一种疣梗曲霉及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种疣梗曲霉及应用，涉及微生物技术领域

【技术实现步骤摘要】
一种疣梗曲霉及应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，更具体的说是涉及一种疣梗曲霉及应用
。

技术介绍

[0002]淫羊藿素是药用植物淫羊藿
EpimediiFolium
所含的活性黄酮类成分之一，分子式为
C21H20O6
，相对分子量为
368.4
，淫羊藿素具有多重药理和生物活性，包括免疫调节
、
保护神经
、
抗炎等生物功效，同时也具有广谱抗肿瘤活性，其中对乳腺癌
、
口腔鳞状细胞癌
、
前列腺癌
、
肝癌等效果尤为显著，是一个在临床上有效且安全可靠的治疗各种肿瘤的药物候选分子
。
目前，以淫羊藿素为主要成分的一类新药
(
阿可拉定
)
通过了三期临床试验，证明其安全性和有效性，于
2022
年1月
10
日以软胶囊形式批准上市
。
[0003]然而，药用植物淫羊藿中的黄酮苷主要以朝藿定
A
，
B
，
C
和淫羊藿苷的形式存在，淫羊藿素的含量是及其低的，占
0.1
％不到，尽管可以通过化学方法
(
包括使用酸水解或者化合合成
)
去获取淫羊藿素，但是复杂的工艺
、
低的收率和环境污染问题
(
水解过程中产生的废水
、
有机溶剂废液
)
等限制着淫羊藿素的更广泛应用
。
生物转化为淫羊藿素的绿色生物制造提供了可能，正在成为未来的发展方向
。
[0004]根据朝藿定和淫羊藿素的结构比较，要想将朝藿定
A
，
B
，
C
和淫羊藿苷转化为淫羊藿素，需要同时具有
L
‑
鼠李糖苷酶
、
木糖苷酶和葡萄糖苷酶，且应该同时将朝藿定内外的糖基水解，而目前报道的只有两种
α
‑
L
‑
鼠李糖苷酶
(
来自于
Thermotoga petrophila DSM 13995
的
TpeRha
和来自
Dictyoglomus thermophilum DSM 3960
的
DthRha)
能够同时裂解朝藿定
C
的外部和内部鼠李糖苷键，而同时裂解藿定
A
，
B
的鼠李糖苷酶也未见报道，解决这一问题的基本思路有两个，一种是获得不同功能的酶，然后进行多次酶解反应或者进行多酶体系融合，这种方法存在一些不足，主要体现在多步反应，产物收率低，多酶体系建立中，酶促反应条件的协同优化等；另外一种是筛选能够产生多酶体系的单一微生物进行一锅法生物转化获得目标产物，优点是一锅法实现目标产物获得，收率高，另外，同一菌株意味着体内酶协同进化，酶促反应条件相对一致
。
总体而言，筛选并获得具有丰富酶系的微生物资源对天然产物生物转化是有具有重要意义的
。
[0005]因此，提供一种能够产生多酶体系，进行一锅法生物转化获得淫羊藿素的单一微生物是本领域技术人员亟需解决的问题
。

技术实现思路

[0006]有鉴于此，本专利技术提供了一种疣梗曲霉及应用
。
[0007]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0008]一种疣梗曲霉，所述疣梗曲霉名为菌株
F8889
，鉴定为疣梗曲霉
Aspergillus protuberus
，于
2023
年5月
24
日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为
CGMCC No.40637
，保藏地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，分类命名为疣梗曲霉
Aspergillus protuberus(A.protuberus)。
[0009]一种疣梗曲霉在高活性稀有高活性黄酮苷天然产物的生物转化中的应用
。
[0010]进一步的，所述高活性稀有高活性黄酮苷天然产物为淫羊藿素
。
[0011]进一步的，所述生物转化中培养所述疣梗曲霉的改进培养基组成为：
10g/L
葡萄糖，
10g/L
鼠李糖，
0.5g/L NaNO3，
1g/L KH2PO4，
2g/L Na2HPO4，
0.2g/L FeSO4，
0.1g/L ZnSO4，
0.2g/L CuSO4，
1g/L CaCl2，
0.5g/L MgSO4·
7H2O
；
[0012]培养初始
pH6.5。
[0013]植物内生菌因为与宿主植物存在协同进化关系，因此，植物内生菌直接或间接参与了宿主植物天然产物的生成和转化
。
近些年来，许多植物源天然产物如青蒿素被广泛报道，不仅仅冷杉植物产生，也可以由冷杉类植物内生菌产生，宿主植物内生菌也参与植物天然产物的生物转化，最常见的就是内生菌产生糖苷酶，参与植物天然产物如皂苷
、
黄酮苷类物质糖链的水解
。
[0014]为了寻找能够生物转化淫羊藿提取物中大量黄酮苷
(
朝藿定
A
，
B
，
C
和淫羊藿素
)
物质为稀有的淫羊藿素的微生物源，本专利技术分离
、
鉴定野生淫羊藿内生真菌，并开展
β
‑
糖苷酶的筛选和淫羊藿提取物转化研究，共筛选获得7株能够产生
β
糖苷酶的微生物，通过分子生物学鉴定这些菌株
。
[0015]其中，菌株
F8889
在淫羊藿提取物转化试验中，展现出将淫羊藿提取物中大量黄酮苷
(
朝藿定
A
，
B
，
C
和淫羊藿素
)
物质转化为稀有的淫羊藿素的潜能，大量黄酮苷
(
朝藿定
A
，
B
，
C
和淫羊藿苷
)
制备稀有高活性天然产物淫羊藿素的转化途径分别为
(
朝藿定
A
，
B
，
C
→
淫羊藿苷
→
淫羊藿次苷Ⅰ，淫羊藿次苷
Ⅱ→
淫羊藿素
)。
通过对该菌株构建系统发育树，鉴定为疣梗曲霉
A.protuberus。
[0016]为了提高糖苷酶的活性，开展了酶促反应最适...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种疣梗曲霉，其特征在于，所述疣梗曲霉名为菌株
F8889
，保藏编号为：
CGMCC No.40637。2.
如权利要求1所述一种疣梗曲霉在高活性稀有高活性黄酮苷天然产物的生物转化中的应用
。3.
如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述高活性稀有高活性黄酮苷天然产物为淫羊藿素
。4.
如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述生物转化中培养所述疣梗曲霉的改进培养基组成为：...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛文娇，安超，马赛箭，刘瑶，张琪雯，丁浩，刘晨，张婧婧，
申请(专利权)人：陕西省微生物研究所，
类型：发明
国别省市：