利用二次组织贴壁获得脐带间充质干细胞的方法技术

本发明专利技术属于间质干细胞培养领域，具体涉及利用二次组织贴壁获得脐带间充质干细胞的方法

【技术实现步骤摘要】
利用二次组织贴壁获得脐带间充质干细胞的方法


[0001]本专利技术属于间质干细胞培养领域，具体涉及利用二次组织贴壁获得脐带间充质干细胞的方法
。

技术介绍

[0002]脐带间充质干细胞，是从脐带中分离出来的一种成体干细胞，因其来源广泛
、
取材方便
、
免疫原性弱
、
增殖能力强的优势被广泛的应用于临床研究
。
可在微环境作用下归巢到损伤部位并分化为特异的组织细胞，分泌大量活性物质，具有创伤修复
、
免疫调节能力，有效的回避了胚胎干细胞涉及的伦理问题，也避免了类似诱导多能干细胞因复杂的诱导转分化机制所带来的安全性和风险问题，成为最具潜力的种子细胞
。
[0003]脐带由2条脐动脉和1条脐静脉构成，是连接胎盘和胎儿的管状结构，脐带的羊膜和血管间含有丰富的由蛋白多糖及各种胶原蛋白组成的凝胶状结缔组织，被称为华通氏胶，脐带华通氏胶中富含的基质细胞即脐带间充质干细胞
。
[0004]目前分离脐带来源的间充质干细胞主要有组织块贴壁法和酶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
脐带间充质干细胞的培养方法，其为：获取的华通氏胶组织块经第一培养
、
重接种
、
第一补液
、
第一换液后，待细胞集落平均汇合度大于
80
％，收集获得脐带间充质干细胞；所述重接种的时间为培养的第3～6天
。2.
根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，华通氏胶第一培养的密度为
1.875g/10ml
～
6.25g/10ml
；华通氏胶第一培养的条件为
CO2浓度
5.0
％
、
温度
37.0℃。3.
根据权利要求1或2所述的培养方法，其特征在于，所述第一补液为补充完全培养基；所述完全培养基为含有
10vol
％胎牛血清的基础培养基；所述基础培养基包括
DMEM
基础培养基
、
α
‑
MEM
基础培养基和
/
或
DMEM/F12
基础培养基中的至少一种
。4.
根据权利要求1～3任一项所述的培养方法，其特征在于，所述第一换液为更换全部完全培养基，所述完全培养基为含有
10vol
％胎牛血清的基础培养基；所述基础培养基包括
DMEM
基础培养基
、
α
‑
MEM
基础培养基和
/
或
DMEM/F12
基础培养基中的至少一种
。5.
根据权利要求1～4任一项所述的培养方法，其特征在于，停止第一补液的标准为细胞平均汇合度大于
75
％；停止第一换液的标准为细胞平均汇合度大于
...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈海佳，黄幸，罗二梅，林丹锐，
申请(专利权)人：广东省赛莱拉干细胞研究院广东国科细胞科技有限公司，
类型：发明
国别省市：