一种促进卵泡同步发育的制剂及牛体外胚胎生产方法技术

本发明专利技术公开了一种促进卵泡同步发育的制剂及牛体外胚胎生产方法，制剂，包括生理盐水

【技术实现步骤摘要】
一种促进卵泡同步发育的制剂及牛体外胚胎生产方法


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种促进卵泡同步发育的制剂及牛体外胚胎生产方法
。

技术介绍

[0002]这里的陈述仅提供与本专利技术相关的
技术介绍
，而不必然地构成现有技术
。
[0003]胚胎移植技术是将雌性动物体内的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的
、
生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术，可以发挥公母牛双方的优良遗传和繁殖潜力，后代含有
100
％的优良遗传基因
。
牛胚胎移植技术的出现使得品种改良速度提高了五倍，能用三年时间取得人工授精技术十五年的遗传改良效果，因此，牛胚胎移植能有效地提高育种效率
、
促进育种进程
。
[0004]目前，如何提高牛体外胚胎生产效率，降低牛体外胚胎生产成本，成为限制胚胎移植技术在牛品种改良中应用的瓶颈
。
牛体外胚胎生产中最常用的提高生产效率
、
降低生产成本的方法是在活体采卵前对供体牛进行超排处理，从而达到一次采卵获得数量更多胚胎的目的
。
然而，在实际应用中，现在常用的超排方案是在牛体外胚胎生产过程中多次注射超排试剂，存在人工成本高，容易引入人为误差的缺点：
FSH
半衰期为5‑6小时，因此多次注射
FSH
，对前后两次注射的时间间隔有严格的要求，人工注射
FSH
，尤其是在规模化生产中，每天对几十头甚至上百头牛进行注射，难免会有所疏漏
。
而这种人为疏漏会导致超排效果不理想，直接影响卵泡数量及采集到的卵母细胞的数量，进而影响体外胚胎生产效率
。

