一种大豆幼苗期抗霜霉病鉴定方法技术

本发明专利技术属于农业技术领域，具体为一种大豆幼苗期抗霜霉病鉴定方法，其包括以下鉴定步骤：步骤一：培养供试材料幼苗，挑选颗粒饱满

【技术实现步骤摘要】
一种大豆幼苗期抗霜霉病鉴定方法


[0001]本专利技术涉及农业
，具体为一种大豆幼苗期抗霜霉病鉴定方法
。

技术介绍

[0002]大豆霜霉菌
(Peronospora manshurica)
属卵菌门霜霉属，霜霉菌是一种专性活体营养型寄生真菌，尚不能在人工合成培养基上生长，只能通过活体继代培养
。
该菌引起的大豆霜霉病是大豆上主要的真菌病害之一
。
植株整个生育阶段都会被感染，主要为害幼苗
、
成株叶片
、
豆荚及子粒
。
受感染的叶片在上表面有浅绿色到浅黄色的斑点，后期灰白色变成粉红色，直至干枯
、
脱落
。
感染的种子常常覆盖灰白色的卵孢子外壳，致使种子发芽率降低
10
％以上，百粒重降低
11
‑
16
％，减产6‑
24.7
％，含油量降低
2.7
‑
7.6
％，严重影响大豆的产量和品质
。
[0003]大豆是重要的油粮饲兼用作物，含有丰富的蛋白质
、
氨基酸及膳食纤维
。
可制作多种豆类品，深受人们喜爱
。
因饲料用量大，人们消耗量增多
。
[0004]传统抗病杀菌剂不仅给生态环境造成极大污染，还容易引起病菌抗药性的产生，降低药效，增加杀菌剂的开发成本
。
现行的田间接种鉴定方法，因受环境条件影响较大，鉴定可重复性较差，难适宜用于大豆种质资源的精准鉴定
。
有必要制定对大豆种质资源进行稳定
、
精准的鉴定规范，为此，我们提出了一种大豆幼苗期抗霜霉病鉴定方法，以建立精准
、
稳定的鉴定评价体系对大豆种质资源进行抗性评价
。

