BnLBD29制造技术

本发明专利技术涉及

【技术实现步骤摘要】
BnLBD29基因及其在调控侧根发育中的应用


[0001]本专利技术涉及
BnLBD29
基因及其在调控侧根发育中的应用，尤其涉及甘蓝型油菜
BnLBD29
基因及其在调控侧根发育中的应用，属于生物

。

技术介绍

[0002]甘蓝型油菜
(Brassica napus L.)
与大豆
、
向日葵和花生并称为世界四大油料作物
。
除了作为人类重要食用油来源，油菜也是重要的蛋白质饲料和工业
(
如生物柴油生产
)
原料
。
目前，菜籽油产量约占我国食用植物油总量的
55
％，但是我国作为食用油消费大国，自给率严重不足，因此油菜产量及产油量越来越受到关注，发展油菜生产具有重要意义
。
[0003]根系是植物吸收水分和养分的主要器官，根系结构影响植物生长发育的过程
。
植物获取水分和养分的能力与根系表面积密切相关，根的分枝有助于增加根表面积，因此侧根是根系的重要组成部分，植株侧根的多少一定程度上影响作物的生长发育及产量
。
侧根的发育受到很多因素的影响，例如激素
、
水
、
盐
、
干旱
、
光照
、
硝酸盐和磷酸盐等，近年来也陆续有一些基因分子成员被报道能影响侧根发育，通过促进植株侧根发育使植株更加强健从而增加作物产量是育种新思路之一，创造侧根更多的种质资源
。
[0004]但是在油菜领域中，尚未有报道关于
BnLBD29
基因以及其在油菜侧根发育中有何作用，本专利技术以期通过研究为甘蓝型油菜侧根发育，以及油菜增产提供有用的材料
。

技术实现思路

[0005]针对于现有技术中存在的一些不足，本专利技术的目的在于提供甘蓝型油菜
BnLBD29
基因及其在调控油菜侧根发育中的应用，尤其是在增加或促进甘蓝型油菜侧根数量中的应用
。
[0006]为达到上述技术目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0007]本专利技术首先提供一种调控植物侧根发育的
BnLBD29
基因，所述
BnLBD29
基因的核苷酸序列如
SEQ ID No:1
所示
。
[0008]进一步的，所述调控包括增加植物侧根数量或促进侧根发育；所述植物包括甘蓝型油菜
。
[0009]进一步的，所述调控通过过量表达
BnLBD29
基因实现
。
[0010]本专利技术还提供一种重组表达载体，所述重组表达载体包含所述
BnLBD29
基因
。
[0011]进一步的，所述重组表达载体包括载体
pK7FWG2.0。
[0012]本专利技术还提供一种重组工程菌，所述工程菌包含
BnLBD29
基因或所述重组表达载体
。
[0013]进一步的，所述工程菌的宿主菌为农杆菌
GV3101。
[0014]本专利技术还提供所述
BnLBD29
基因
、
或所述重组表达载体
、
或所述重组工程菌在调控油菜侧根发育中的应用
。
[0015]进一步的，所述应用包括在增加侧根数量或促进侧根发育中的应用
。
[0016]进一步的，所述应用通过过量表达
BnLBD29
基因实现
。
[0017]本专利技术还提供一种增加油菜侧根数量或促进侧根发育的方法，包括如下步骤：
[0018]克隆
BnLBD29
基因，构建含有
BnLBD29
基因的重组表达载体，将重组表达载体通过农杆菌介导转化油菜，筛选转基因植株，获得多侧根的油菜
。
[0019]进一步的，所述农杆菌介导转化油菜包括将所述重组表达载体转化受体菌，得到重组工程菌；将得到的所述的重组工程菌扩大培养，以所得菌液浸染油菜下胚轴进行转化
。
[0020]进一步的，所述克隆
BnLBD29
基因采用
SEQ ID No:2
和
SEQ ID No:3
所示序列为引物，以油菜
cDNA
为模板进行
PCR
扩增
。
[0021]进一步的，所述重组表达载体由
SEQ ID No:1
所示
BnLBD29
基因序列连入
pENtry
‑
D/TOPO
，然后
Gateway
方法将
BnLBD29 CDS
序列与
pK7FWG2.0
植物表达载体重组而得
。
[0022]本专利技术的有益效果：
[0023]本专利技术通过利用克隆的
BnLBD29
的全长编码序列
(Coding Sequences
，
CDS)
，成功构建了
35S
启动子驱动的过表达载体
pK7FWG2.0
‑
BnLBD29。
通过农杆菌侵染法遗传转化甘蓝型油菜，获得
T2
代阳性转基因植株
。
与对照相比，转基因
T2
代植株的侧根数量显著增加
。
这些农艺性状结果表明过表达甘蓝型油菜
BnLBD29
能显著增加侧根数量，对油菜的生长发育及产量增加具有重要意义
。
附图说明
[0024]图1为
qRT
‑
PCR
检测甘蓝型油菜中
BnLBD29
的表达部位的鉴定，其中
*
：
p<0.05,**
：
p<0.01
，
***
：
p<0.001。
[0025]图2为实施例2中
BnLBD29
基因的克隆的鉴定，1‑4号泳道均为
BnLBD29
的克隆结果
。
[0026]图3为
pK7FWG2.0
‑
BnLBD29
‑
eGFP
载体的示意图；图中：
LB
：
T
‑
DNA
的左边界序列；
RB
：
T
‑
DNA
的右边界序列
。
[0027]图4为过表达
BnLBD29
载体转化农杆菌的
PCR
鉴定结果；图中：
M
：
DL2,000Ma本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种调控植物侧根发育的
BnLBD29
基因，所述
BnLBD29
基因的核苷酸序列如
SEQ IDNo:1
所示
。2.
根据权利要求1所述的基因，其特征在于，所述调控包括增加植物侧根数量或促进侧根发育；所述植物包括甘蓝型油菜
。3.
根据权利要求1所述的基因，其特征在于，所述调控通过过量表达
BnLBD29
基因实现
。4.
一种重组表达载体，所述重组表达载体包含所述
BnLBD29
基因
。5.
一种重组工程菌，所述工程菌包含
BnLBD29
基因或所述重组表达载体
。6.
权利要求1‑3任一项所述
BnLBD29
基因
、
或权利要求4所述重组表达载体
...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹军，方达，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：