一种围氏马尾藻种质保存方法技术

本发明专利技术涉及一种围氏马尾藻种质保存方法，其原理是利用围氏马尾藻受精卵种质在特定条件生长缓慢且不发育，从而达到长期保存的目的

【技术实现步骤摘要】
一种围氏马尾藻种质保存方法


[0001]本专利技术涉及经济海藻种质保存
，特别是涉及一种围氏马尾藻种质保存方法
。

技术介绍

[0002]围氏马尾藻
(Sargassum wightii)
隶属于褐藻门
(Phaeophyta)
墨角藻目
(Fucales)
马尾藻科
(Sargassaceae)
马尾藻属
(Sargassum)
，是一种大型经济藻体，可作为海参
、
鲍等经济动物的天然优质饵料，同时藻体可提取多种活性物质在生物医疗领域有广泛应用前景，并且马尾藻有净化水质功能，经济和生态价值较高
。
目前，人们对围氏马尾藻资源的需求量日益增大，通过受精卵繁殖得到的幼苗体量大
、
效率高，因此通过有性繁殖实现人工规模化栽培是解决人类对马尾藻资源大量需求和生态资源保护的有效途径
。
自然状态下围氏马尾藻繁殖季节处于夏季高温期，发育的幼苗在固着后经历较长的休眠期和缓慢生长期，此阶段大量幼苗因沉积物淤泥覆盖
、
风浪冲刷
、
低潮干露日晒等导致种苗成活率极低
。
因此在保护现有野生资源的同时，利用受精卵种质保存技术，使受精卵避开夏季高温期发育增殖对人工育苗及马尾藻床生态修复都具有重要意义
。
[0003]种质保存是大型经济海藻人工繁育的重要手段
。
目前马尾藻种质保存普遍存在的问题是成本高<br/>、
效率低
、
种质保存时间短
、
成活率低
。
中国专利技术专利“一种利用低温保存铜藻受精卵的方法”(
公布号为
CN 104145946 A
的
)
中公开了利用低温保存铜藻受精卵的方法，该方法是将受精卵于4‑
8℃
下保存，使其在假根伸长之前完成异地跨地区运输从而进行苗种培育
。
该方法未能将铜藻受精卵在低温下长期保存
。
中国专利技术专利“一种铜藻种质资源的离体保存方法”(
公布号为
CN 107079804 A)
中公开了铜藻利用利用营养繁殖体入添加
NaNO3、NaH2PO4和烯效唑的保存方法
。
该方法是利用营养体实现种质保存，相比于受精卵繁育，该方法效率较低
。
学者邹定辉等
(2021)
曾经报道了“羊栖菜离体生殖托低温超低温的保存”，但其方法仅能在低温条件下将生殖托保存
30
天
。
据申请人所知，目前对于马尾藻受精卵的室内长周期保存尚无有效的方法
。

