一种利用超高效液相-串联质谱法鉴别牛肉真伪的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用超高效液相

【技术实现步骤摘要】
一种利用超高效液相
‑
串联质谱法鉴别牛肉真伪的方法


[0001]本专利技术涉及鉴别领域，具体涉及一种利用超高效液相
‑
串联质谱法鉴别牛肉真伪的方法
。

技术介绍

[0002]掺伪牛肉主要是指用一种或几种其他肉类进行加工仿造或者掺入牛肉中冒充牛肉在市场销售的牛肉
。
市场上终端消费主要在烧烤店，火锅店等，最终严重损害了消费者利益
。
比如媒体经常有报道的注水肉，猪肉
、
禽肉冒充牛肉用做烧烤等
。
因此建立准确
、
灵敏
、
简单的牛肉外源性肉掺伪鉴别具有重要意义
。
[0003]目前对掺伪牛肉检测的方法主要有
(1)
感官评测法：不同种类的肉及肉制品的感官特征不同，劣质肉与正常生鲜肉也有明显区别，可以通过观察肌肉纹理
、
颜色
、
气味等辨别是否掺伪
。
此方法需要有较丰富的经验，容易出错
。(2)<br/>聚合酶链式反本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种利用超高效液相
‑
串联质谱法鉴别牛肉真伪的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1
，肉类蛋白质提取，取样品，去除脂肪及结蹄组织，绞肉机制成肉糜，加碳酸氢铵溶液，超声处理一段时间，离心，取上清液，过滤膜，得蛋白提取液，低温下保存，采用
Bradford
法测定蛋白提取液中蛋白质浓度；
S2
，酶解，精密量取上述待酶解液至微量进样瓶中，加胰蛋白酶溶液，摇匀，恒温酶解，即得；
S3
，多肽的鉴定，通过高分辨质谱和软件，实现多肽的鉴定；
S4
，筛选特征肽段，通过数据比对，筛选牛
、
鸡
、
鸭
、
猪的特征肽段；
S5
，人工合成，通过
UPLC
‑
MS/MS
二级质谱结合蛋白质库，对牛肉特征肽段进行肽段序列分析，得到相对完整的牛肉特征肽段序列，按此序列进行人工合成肽段；
S6
，验证，利用超高效液相
‑
三重四级杆质谱
UPLC
‑
MS/MS
对特征肽段进行验证
。2.
根据权利要求1所述的一种利用超高效液相
‑
串联质谱法鉴别牛肉真伪的方法，其特征在于，高分辨质谱采用超高效液相
‑
高分辨飞行时间质谱仪，超高效液相
‑
高分辨飞行时间质谱条件如下：色谱条件：采用
C18
，流动相
A
为含
2mmol
·
ml
‑1甲酸铵的
0.1
％甲酸溶液；流动相
B
为乙腈；梯度洗脱程序为：0～
17min
，
95
％
A
→
50
％
A
；
17
～
20min
，
50
％
A
→
40
％
A
；
20
～
21min
，
40
％
A
→
95
％
A
；
21
～
24min
，
95
％
A
；流速：
0.3ml
·
min
‑1；进样体积：5μ
l
，柱温：
40℃。3.
根据权利要求2所述的一种利用超高效液相
‑
串联质谱法鉴别牛肉真伪的方法，其特征在于，质谱条件：电喷雾
(ESI)
源，正
、
负离子扫描模式；接口温度：
300℃
；脱溶剂温度：
526℃
；
DL
温度：
250℃
；一级
MS(scan)(
正离子模式
)
范围：
m/z50
～
1000
；一级
MS(scan)(
负离子模式
)
范围：
m/z50
～
1000
；
m/z
分辨率：
20ppm。4.
根据权利要求1所述的一种利用超高效液相
‑
串联质谱法鉴别牛肉真伪的方法，其特征在于，超高效液相
‑
三重四级杆质谱条件：色谱条件：采用色谱柱
Waters Acquity UPLC HSS
‑
T3
‑
C18 1.8
μ
m 2.1
×
100mm
，流动相
A
为含
2mmol
·
ml
‑1甲酸铵的
0.01
％甲酸溶液；流动相
B
为甲醇；梯度洗脱程序为：0～
10min
，
95
％
A
→
68
％
A
；
10
～
15min
，
68
％
A
→
40
％
A
；
15
～
16min
，
40
％
A
→
95
％
A
；
16
～
20min
，
95
％
A
；流速：
0.3ml
·
min
‑1；...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈柯，胡奇杰，邹惠亮，王东旭，陈楮建，陈敏，王新财，
申请(专利权)人：湖州市食品药品检验研究院湖州市药品和医疗器械不良反应监测中心，
类型：发明
国别省市：