技术实现思路

[0005]针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的是提供一种促进卵泡同步发育的制剂及牛体外胚胎生产方法
。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术是通过如下的技术方案来实现：
[0007]第一方面，本专利技术提供一种促进卵泡同步发育的制剂，包括生理盐水
、
透明质酸钠和
FSH
，其中，透明质酸钠的浓度为
0.3
‑
0.8mg/ml
，
FSH
的浓度为
15
‑
25mg/ml。
[0008]FSH
，促卵泡激素，具有促进卵泡发育的作用
。
[0009]特定浓度的透明质酸钠与特定浓度的
FSH
配合，可以促进卵泡发育的同步性，有助于获得同步性更好的未成熟卵泡，以提高牛体外胚胎生产效率
。
增强卵泡发育的同步性，获得的卵母细胞发育阶段及后期发育潜能一致性更高，更有利于后期卵母细胞的成熟
、
受精
、
胚胎培养等；如果卵泡同步性不好，卵母细胞发育阶段不一致，导致体外培养过程中卵母细胞的成熟时间不一致，整体成熟率降低，进而导致整体受精率
、
胚胎发育率降低
。
卵泡成熟过程中，形成的直径较大的卵泡对其它直径较小的卵泡的生长发育有抑制作用，因此，为获得数量更多的卵母细胞，体外胚胎生产过程中要求是获得尽可能多的未成熟卵泡
。
[0010]透明质酸钠溶液作为基础液，透明质酸钠的水溶性好，其浓度仅为
0.3
‑
0.8mg/ml
，所述该基础液在短时间内经过搅拌即可完成配制，具有配制方便
、
即配即得的优势
。
[0011]经过实践发现，本专利技术的制剂由于浓度较低，正常速度注射即可，且注射后不易出现结节
、
肿胀等情况
。
[0012]当采用该制剂促进卵泡发育，采集同步发育的未成熟卵泡时，每头牛的
FSH
注射量可大幅降低，有效降低了体外胚胎生产成本
。
[0013]在实验过程中，专利技术人尝试采用透明质酸与
FSH
配合制备制剂，但是制剂中透明质酸与
FSH
的浓度需要较高，且所得制剂的效果是促进产生更多的排卵卵泡，获得更多的成熟卵母细胞，结合人工授精，更适合于体内胚胎的生产
。
[0014]而且透明质酸在水中的溶解度较低，且基础液浓度大，所以配制难度较大，基础液较为粘稠，如要配制5‑
10mg/l
的透明质酸溶液，需要搅拌过夜甚至更长时间
。
在该种粘稠的透明质酸基础液的中配制浓度较大的
FSH
，存在配制难度大
、
耗时长的问题
。
将该种粘稠制剂进行肌肉注射时，注射吸收速度慢，需缓慢注射，且注射部位易出现结节
、
肿胀等问题
。
[0015]此外，该种粘稠的制剂在实际应用时，需要注射
FSH
的剂量较高，如达到
300
‑
400mg
，胚胎生产成本较高
。
[0016]在一些实施例中，所述制剂中，透明质酸钠的浓度为
0.4
‑
0.6mg/ml。
[0017]在一些实施例中，所述制剂中，
FSH
的浓度为
17
‑
22mg/ml。
[0018]优选的，所述制剂中，透明质酸钠的浓度为
0.5mg/ml
，
FSH
的浓度为
20mg/ml。
[0019]第二方面，本专利技术提供一种牛胚胎体外生产方法，包括如下步骤：
[0020]配制促进卵泡同步发育的制剂；
[0021]将供体牛的卵泡进行去优势处理；
[0022]去优势处理设定时间后，对供体牛进行单次肌肉注射所述制剂；
[0023]注射制剂设定时间后，进行活体采卵；
[0024]将采集的采卵液洗涤后，放入平衡好的成熟液滴中，培养成熟；
[0025]将培养成熟的卵母细胞进行体外受精
、
体外胚胎培养，即可
。
[0026]在一些实施例中，所述制剂的制备方法为：将透明质酸钠粉末溶于生理盐水中，配制透明质酸钠溶液，溶胀过夜，然后向其中加入
FSH
，搅拌均匀，得澄清制剂
。
[0027]在一些实施例中，所述供体牛为青年空怀牛
、
确认怀孕
30
‑
100
天的怀孕牛或2‑
10
岁成母牛，且经直肠检查，无生殖系统疾病
。
[0028]在一些实施例中，去优势处理的方法为：采用活体采卵仪将卵巢上的直径大于
5mm
的卵泡戳破，并将卵泡液抽取干净
。
[0029]将直径较大的卵泡去除，因为直径较大的卵泡意味着这个卵泡有更大的发育潜本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种促进卵泡同步发育的制剂，其特征在于：包括生理盐水
、
透明质酸钠和
FSH
，其中，透明质酸钠的浓度为
0.3
‑
0.8mg/ml
，
FSH
的浓度为
15
‑
25mg/ml。2.
根据权利要求1所述的促进卵泡同步发育的制剂，其特征在于：所述制剂中，透明质酸钠的浓度为
0.4
‑
0.6mg/ml。3.
根据权利要求1所述的促进卵泡同步发育的制剂，其特征在于：所述制剂中，
FSH
的浓度为
17
‑
22mg/ml。4.
根据权利要求1所述的促进卵泡同步发育的制剂，其特征在于：所述制剂中，透明质酸钠的浓度为
0.5mg/ml
，
FSH
的浓度为
20mg/ml。5.
一种牛胚胎体外生产方法，其特征在于：包括如下步骤：配制权利要求1‑4任一所述促进卵泡同步发育的制剂；将供体牛的卵泡进行去优势处理；去优势处理设定时间后，对供体牛进行单次肌肉注射所述制剂；注射制剂设定时间后，进行活体采卵；将采集的采卵液洗涤后，放入平衡好的成熟液滴...

【专利技术属性】
技术研发人员：张燕，马庆涛，王玲玲，高运东，
申请(专利权)人：山东奥克斯畜牧种业有限公司，
类型：发明
国别省市：