技术实现思路

[0005]本部分的目的在于概述本专利技术的实施方式的一些方面以及简要介绍一些较佳实施方式
。
在本部分以及本申请的说明书摘要和专利技术名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分
、
说明书摘要和专利技术名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本专利技术的范围
。
[0006]鉴于上述和
/
或现有大豆幼苗期抗霜霉病鉴定中存在的问题，提出了本专利技术
。
[0007]因此，本专利技术的目的是提供一种大豆幼苗期抗霜霉病鉴定方法，采用棉签涂抹法对大豆幼苗叶片进行接种分生孢子悬浮液，定量情况下涂抹法比喷洒法发病情况要严重
、
稳定，使得鉴定更加精准，以期筛选出高抗材料，大豆霜霉病的发生受环境条件影响较大，尤其是温度
、
湿度影响最为明显，本方法接种后对幼苗进行扣袋保湿，放在温度稳定的人工气候室诱导发病，最大程度地保证了发病条件的一致性，进一步提高了鉴定结果的精准性
、
稳定性
。
[0008]为解决上述技术问题，根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了如下技术方案：
[0009]一种大豆幼苗期抗霜霉病鉴定方法，其包括以下鉴定步骤：
[0010]步骤一：培养供试材料幼苗，挑选颗粒饱满
、
无病虫害的种子穴播种植在园艺方盆内，培养基质为原土和营养土1：1混合，
115℃
高温灭菌
40min。
待子叶出土后移到室外炼苗壮苗，幼苗长到两片单叶展开时期供试接菌；
[0011]步骤二：配制霜霉病菌悬浮液，从发病叶片上用棉签蘸取新鲜分生孢子，将获取的分生孢子置于水中轻轻摇匀，配制成一定浓度的分生孢子悬浮液
(
含
0.1
％ Tween
‑
20)
；
[0012]步骤三：将前述配制好的分生孢子悬浮液用棉签均匀涂抹在供试幼苗的单叶背面
。
将接种后的幼苗用
20
‑
25cm
高的支架罩上，外扣上白色薄塑料袋保湿，相对湿度
95
％以上，置于步入式人工气候室培养，温度
17
‑
23℃、
光照
12h
；
[0013]步骤四：接种后管理，接种后定期观察供试材料长势
、
光
、
温
、
湿度情况，接种
7d
后感病对照开始出现褪绿并产生分生孢子；
[0014]步骤五：调查鉴定，待发病稳定期
(
一般
14
‑
16d)
进行单株逐级调查供试材料的病情指数，根据病情指数进行抗性评价，病情指数越低，发病越轻，病情指数越高，发病越严重
。
[0015]作为本专利技术所述的一种大豆幼苗期抗霜霉病鉴定方法的一种优选方案，其中：所述步骤一中，有利于大豆霜霉菌分生孢子大量产生的适宜温度为
17
‑
23℃
，光照
12h
，相对湿度在
95
％以上
。
用棉签蘸取容易获取大量分生孢子且对叶片伤害程度较小，可保持分生孢子在叶片上持续增值
。
[0016]作为本专利技术所述的一种大豆幼苗期抗霜霉病鉴定方法的一种优选方案，其中：所述步骤二中，高压灭菌后的基质在高湿条件下能有效遏制杂草
、
虫害及杂菌的生长，大大降低其它感染造成的影响
。
且单叶刚展开时的幼苗感病效果好，鉴定结果精准可靠
。
[0017]作为本专利技术所述的一种大豆幼苗期抗霜霉病鉴定方法的一种优选方案，其中：所述步骤三中，配制的接菌悬浮液浓度为1×
105个
/ml
，用棉签进行接种能够均匀涂抹到叶片背部，接种量为
150
‑
200
μ
l/
株，保证定量
、
定浓度接菌，使供试材料在各种因素最大程度一致条件下发病，提高鉴定结果的准确性
。
每个处理3次重复，每次重复9‑
12
株苗
。
[0018]作为本专利技术所述的一种大豆幼苗期抗霜霉病鉴定方法的一种优选方案，其中：所述步骤三中，用棉签涂抹法接种比喷洒法更能稳定
、
精准反应供试材料的抗感级别，喷洒法使菌液损耗较多，且不能保证叶片均匀落菌，总体使供试材料发病较轻
[0019]与现有技术相比：本专利技术采用棉签涂抹法对大豆幼苗叶片进行接种分生孢子悬浮液，定量情况下涂抹法比喷洒法发病情况要严重
、
稳定，使得鉴定更加精准，以期筛选出高抗材料，大豆霜霉病的发生受环境条件影响较大，尤其是温度
、
湿度影响最为明显，本方法接种后对幼苗进行扣袋保湿，放在温度稳定的人工气候室诱导发病，最大程度地保证了发病条件的一致性，进一步提高了鉴定本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种大豆幼苗期抗霜霉病鉴定方法，其特征在于，包括以下鉴定步骤：步骤一：培养供试材料幼苗，挑选颗粒饱满
、
无病虫害的种子穴播种植在园艺方盆内，培养基质为原土和营养土1：1混合，
115℃
高温灭菌
40min。
待子叶出土后移到室外炼苗壮苗，幼苗长到两片单叶展开时期供试接菌；步骤二：配制霜霉病菌悬浮液，从发病叶片上用棉签蘸取新鲜分生孢子，将获取的分生孢子置于水中轻轻摇匀，配制成一定浓度的分生孢子悬浮液
(
含
0.1
％
Tween
‑
20)
；步骤三：将前述配制好的分生孢子悬浮液用棉签均匀涂抹在供试幼苗的单叶背面，将接种后的幼苗用
20
‑
25cm
高的支架罩上，外扣上白色薄塑料袋保湿，相对湿度
95
％以上，置于步入式人工气候室培养，温度
17
‑
23℃、
光照
12h
；步骤四：接种后管理，接种后定期观察供试材料长势
、
光
、
温
、
湿度情况，接种
7d
后感病对照开始出现褪绿并产生分生孢子；步骤五：调查鉴定，待发病稳定期
(
一般
14
‑
16d)
进行单株逐级调查供试材料的病情指数，根据病情指数进行抗性评价，病情指数越低，发病越轻，病情指数越高，发病越严重
。2.
根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：齐广勋，赵洪锟，袁翠平，王玉民，董英山，刘晓冬，徐彪，董岭超，李玉秋，张伟，王英男，
申请(专利权)人：吉林省农业科学院，
类型：发明
国别省市：