一种靶向制造技术

本发明专利技术涉及多肽药物领域，具体是一种具有抗前列腺癌作用的双订书肽及其制备方法和应用

【技术实现步骤摘要】
一种靶向AR
‑
V7的具有约束的螺旋和片状结构的双订书肽的制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及多肽药物领域，具体地说，是一种靶向
AR
‑
V7
的具有约束的螺旋和片状结构的双订书肽的制备方法和应用
。

技术介绍

[0002]靶向蛋白降解
(Targeted protein degradation
，
TPD)
是近年来备受关注的一种新兴治疗策略
。TPD
试剂的开发涉及被称为“降解剂”或“蛋白水解靶向嵌合体”(PROTACs)
的分子的设计和合成，其由两个功能部分组成
:
与靶蛋白结合的配体和与
E3
泛素连接酶结合的配体
。E3
连接酶负责催化泛素分子附着在靶蛋白上，导致其被蛋白酶体降解
。
目前，基于小分子的
PROTAC
药物开发领域已经取得了实质性进展，以
ARV
‑
110
和
ARV
‑
471
为代表的许多化合物已经进入临床试验阶段
。
然而，当涉及到不具有明确可识别的口袋结合转录因子
(
包括
AR
‑
V7)
的靶标时，小分子
PROTACs
的进展缓慢，基于肽的
PROTAC
药物已成为一种有前途的替代解决方案
。
[0003]然而，由于前几代多肽药物的血液稳定性差和细胞膜渗透能力有限等问题，其发展面临挑战
。
多肽药物的递送系统和化学修饰的最新进展开辟了其在
PROTAC
药物临床应用中的可能性
。
订书修饰肽作为一种增强多肽稳定性和提高其细胞穿透能力的策略备受关注
。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种靶向
AR
‑
V7
的具有约束的螺旋和片状结构的双订书肽的制备方法和应用
。
[0005]为了提高靶向
AR
‑
V7
的肽类
PROTAC
药物的临床潜力，本专利技术采用双订书肽修饰策略，本专利技术的双订书肽修饰方法旨在在肽序列内产生稳定的
α
螺旋或
β
片结构，或两者兼有
。
这种结构稳定性增强了多肽与目标蛋白的结合亲和力
。
这些修饰已被证明能有效增强多肽药物的药代动力学和药效学特性，确实与线性肽相比，表现出显著改善的蛋白水解稳定性和增强的生物活性
。
从而为提高
AR
‑
V7
的靶向多肽
PROTAC
药物的临床应用提供了巨大的潜力
。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0007]本专利技术设计了一种名为
DSARTC
的双订书肽药物，专门针对
AR DNA
结合域
。
研究结果揭示了
DSARTC
在降解
AR
和
AR
‑
v7
以及抑制前列腺癌细胞增殖方面的巨大潜力
。
并且表明双订书修饰方法，可以成为开发肽
PROTAC
药物的可行策略
。
这些发现强调了在多肽中使用多个短链修饰的潜在益处，从而增强了多肽药物的可药性和治疗潜力
。
[0008]本专利技术的第一方面，提供一种订书肽，所述的订书肽为：
[0009]以
Ac
‑
YLCSSNNNRERDKFRRTGGSGGTSFEQFWAWLWP
‑
NH2(SEQ ID NO.1)
为肽链模板，其中
8N、12D、26E
和
30A
被
S5替换并环合
。
[0010]进一步的，所述的订书肽的结构示意图如图1所示；其结构式如下所示：
[0011][0012]本专利技术的第二方面，提供一种如上所述的订书肽的制备方法，包括以下步骤：
[0013](A)
在缩合试剂的作用下分别使
C
端首个氨基酸的
COOH
与固相载体氨基树脂偶联；
[0014](B)
使用脱保护试剂脱去氨基酸上的
Fmoc
保护基；
[0015](C)
在缩合试剂作用下连接下一个氨基酸；
[0016](D)
重复进行脱保护
‑
耦合操作，按照从
C
端至
N
端的顺序，依照氨基酸序列合成肽链；其中，环合位点以
S5分别替代
i
和
i+4
位氨基酸；其中
8N、12D
为一组
i
和
i+4
，
26E
和
A30
为一组
i
和
i+4
；
[0017](E)
最后一个氨基酸脱保护后乙酰化；
[0018](F)
在环合试剂作用下使
i
和
i+4
位
S5氨基酸发生烯烃复分解反应，环合肽链；
[0019](G)
使用切割试剂将肽链从载体上切下，纯化后得相应订书肽
。
[0020]进一步地，步骤
(A)
中采用的缩合试剂为
DIC
‑
Oxyme
缩合体系，以
NMP
为溶剂
。
[0021]更进一步地，步骤
(A)
中氨基酸
、Oxyme、DIC、NMP
的比例为
1:1:1:6(mol/mol/mol/ml)
或
1:0.9:0.9:6(mol/mol/mol/ml)。
[0022]进一步地，步骤
(A)
中固相合成时，树脂的载样量为
0.30mmol/g。
[0023]进一步地，步骤
(A)
中偶联反应的温度为
60℃
；偶联反应的时间为
20min。
[0024]进一步地，步骤
(B)
中，所述脱保护试剂为
Oxyme、
哌啶及
DMF
的混合溶液，比例为
71:2:4(m/v/v)。
[0025]进一步地，步骤
(B)
中，脱
Fmoc
保护是采用保护试剂作用
5min
，两遍；脱除
Fmoc
基团的反应温度为
20
～...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种订书肽，其特征在于，所述的订书肽为：以
Ac
‑
YLCSSNNNRERDKFRRTGGSGGTSFEQFWAWLWP
‑
NH2为肽链模板，其中
8N、12D、26E
和
30A
被
S5替换并环合
。2.
一种如权利要求1所述的订书肽在制备抗前列腺癌药物中的应用
。3.
一种如权利要求1所述的订书肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(A)
在缩合试剂的作用下分别使
C
端首个氨基酸的
COOH
与固相载体氨基树脂偶联；
(B)
使用脱保护试剂脱去氨基酸上的
Fmoc
保护基；
(C)
在缩合试剂作用下连接下一个氨基酸；
(D)
重复进行脱保护
‑
耦合操作，按照从
C
端至
N
端的顺序，依照氨基酸序列合成肽链；其中，环合位点以
S5分别替代
i
和
i+4
位氨基酸；
(E)
最后一个氨基酸脱保护后乙酰化；
(F)
在环合试剂作用下使
i
和
i+4
位
S5氨基酸发生烯烃复分解反应，环合肽链；
(G)
使用切割试剂将肽链从载体上切下，纯化后得相应订书肽
。4.
根据权利要求3所述的订书肽缀合物的制备方法，其特征在于，步骤
(A)
中采用的缩合试剂为
DIC
‑
Oxyme
缩合体系，以
NMP
为溶剂
。5.
根据权利要求3所述的订书肽缀合物的制备方法，其特征在于，步骤
(B)
中，所述脱保护试剂为
Oxyme、
哌啶...

【专利技术属性】
技术研发人员：李翔，柳润辉，袁星，马伯涵，郑梦君，
申请(专利权)人：中国人民解放军海军军医大学，
类型：发明
国别省市：