一种甘蓝型油菜高裂角抗性基因及其鉴定和应用制造技术

本发明专利技术公开一种甘蓝型油菜高裂角抗性基因及其鉴定和应用，甘蓝型油菜高裂角抗性基因的序列如序列表

【技术实现步骤摘要】
一种甘蓝型油菜高裂角抗性基因及其鉴定和应用


[0001]本专利技术属于作物遗传育种领域，涉及甘蓝型油菜高裂角抗性基因，筛选所述甘蓝型油菜高裂角抗性材料的分子标记，以及使用该标记筛选甘蓝型油菜高裂角抗性材料的方法，以及利用所述标记筛选目标株系辅助育种的方法
。

技术介绍

[0002]油菜是世界上最重要的油料作物之一，是我国继水稻
、
小麦
、
玉米和大豆之后的第五大农作物，除了是重要的优质食用植物油来源，油菜也是重要的工业原料和未来可再生能源的主要生物资源
。
但油菜易受多种因素影响导致角果裂角落粒，我国大部分现有油菜品种在角果成熟脱水后易裂角落粒，易造成产量损失，影响机械化作业程度，且落地子粒在条件适宜时会萌发形成自生苗，影响下茬作物生长，极大地制约了油菜产业发展
。
[0003]油菜角果裂角抗性为典型的数量性状，自然种质中存在有限的遗传变异
。
抗裂角性是油菜机械化品种选育中的重要性状，油菜裂角抗性遗传改良对于开展抗裂育种具有重要意义
。
[0004]传统育种技术对油菜裂角抗性的改良效率低
、
周期长，而采用分子标记辅助选择育种可以缩短育种年限，加速育种进程，提高育种效率
。
[0005]目前油菜角果裂角抗性研究主要是通过
QTL
定位和关联分析挖掘抗性候选基因，并取得了相应的进展
。
开发抗裂性相关的分子标记，利用分子标记辅助选择改良甘蓝型油菜裂角抗性，对开展抗裂育种工作具有促进作用，有助于培育抗裂油菜新品种
。
而目前公开报道的与甘蓝型油菜裂角抗性相关的分子标记较少，甘蓝型油菜抗裂性育种进展缓慢
。

