稻瘟病菌基因制造技术

本发明专利技术涉及基因工程领域，具体涉及稻瘟病菌基因

【技术实现步骤摘要】
稻瘟病菌基因trs85或其编码的蛋白在抑制稻瘟病菌致病性中的应用


[0001]本专利技术涉及基因工程领域，具体涉及稻瘟病菌基因
trs85
或其编码的蛋白在抑制稻瘟病菌致病性中的应用
。

技术介绍

[0002]水稻作为地球上最为重要的粮食作物之一，同时也是人类碳水化合物的主要来源之一，是需要重点保障的粮食作物
。
在真菌病害中，由稻瘟病菌
Magnaporthe oryzae(syn.Pyricularia oryzae)
引起的水稻稻瘟病对水稻的生产有着极大的破坏力
。
稻瘟病菌的寄主范围较广，不同的菌株共可侵染至少
50
种禾本科植物，其中包括了主要的粮食作物，如水稻
、
小麦
、
大麦和燕麦等，在病情严重时作物产量损失可达
100
％
。
由于稻瘟病菌具有寄主范围广泛
、
环境适应能力强
、
变异速度快和易产生耐药性等特点，使得对其的防控和治理变得极具挑战性
。
[0003]细胞自噬是真核生物中一个无处不在的过程，在正常的生命活动中发挥着重要作用，它的主要功能是参与降解受损的蛋白质或细胞器，如受损的线粒体
、
过氧化物酶体
、
多余的核糖体
、
内质网
、
脂滴
、
细胞内病原体和错误折叠的蛋白质
。
然而，细胞自噬并不只是简单地消除物质，而是一个动态的循环系统，可以为细胞水平上的更新和稳态提供新的构件和能量
。
自噬也发生在病原真菌中，并介导细胞质中的物质和细胞器进入液泡中被降解，从而回收利用营养物质
。
近几十年的研究表明，自噬的稳态对植物病原真菌的生长和侵染过程至关重要
。
在稻瘟病菌中，已知自噬相关基因
(
如
MoATG1
～
MoATG18)
的敲除会导致真菌致病力的丧失，且敲除突变体中的自噬进程受阻或被阻断
。
有研究证明囊泡运输过程中的高尔基体可能参与自噬体膜的扩张过程
。
在酵母的高尔基体中，
Gea1、Gea2
和
Sec7
作为鸟苷酸交换因子
(GEFs)
可以分别激活其对应的小
G
蛋白
Arf2
和
Arf1
并调控自噬稳态
。
此外，也有实验证据表明，与高尔基体有关的复合体
COG
不仅可以调控高尔基体内部和内涵体到高尔基体的囊泡运输，还参与了自噬体的形成并定位在
PAS
位点，调控着细胞自噬过程
。
以上证据支持囊泡运输过程与高尔基体在自噬体膜扩张过程中可能起关键作用
。
囊泡运输具有严密且复杂的分子机制，能够通过囊泡将货物从供体区域运输到受体区域，流程包括了囊泡的出芽
(budding)、
转运
(transport)、
栓系
(tethering)
和融合
(fusion)
四个步骤
。TRAPP
复合体
(Transport protein particle complex)
主要被报道参与了囊泡运输环节
。
在酵母细胞中，
TRAPP
复合体被认为有三种类型，分别是
TRAPPI、TRAPPII
和
TRAPPIII。
其中
TRAPPIII
复合体相较于
TRAPPI
复合体多了一个非必要亚基，即
Trs85。
有研究结果证明
TRAPPIII
可以作为
GEF
激活小
G
蛋白
Ypt1
，从而影响细胞自噬
。
此外，也有证据表明
TRAPPIII
也参与了内质网到高尔基体的囊泡运输
。
而在稻瘟病菌中，
Ypt1
和
TRAPPIII
亚基
Trs85
蛋白的功能还尚不明晰，有待进一步的解析
。
[0004]目前能够用于防治稻瘟病的有效靶点仍然较少，对水稻真菌病害药物靶点的发现和鉴定还处于初步阶段，且基于稻瘟病菌致病蛋白筛选新型化合物的研究还较少
。

技术实现思路

[0005]基于现有技术中的不足，本专利技术提供了稻瘟病菌基因
trs85
或其编码的蛋白在抑制稻瘟病菌致病性中的应用
。
申请人通过高通量基因敲除手段敲除稻瘟病菌
trs85
基因获得
Δ
trs85
突变体，发现突变体的菌落生长
、
产孢
、
孢子和附着胞形态存在缺陷，并发现突变体的巨自噬阻滞，致病性丧失
。
[0006]本专利技术的技术方案如下：
[0007]本专利技术提供了稻瘟病菌基因
trs85
或其编码的蛋白在抑制稻瘟病菌致病性中的应用
。
[0008]本专利技术还提供了稻瘟病菌基因
trs85
或其编码的蛋白在筛选抑制稻瘟病药物中的应用，以稻瘟病菌基因
trs85
的表达，或者稻瘟病菌基因
trs85
编码的蛋白的表达和修饰作为靶标
。
[0009]所述稻瘟病菌基因
trs85
的编码区的核苷酸序列如
SEQ ID No.1
所示，稻瘟病菌基因
trs85
编码的蛋白的氨基酸序列如
SEQ ID No.2
所示
。
稻瘟病菌基因
trs85
的
cDNA
及前后
2000bp
如
SEQ ID No.3
所示
。
[0010]本专利技术还提供了一种抑制稻瘟病菌致病性的方法，将稻瘟菌中的基因
trs85
敲除或沉默；或者，使稻瘟菌中基因
trs85
编码的蛋白功能缺失
。
[0011]所述稻瘟病菌基因
trs85
的编码区的核苷酸序列如
SEQ ID No.1
所示，稻瘟病菌基因
trs85
编码的蛋白的氨基酸序列如
SEQ ID No.2
所示
。
稻瘟病菌基因
trs85
的
cDNA
及前后
2000bp
如
SEQ ID No.3
所示
。
[0012]本专利技术还提供了一种抑本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
稻瘟病菌基因
trs85
或其编码的蛋白在抑制稻瘟病菌致病性中的应用
。2.
稻瘟病菌基因
trs85
或其编码的蛋白在筛选抑制稻瘟病药物中的应用，以稻瘟病菌基因
trs85
的表达，或者稻瘟病菌基因
trs85
编码的蛋白的表达和修饰作为靶标
。3.
如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述稻瘟病菌基因
trs85
的编码区的核苷酸序列如
SEQ ID No.1
所示，稻瘟病菌基因
trs85
编码的蛋白的氨基酸序列如
SEQ ID No.2
所示
。4.
一种抑制稻瘟病菌致病性的方法，其特征在于，将稻瘟菌中的基因
trs85
敲除或沉默；或者，使稻瘟菌中基因
tr...

【专利技术属性】
技术研发人员：林福呈，吴希禹，朱学明，刘小红，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：