【技术实现步骤摘要】
对酶进行再设计促进其在原核生物中可溶表达及活性提高的方法
[0001]本专利技术涉及计算化学，生物信息学，基因工程以及蛋白质工程
，尤其涉及一种对酶进行再设计促进其在原核生物中可溶表达及活性提高的方法
。
技术介绍
[0002]胰蛋白酶
(Trypsin
，
EC3.4.21.4)
因其专一的水解模式而被广泛应用于制革工业
、
食品工业及医药行业，尤其它是胰岛素生产的必需蛋白酶工具，具有无可替代的地位
。
目前市售胰蛋白酶主要由两个来源，分别是动物源和重组微生物源
。
与重组微生物源相比，动物源胰蛋白酶生产工艺虽然开发较早，但产品容易受到动物体原料的影响，导致胰蛋白酶制品含有的杂质多
、
产品均一性差
、
携带跨物种致病污染源等
。
重组微生物生产的胰蛋白酶品质高
、
安全性高，同时也推动了胰蛋白酶需求产业的进一步发展
。
随着人民对于健康生活的追求日益...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种对酶进行再设计促进其在原核生物中可溶表达及活性提高的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、
筛选出待设计酶的活性位点及底物结合位点；
S2、
将活性位点及其范围内的氨基酸残基
、
底物结合位点及其范围内的氨基酸残基设置为不允许变动位点，将半胱氨酸残基所在位点设置为氨基酸变动位点，蛋白序列上其余位点设置为虚拟饱和突变位点，筛选得到多条不含有二硫键的蛋白序列；其中，所述氨基酸变动位点为，不允许出现半胱氨酸且保持该位点氨基酸
α
碳原子不变；
S3、
将不含有二硫键的蛋白序列进行可溶性预测筛选
、
稳定性预测筛选，得到再设计后的酶
。2.
根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述原核生物包括大肠杆菌
、
枯草杆菌
、
地衣芽孢杆菌
、
谷氨酸棒杆菌或变铅青链霉菌
。3.
一种胰蛋白酶突变体，其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员：王阳，康振，李佳，陈坚，堵国成，李江华，王新敬，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。