【技术实现步骤摘要】
一种VEGFR2抗体与纳米泡相连接的靶向超声造影剂制备方法和应用
[0001]本专利技术涉及超声分子成像领域，尤其涉及一种采用
VEGFR2
抗体与纳米泡相连接的靶向超声造影剂制备方法和应用
。
技术介绍
[0002]肿瘤分子成像技术对于肿瘤的发生
、
预后
、
肿瘤血管生成以及揭示肿瘤血管结构和反应的研究具有重要意义
。
超声因为具有无创
、
实时和无辐射等优点，目前被广泛应用到分子成像中
。
但血液是较差的超声散射体，在回波图像中难以显示疾病的相关特征
。
为此，人们提出了使用超声造影剂，通过血液中造影剂气体微泡来增强组织内微血管的显示，实时动态地观察正常组织和病变组织的血流灌注情况
。
目前临床广泛应用的超声造影剂为微气泡，大小与血液中红细胞相仿，粒径通常为2～5微米，经外周静脉注入后，能自由通过肺循环，再到体循环，到达靶器官或组织，但不能穿过血管内皮进入组织间隙，因此决定了超声造影是一种纯血池造影显像技术
。
[0003]在临床研究中，大多数肿瘤毛细管壁的孔隙在
380
纳米至
780
纳米范围内，微米级的造影剂不能通过血管空隙进行渗透来完成所需的诊断或治疗
。
因此，具有纳米尺寸
、
生物相容性良好
、
增强超声反射率和靶向药物递送能力的新型造影剂就成为研究的热点
。
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种
VEGFR2
抗体与纳米泡相连接的靶向超声造影剂制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1
初始纳米泡的制备，具体为：
(1)
将羟乙基淀粉
、1
，2‑
十六烷二醇和抗坏血酸棕榈酸酯组成的混合物稀释到无菌磷酸盐缓冲溶液中；
(2)
将一定时的吐温
60
和氢氧化钠溶液加入
(1)
的混悬液中，冰浴；
(3)
将全氟丙烷气体通入
(2)
中；
(4)
将壳聚糖溶液在声化条件下缓慢加入悬浮液中；
(5)
将
(4)
混合物悬浮液在冷冻离心机下离心；
(6)
收集离心后的混悬液中间层，填充全氟丙烷气体，放置于4摄氏度冰箱保存；
S2
靶向物的制备，具体为：
(1)
在
VEGFR2
抗体中加入交联剂
Sulfo
‑
LC
‑
SDA
，在室温下反应
30
分钟，然后用
Zeba
离心式脱盐柱离心以去除未反应的交联剂；
(2)
将
D
‑
聚赖氨酸加入上述
(1)
混合物中，然后在紫外光条件下照射3小时以形成靶向聚合物；
(3)
将所述靶向聚合物在负
20℃
离心管中保存；
S3
靶向物和纳米泡的连接，具体分为以下2步：
(1)
将新鲜制备的纳米泡与制备的靶向物混合，轻微振荡
20
分钟；
(2)
通入全氟丙烷气体，在4°
下密封，完成后放置于4摄氏度冰箱保存
。2.
根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤
S1
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