技术实现思路

[0006]鉴于此，本专利技术目的之一在于提供一种油菜角果裂角抗性数量性状基因
。
[0007]本专利技术的目的之二在于一种能够鉴定出甘蓝型油菜品种中抗裂角材料的分子标记引物对
。
[0008]本专利技术的目的之三在于提供一种鉴定甘蓝型油菜抗裂角性的方法
。
[0009]本专利技术的目的之四在于提供一种甘蓝型油菜高裂角抗性基因的用途
。
[0010]本专利技术的目的之五在于提供所述分子标记引物对的应用
。
[0011]本专利技术的目的之六在于提供一种抗裂角型甘蓝型油菜育种方法
。
[0012]为解决以上技术问题，本专利技术提供的技术方案是，提供一种甘蓝型油菜高裂角抗性基因，包含选自下组的核苷酸序列：
[0013]A、
序列表
Seq ID NO.1
所示核苷酸序列；
[0014]B、
与
A
所述序列互补的核苷酸序列；
[0015]C、
与
A
所述序列具有
80
％以上同源性的核苷酸序列
。
[0016]本专利技术还提供了一种用于鉴定前述甘蓝型油菜高裂角抗性基因的分子标记引物对，所述分子标记引物对为
dCAPS
标记引物对，碱基序列如下：
[0017]上游引物
F
：5’‑
TGGCTTTGAAGGAGTTGAATATTTT
‑3’
；
[0018]下游引物
R
：5’‑
GTAAACCCTCAGCTATCAATC
‑3’
。
[0019]本专利技术还提供了一种基于前述
dCAPS
标记引物对鉴定甘蓝型油菜裂角抗性的方法，包括如下步骤：
[0020]S1.1
提取一个或多个甘蓝型油菜的植株
DNA
；
[0021]S1.2
使用所述
dCAPS
标记引物对，进行
PCR
扩增，得
PCR
扩增产物；
[0022]S1.3
用限制性内切酶酶切所述
PCR
扩增产物，进行酶切扩增多态性分析；
[0023]S1.4
将
S1.3
酶切所得片段进行电泳检测；
[0024]以高带呈现的电泳检测条带为非高裂角抗性基因片段；
[0025]以低带呈现的电泳检测条带为高裂角抗性基因片段
。
[0026]根据本专利技术筛选甘蓝型油菜抗裂角材料的方法的一个实施方式，所述
PCR
扩增具体操作如下：
[0027]PCR
反应体系为：2×
Taq Master Mix 12.5
μ
L
，
10
μ
M
正向引物
SWU_BnGELP9dCAPSF
：
TGGCTTTGAAGGAGTTGAATATTTT
和
10
μ
M
反向引物
SWU_BnGELP9dCAPSR
：
GTAAACCCTCAGCTATCAATC
各1μ
L
，
100ng/
μ
LDNA
模板2μ
L
，
ddH2O
补齐至
25
μ
L
；
[0028]PCR
反应程序：
94℃
预变性
5min
；
94℃
变性
30s
，
58℃
退火
30s
，
72℃
延伸
10s
，
35
个循环；
72℃
延伸
10min。
[0029]根据本专利技术筛选甘蓝型油菜抗裂角材料的方法的一个实施方式，所述酶切的具体操作如下：
[0030]酶切的反应体系为：
10
×
FastDigest Buffer 2
μ
L
，
PCR
扩增产物
10
μ
L
，
MseI
限制性内切酶2μ
L
，
ddH2O
补齐至
20
μ
L
，
37℃
酶切反应
15min。
[0031]根据本专利技术筛选甘蓝型油菜抗裂角材料的方法的一个实施方式，所述电泳检测的具体操作为：
[0032]取7μ
L
酶切产物在
2.0
％的琼脂糖凝胶上进行电泳检测，电泳条件为
90V
，
45
分钟
。
[0033]根据本专利技术筛选甘蓝型油菜抗裂角材料的方法的一个实施方式，所述高裂角抗性基因片段序列如序列表
Seq ID NO.1
所示核本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种甘蓝型油菜高裂角抗性基因，其特征在于，包含选自下组的核苷酸序列：
A、
序列表
Seq ID NO.1
所示核苷酸序列；
B、
与
A
所述序列互补的核苷酸序列；
C、
与
A
所述序列具有
80
％以上同源性的核苷酸序列
。2.
一种用于鉴定权利要求1所述甘蓝型油菜高裂角抗性基因的分子标记引物对，其特征在于，所述分子标记引物对为
dCAPS
标记引物对，碱基序列如下：上游引物
F
：5’‑
TGGCTTTGAAGGAGTTGAATATTTT
‑3’
；下游引物
R
：5’‑
GTAAACCCTCAGCTATCAATC
‑3’
。3.
一种基于权利要求2所述
dCAPS
标记引物对鉴定甘蓝型油菜裂角抗性的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1.1
提取一个或多个甘蓝型油菜的植株
DNA
；
S1.2
使用所述
dCAPS
标记引物对，进行
PCR
扩增，得
PCR
扩增产物；
S1.3
用限制性内切酶酶切所述
PCR
扩增产物，进行酶切扩增多态性分析；
S1.4
将
S1.3
酶切所得片段进行电泳检测；以高带呈现的电泳检测条带为非高裂角抗性基因片段；以低带呈现的电泳检测条带为高裂角抗性基因片段
。4.
根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述
PCR
扩增具体操作如下：
PCR
反应体系为：2×
Taq Master Mix 12.5
μ
L
，
10
μ
M
正向引物
SWU_BnGELP9dCAPSF
：
TGGCTTTGAAGGAGTTGAATATTTT
和
10
μ
M
反向引物
SWU_BnGELP9dCAPSR
：
GTAAACCCTCAGCTATCAATC
各1μ...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘艺灵，杨友鸿，豁逸帆，谢玲，刘列钊，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：