技术实现思路

[0004]基于此，本专利技术的目的在于，提供一种围氏马尾藻种质保存方法，从而有效地对围氏马尾藻进行人工育苗和资源生态修复
。
[0005]本专利技术是通过以下详细技术方案实现的：
[0006]一种围氏马尾藻种质保存方法，包括以下步骤：
[0007]1)
将围氏马尾藻受精卵种质依次放置于不同配方的种质保存培养液中培养；
[0008]其中，所述种质保存培养液是在灭菌海水中加二甲基亚砜以及葡聚糖
、
脯氨酸或乙二醇中的一种或几种制备的；
[0009]2)
将培养后的受精卵种质超低温保存；
[0010]其中，所述超低温保存为
‑
80℃
～
‑
196℃
超低温保存
。
[0011]相对现有技术，本专利技术对围氏马尾藻受精卵进行离体种质保存，可延长种质保存5个月，可帮助种苗度过夏季高温期，同时可在短期内获取大量优质种苗，有效避开了高温期种苗生长缓慢
、
死亡率高的问题，应用前景广泛
。
[0012]进一步的，所述步骤
1)
中的种质保存培养液是第一培养液
、
第二培养液
、
第三培养液
、
第四培养液
、
第五培养液和第六培养液中的一种；
[0013]其中，所述第一培养液包括体积分数8～
10
％的二甲基亚砜
、
体积分数2～3％的乙二醇和体积分数8～
10
％的葡聚糖；
[0014]所述第二培养液包括体积分数8～
10
％的二甲基亚砜
、
体积分数6～8％的葡聚糖和体积分数2～4％的脯氨酸；
[0015]所述第三培养液包括体积分数8～
10
％的二甲基亚砜
、
体积分数4～6％的葡聚糖和体积分数4％的脯氨酸培养液；
[0016]所述第四培养液包括体积分数8～
10
％的二甲基亚砜
、
体积分数2～4％的葡聚糖和体积分数6％的脯氨酸培养液；
[0017]所述第五培养液包括体积分数8～
10
％的二甲基亚砜
、
体积分数1～2％的葡聚糖和体积分数8％的脯氨酸培养液；
[0018]所述第六培养液包括体积分数8～
10
％的二甲基亚砜和体积分数8～
10
％的脯氨酸
。
[0019]上述种质保存培养液中的二甲基亚砜
、
乙二醇
、
葡聚糖和脯氨酸等组分的共同作用能使围氏马尾藻受精卵种质在培养过程中逐渐转换到生长缓慢的阶段，而且经过种质保存培养液培养后，能够提高围氏马尾藻受精卵种质在后续长时间冻存后的成活率
。
[0020]进一步的，所述步骤
1)
中的培养方法具体为依次在所述第一培养液和所述第六培养液中各培养3‑4小时，或依次在所述第二培养液和第五培养液中各培养3‑4小时，或依次在第三培养液和第四培养液中各培养3‑4小时
。
能使围氏马尾藻受精卵种质冻存
150
天后的成活率稳定在
10
％以上，达到
12
～
33
％左右
。
[0021]进一步的，所述步骤
1)
中的培养方法具体为依次在所述第一培养液
、
所述第二培养液和所述第三培养液中各培养2‑
2.5
小时或者依次在所述第四培养液
、
所述第五培养液和所述第六培养液中各培养2‑
2.5
小时
。
能提高围氏马尾藻受精卵种质冻存
150
天后的成活率到
20
％以上，达到
23
～
41
％左右
。
[0022]进一步的，所述步骤
1)
中的培养方法具体为依次在所述第一培养液...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种围氏马尾藻种质保存方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)
将围氏马尾藻受精卵种质依次放置于不同配方的种质保存培养液中培养；其中，所述种质保存培养液是在灭菌海水中加二甲基亚砜以及葡聚糖
、
脯氨酸或乙二醇中的一种或几种制备的；
2)
将培养后的受精卵种质超低温保存；其中，所述超低温保存为
‑
80℃
～
‑
196℃
超低温保存
。2.
根据权利要求1所述的围氏马尾藻种质保存方法，其特征在于：所述步骤
1)
中的种质保存培养液是第一培养液
、
第二培养液
、
第三培养液
、
第四培养液
、
第五培养液和第六培养液中的一种；其中，所述第一培养液包括体积分数8～
10
％的二甲基亚砜
、
体积分数2～3％的乙二醇和体积分数8～
10
％的葡聚糖；所述第二培养液包括体积分数8～
10
％的二甲基亚砜
、
体积分数6～8％的葡聚糖和体积分数2～4％的脯氨酸；所述第三培养液包括体积分数8～
10
％的二甲基亚砜
、
体积分数4～6％的葡聚糖和体积分数4％的脯氨酸培养液；所述第四培养液包括体积分数8～
10
％的二甲基亚砜
、
体积分数2～4％的葡聚糖和体积分数6％的脯氨酸培养液；所述第五培养液包括体积分数8～
10
％的二甲基亚砜
、
体积分数1～2％的葡聚糖和体积分数8％的脯氨酸培养液；所述第六培养液包括体积分数8～
10
％的二甲基亚砜和体积分数8～
10
％的脯氨酸
。3.
根据权利要求2所述的围氏马尾藻种质保存方法，其特征在于：所述步骤
1)
中的培养方法具体为依次在所述第一培养液和所述第六培养液中各培养3‑4小时，或依次在所述第二培养液和第五培养液中各培养3‑4小时，或依次在第三培养液和第四培养液中各培养3‑4小时
。4.
根据权利要求2所述的围氏马尾藻种质保存方法，其特征在于：所述步骤
1)

【专利技术属性】
技术研发人员：桑石磊，赵庄明，孙立伟，谢恩义，曲元凯，
申请(专利权)人：生态环境部华南环境科学研究所生态环境部生态环境应急研究所，
类型：发明
国别省市：