一种制造技术

本申请公开了一种

【技术实现步骤摘要】
一种
β
‑
葡聚糖酶及其应用


[0001]本说明书涉及生物
，特别涉及一种
β
‑
葡聚糖酶及其应用
。

技术介绍

[0002]β
‑
葡聚糖是
D
‑
葡萄糖分子通过
β
‑
糖苷键结合而成的高聚化合物，其广泛存在于植物和微生物中
。
受其来源的不同，其
β
‑
糖苷键类型
、
主链及侧链分布有所差异
。
例如燕麦中所含有的
β
‑
葡聚糖是由
D
‑
葡萄糖分子通过
β
‑
(1,3)
糖苷键和
β
‑
(1,4)
糖苷键链接而成
。
当前市售的燕麦
β
‑
葡聚糖的平均相对分子质量为
130000
‑
180000
道尔顿
。
之前众多研究表明，
β
‑
葡聚糖具有重要的生理功能
。
比如中低分子量的
β
‑
葡聚糖可以促进
Caspase
蛋白酶家族中半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶
‑
14(Caspase
‑
14)
的表达，而
Caspase
‑
14
具有皮肤特异性，在皮肤角质层形成中发挥的重要的作用
。
而自然界中中低分子量的
β
‑
葡聚糖含量极其微少，直接从燕麦等植物中提取面临诸多问题
。
而应用化学水解法制备中低分子量
β
‑
葡聚糖，虽然效率较高，但存在能耗高
、
环境污染等问题
。

技术实现思路

[0003]为了解决上述问题，本申请利用基因挖矿技术，从加氏乳杆菌
BCS
‑7中发掘到一内切葡聚糖酶，进而将其用于酶解燕麦
β
‑
葡聚糖制备得到小分子燕麦
β
‑
葡聚糖
。
[0004]本申请提供一种
β
‑
葡聚糖酶，所述
β
‑
葡聚糖酶的氨基酸序列如
SEQ ID NO.2
所示
。
[0005]本申请还提供一种分离的多核苷酸，所述分离的多核苷酸编码上述的
β
‑
葡聚糖酶
。
[0006]本申请还提供一种构建体，所述构建体含有上述的分离的多核苷酸
。
[0007]本申请还提供一种细胞，所述细胞包括上述的构建体，或所述细胞基因组整合有上述的构建体
。
[0008]本申请还提供一种制备
β
‑
葡聚糖酶的方法，所述方法包括培养上述的细胞表达
β
‑
葡聚糖酶
。
[0009]本申请还提供一种水解
β
‑
葡聚糖的方法，使用上述的
β
‑
葡聚糖酶与
β
‑
葡聚糖进行酶解反应
。
[0010]本申请还提供上述的
β
‑
葡聚糖酶在水解
β
‑
葡聚糖为葡萄糖和低聚糖中的应用
。
[0011]本说明书提出的
β
‑
葡聚糖酶，可能带来的有益效果包括但不限于：使用本申请的
β
‑
葡聚糖酶水解不同来源的
β
‑
葡聚糖后，可以一次性得到葡萄糖和小于
1000
道尔顿以下的低聚糖
(
纤维二糖
、
纤维三糖或纤维四糖
)
，无需或减少分离大分子量低聚糖的次数，简化生产工艺，便于工业生产
。
附图说明
[0012]本申请将以示例性实施例的方式进一步说明，这些示例性实施例将通过附图进行详细描述
。
这些实施例并非限制性的，其中：
[0013]图1为根据本申请一些实施例所示的
β
‑
葡聚糖酶基因
lggc PCR
产物琼脂糖凝胶电泳图；
[0014]图2为根据本申请一些实施例所示的
E.coli Rosetta(DE3)/pET28a
‑
lggc
蛋白电泳图；
[0015]图3为根据本申请一些实施例所示的
LgGC
催化
β
‑
葡聚糖水解的最适反应
pH
；
[0016]图4为根据本申请一些实施例所示的
LgGC
催化
β
‑
葡聚糖水解的最适反应温度；
[0017]图5为根据本申请一些实施例所示的
LgGC
催化
β
‑
葡聚糖水解产物的薄层色谱图
。
具体实施方式
[0018]为了更清楚地说明本说明书实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单的介绍
。
显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本说明书的一些示例或实施例，对于本领域的普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图将本说明书应用于其它类似情景
。
除非从语言环境中显而易见或另做说明，图中相同标号代表相同结构或操作
。
[0019]如本说明书和权利要求书中所示，除非上下文明确提示例外情形，“一”、“一个”、“一种”和
/
或“该”等词并非特指单数，也可包括复数
。
一般说来，术语“包括”与“包含”仅提示包括已明确标识的步骤和元素，而这些步骤和元素不构成一个排它性的罗列，方法或者设备也可能包含其它的步骤或元素
。
[0020]本说明书中使用了流程图用来说明根据本说明书的实施例的系统所执行的操作
。
应当理解的是，前面或后面操作不一定按照顺序来精确地执行
。
相反，可以按照倒序或同时处理各个步骤
。
同时，也可以将其他操作添加到这些过程中，或从这些过程移除某一步或数步操作
。
[0021]本申请提供一种
β
‑
葡聚糖酶，所述
β
‑
葡聚糖酶的氨基酸序列如
SEQ ID NO.2
所示
。
[0022]β
‑
葡聚糖酶是指能够水解
β
‑
葡聚糖中的
β
‑1，3糖苷键和
β
‑1，4糖苷键，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种
β
‑
葡聚糖酶，其特征在于，所述
β
‑
葡聚糖酶的氨基酸序列如
SEQ ID NO.2
所示
。2.
如权利要求1所述的
β
‑
葡聚糖酶，其特征在于，所述
β
‑
葡聚糖酶来源于
Lactobacillusgasseri
；和
/
或，所述
β
‑
葡聚糖酶为内切型
β
‑
葡聚糖酶
。3.
一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述分离的多核苷酸编码如权利要求1或2所述的
β
‑
葡聚糖酶
。4.
一种构建体，其特征在于，所述构建体含有如权利要求3所述的分离的多核苷酸
。5.
一种细胞，所述细胞包括如权利要求4所述的构建体，或所述细胞基因组整合有如权利要求4所述的构建体
。6.
一种制备
β
‑
葡聚糖酶的方法，所述方法包括培养如权利要求5所述的细胞表达
β
‑
葡聚糖酶
。7.
一种水解
β
‑
葡聚糖的方法，其特征在于，使用权利要求1或2所述的
β
‑
葡聚糖酶与
β
‑
葡聚糖进行酶解反应
。8.
如权利要求7所述的方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：张宝琪，朱伟胜，魏嘉士，
申请(专利权)人：百开盛上海生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：