一种复合纳米酶及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种复合纳米酶及其制备方法和应用，所述复合纳米酶以普鲁士蓝纳米颗粒为载体，在普鲁士蓝纳米颗粒表面包覆有由二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱形成的磷脂双分子层，所述磷脂双分子层中镶嵌有

【技术实现步骤摘要】
一种复合纳米酶及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及一种复合纳米酶及其制备方法和应用，属于生物医学领域
。

技术介绍

[0002]在动脉粥状硬化的过程中，斑块破裂导致血栓形成是引起冠心病
、
脑梗死等重大疾病的主要原因
。
其中由巨噬细胞发展而来的泡沫细胞会大量累积胆固醇酯
(CE)
并向血管壁内管腔突出形成斑块，而富含脂质的斑块易于破裂
。
在细胞内，
(
中性
)
胆固醇酯酶
(nCEH)
负责水解胆固醇酯生成游离胆固醇
。
细胞内的胆固醇酯只有被
nCEH
降解为自由胆固醇，才能够运输出细胞，因此
nCEH
的水解作用被认为是胆固醇逆向转运的关键步骤
。
[0003]nCEHs
的主要作用体现在将胆固醇酯水解为胆固醇与脂肪酸，从而促进胆固醇的外流，减少胆固醇酯在细胞中的累积，同时
nCEHs
在抑制炎症等方面也存在较为良好的作用
。
因此，在动脉粥状硬化细胞内，高表达胆固醇水解酶可促进
CE
水解与细胞内游离胆固醇外排，抑制泡沫细胞的发展与斑块的形成，可以有效延缓
、
抑制动脉粥状硬化病变，有利于防止斑块进一步发展与冠心病
、
脑梗死等疾病突发的作用，从源头上遏止疾病的发展
。
[0004]纳米酶是生物医学纳米
中重要的前沿研究方向，也是酶工程领域的重大进展和创新
。
与天然酶相比，纳米酶具有制备简单
、
可大规模生产
、
环境耐受性强
、
制备及储存成本低廉
、
可重复使用等优势
。
[0005]在人工水解酶方面，短肽
‑
金
、
碳纳米复合物和金属胶束已被多次证实具备水解脂类的作用
。
其中，金纳米复合物多使用
Au
‑
S
键将金纳米与带有特殊基团的相关烷基相连，进而与短肽自组装形成最终的复合物，复合物短肽上所带基团起到水解作用，其中部分利用多基团协同作用
、
部分利用金纳米颗粒营造的局部微环境进一步加速催化
。
碳纳米复合物与其类似，其将金纳米颗粒置换为刚性的碳纳米材料，同时碳纳米材料可创造疏水微环境促进质子转移提高催化活性
。
而金属胶束则将功能配体与离子配合物相结合形成胶体，其中既含有催化中心又模拟了疏水微环境，对酯有很强的水解性
。
[0006]在上述以及其他人工模拟酯水解酶中，起到关键水解作用的主要为咪唑基团
。
而在胆固醇酯水解酶等酯水解酶的活性中心中均含有组氨酸，其携带的咪唑基团正是起到水解作用的部位
。
在催化三联体中，咪唑基团也作为重要的一部分发挥催化水解作用
。
同时我们发现大多人工水解酶的构建过程中，均利用金属或其他材料载体创造了局部微环境以模拟天然酶，提高了催化活性
。
目前，临床治疗动脉粥状硬化的主要方案为降胆固醇药物，但没有有效的方法直接降低斑块内脂质含量，且尚未有基于水解斑块内胆固醇酯的纳米药物
。
普鲁士蓝纳米酶具备类过氧化氢酶
(CAT)
和类超氧化物歧化酶
(SOD)
功能，并已经被证明在斑块中可起到调节炎症微环境，缓解动脉粥状硬化的作用
。
目前尚无报道普鲁士蓝纳米酶是否具有水解活性，故也没有将普鲁士蓝纳米酶用于制备具有酯水解酶特性的复合纳米酶来治疗动脉粥状硬化
。

