验发现该菌株具有高效降解石油烃污染物以及处理污油泥的能力
。
通过国内文献和专利检索，发现该解蛋白芽孢杆菌是一种新的石油烃类降解菌，在页岩油污油泥处理中具有重要的应用价值，该菌株的分离鉴定为处理油泥提供了新的菌株资源
。
[0006]本专利技术的第一个方面是提供一种对石油污染物具有降解作用的微生物菌株，其特征在于，所述的微生物菌株为解蛋白芽孢杆菌
(Bacillus proteolyticus)
，其
16S rDNA
序列为
SEQ ID NO:1
所示；所述的菌株于
2023
年4月
10
日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
(CGMCC),
保藏号为
CGMCC No.27048
，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号
。
[0007]本专利技术的第二个方面提供一种降解石油污染物的菌剂，其特征在于，所述的菌剂
包含本专利技术第一个方面所述的微生物菌株
。
[0008]本专利技术第三个方面是提供本专利技术的第一个方面所述的微生物菌株在制备降解石油污染物的制剂中的用途；优选的，所述的石油污染为非常规页岩油或常规石油的石油污染
。
[0009]本专利技术第四个方面是提供一种降解石油污染物的方法，所述的方法是利用本专利技术第一方面所述的菌株或第二方面所述的菌剂发酵分解污染样品；在一个优选的实施例中，所述的样品为石油污染样品；在另外一个具体的实施例中，将所述污染样品加入到含有吐温
80 的无机盐培养基中，接种所述的微生物，在
25
～
35℃
黑暗中振荡培养，分别在培养后的7天
、14
天
、21
天和
28
天取样，利用气相色谱法测定污油泥中剩余石油烃的浓度
。
[0010]本专利技术第五个方面提供一种培养第一方面所述微生物菌株方法，其特征在于，所述的方法中使用
C
10
至
C
40
的石油烃作为唯一碳源培养所述的微生物菌株
。
在一个优选的实施例中，其特征在于，所述的唯一碳源为
C
12
或
C
17
的正构烷烃
。
[0011]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0012]利用气相色谱法和分光光度计法检测其对主要污染物石油烃类的降解效果
。
结果显示，
FM
‑1为解蛋白芽孢杆菌
Bacillus proteolyticus。
该菌株能够
[0013]①
FM
‑1可以在含有乙酸钠作为唯一碳源的培养基上生长，且液体培养基呈现淡绿色，表明菌株
FM
‑1具有反硝化作用；
[0014]②
利用
C
10
至
C
40
的石油烃作为唯一碳源；
[0015]③
实施例中，七天的原油降解率为
17.45
％；对页岩污油泥中的石油烃污染物的降解率在
28
天高达
91.5
％
。
附图说明
[0016]图1：
FM
‑1平板培养菌落形态；
[0017]图
2FM
‑1革兰氏染色；
[0018]图
3FM
‑1在
YPD、MRS
和
LB
培养基中的生长曲线；
[0019]图
4FM
‑1菌株进化树；
[0020]图
5FM
‑1以
C
12
唯一碳源的生长状况及残量检测；
[0021]图
6FM
‑1以
C
17
唯一碳源的生长状况及残量检测；
[0022]图7利用紫外分光光度计
OD
600
处的吸光值，绘制标准曲线
[0023]图8分光光度计检测菌株
FM
‑1对原油的七天降解效果；
[0024]图9气相色谱法检测菌株
FM
‑1对页岩油泥的七天降解效果；
[0025]图
10FM
‑1生长曲线与页岩油泥中石油烃剩余量对照图；
[0026]图
11FM<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种对石油污染物具有降解作用的微生物菌株，其特征在于，所述的微生物菌株为解蛋白芽孢杆菌
(Bacillus proteolyticus)
，其
16S rDNA
测序所得序列为
SEQ ID NO:1
所示；所述的菌株于
2023
年4月
10
日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
(CGMCC),
保藏号为
CGMCCNo.27048
，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号
。2.
一种降解石油污染物的菌剂，其特征在于，所述的菌剂包含权利要求1所述的微生物菌株
。3.
权利要求1所述的微生物菌株在制备降解石油污染物的制剂中的用途
。4.
根据权利要求3所述的用途，其特征在于，所述的石油污染为非常规页岩油或常规石油的污染物
。5.
一种培养权利要求1所述微生物菌株方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：张春龙，余丽芸，蔡昌福，秦达，沈江川，王嘉彬，侯喜林，曹迪，
申请(专利权)人：大庆亿莱检验检测技术服务有限公司，
类型：发明
国别省市：