技术实现思路

[0007]专利技术目的：本专利技术所要解决的技术问题是提供了一种具有酯水解酶特性的复合纳米酶及其制备方法和应用
。
[0008]技术方案：为解决上述技术问题，本专利技术提供一种复合纳米酶，以普鲁士蓝纳米颗粒为载体，在其表面包覆有由二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱形成的磷脂双分子层，受亲疏水作用的影响，所述磷脂双分子层中镶嵌有
(2.3
‑
二油酰基
‑
丙基
)
‑
三甲胺与十一烷基咪唑
。
[0009]本专利技术还提供了一种制备所述的复合纳米酶的方法，包括以下步骤：将二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱
、(2,3
‑
二油酰基
‑
丙基
)
‑
三甲胺和十一烷基咪唑的混合乙腈溶液旋蒸，加入普鲁士蓝纳米颗粒水溶液，纯化后得到所述的复合纳米酶
。
[0010]其中，所述混合溶液中二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱
、(2,3
‑
二油酰基
‑
丙基
)
‑
三甲胺和十一烷基咪唑的浓度比为
10:(5
～
10):(5
～
10)。
[0011]其中，所述混合溶液中二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱
、(2,3
‑
二油酰基
‑
丙基
)
‑
三甲胺和十一烷基咪唑的体积比为
975:(25
～
50):(25
～
50)。
[0012]其中，所述混合溶液和普鲁士蓝纳米颗粒水溶液的体积比为
1050:(300
～
400)。
[0013]其中，普鲁士蓝纳米颗粒的尺寸为
120
～
160nm。
[0014]其中，所述复合纳米酶的尺寸为
160
～
200nm。
[0015]其中，普鲁士蓝纳米颗粒的电位为
‑
35
～
‑
25mV。
[0016]其中，所述复合纳米酶的电位为
+5
～
+15mV。
[0017]其中，所述普鲁士蓝纳米颗粒水溶液中的铁浓度为
700
～
800ug/ml。
[0018]其中，普鲁士蓝纳米颗粒的制备方法包括以下步骤：将
FeCl3·
6H2O
溶于聚乙烯吡咯烷酮水溶液中，逐滴加入
K4[Fe(CN)6]·
3H2O
水溶液，纯化后得到普鲁士蓝纳米颗粒
。
[0019]其中，所述
FeCl3·
6H2O
和聚乙烯吡咯烷酮水溶液的质量体积比为
(25
～
30):80mg/mL。
[0020]其中，逐滴加入
K4[Fe(CN)6]·
3H2O
水溶液的滴加速率为
30
～
50mL/h。
[0021]其中，
FeCl3本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种复合纳米酶，其特征在于，以普鲁士蓝纳米颗粒为载体，在普鲁士蓝纳米颗粒表面包覆有由二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱形成的磷脂双分子层，所述磷脂双分子层中镶嵌有
(2.3
‑
二油酰基
‑
丙基
)
‑
三甲胺与十一烷基咪唑
。2.
一种制备权利要求1所述的复合纳米酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：将二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱
、(2,3
‑
二油酰基
‑
丙基
)
‑
三甲胺和十一烷基咪唑的混合乙腈溶液旋蒸，加入普鲁士蓝纳米颗粒水溶液，纯化后得到所述的复合纳米酶
。3.
根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述混合溶液中二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱
、(2,3
‑
二油酰基
‑
丙基
)
‑
三甲胺和十一烷基咪唑的浓度比为
10:(5
～
10):(5
～
10)。4.
根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述混合溶液中二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱
、(2,3
‑
二油酰基
‑
丙基
)
‑
三甲胺和十一烷基咪唑的体积比为
975:(25
～
50):(25
～
50...

【专利技术属性】
技术研发人员：张宇，于濮歌，王嘉鸣，马明，
申请(专利权)人：东南大学，
类型：发明
国别省市：