测定普瑞巴林和利鲁唑浓度的方法技术

本发明专利技术公开了测定普瑞巴林和利鲁唑浓度的方法，包括：预处理待测样品，所述样品包括血浆

【技术实现步骤摘要】
测定普瑞巴林和利鲁唑浓度的方法


[0001]本专利技术涉及测定普瑞巴林和利鲁唑浓度的方法，属于生物基质测定的

。

技术介绍

[0002]普瑞巴林最初于
2004
年被美国食品药品监督管理局批准为抗癫痫药物，能影响大脑通过神经系统发送疼痛信号的化学物质，可用于治疗纤维肌痛引起的疼痛，或糖尿病
(
糖尿病神经病变
)、
带状疱疹
(
疱疹后神经痛
)
或脊髓损伤患者的神经疼痛
。
[0003]利鲁唑在体内具有神经保护
、
抗惊厥和镇静的作用，能抑制体内脑切片和皮质纹状体神经元的谷氨酸释放，从而导致神经末梢上电压依赖性钠通道的失活，以及
G
蛋白依赖性信号转导过程的激活
。
[0004]普瑞巴林和利鲁唑联合用药能起到协同作用，增强抗周围神经病理性疼痛的效果
。
但尚未有一种专利技术技术可同时检测生物基质中的普瑞巴林和利鲁唑浓度
。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于克服现有技术中的不足，提供测定普瑞巴林和利鲁唑浓度的方法，能够同时测定普瑞巴林的浓度和利鲁唑的浓度
。
[0006]一方面，本专利技术提供一种测定普瑞巴林和利鲁唑浓度的方法，包括：
[0007]预处理待测样品，所述样品包括血浆
、
全血和
/
或组织匀浆液；
[0008]基于液相色谱
>‑
质谱法定量分析待测样品中普瑞巴林和利鲁唑的检测值，并根据预设的标准曲线，利用检测值确定普瑞巴林和利鲁唑的每毫升纳克级浓度；
[0009]其中，标准曲线包括普瑞巴林标准曲线和利鲁唑标准曲线
。
[0010]进一步的，所述预处理待测样品包括以下步骤：
[0011]基于蛋白沉淀法，去除待测样品中干扰普瑞巴林和利鲁唑含量测定的蛋白质，并基于色谱分离法，将待测样品中的普瑞巴林和利鲁唑以及干扰物质分离
。
[0012]进一步的，所述预处理待测样品包括以下步骤：
[0013]将内标乙腈溶液与待测样品涡旋混匀后，离心处理混合液，使得待测样品中的普瑞巴林和利鲁唑以及干扰物质分离；
[0014]离心处理后获得的上清液包括普瑞巴林和利鲁唑；
[0015]离心处理后获得的沉淀物包括干扰物质
。
[0016]进一步的，所述内标为甲苯磺丁脲；
[0017]进一步的，所述内标乙腈溶液与待测样品的体积比为
20。
[0018]进一步的，所述离心处理过程中：
[0019]转速为
3200
‑
4000
转
/
分钟；
[0020]进一步的，离心时间为5‑
20
分钟
。
[0021]进一步的，所述离心处理过程中：
[0022]转速为
4000
转
/
分钟；
[0023]进一步的，离心时间为
10
分钟
。
[0024]进一步的，所述液相色谱质谱法中：
[0025]第一流动相为含
0.1
％甲酸的灭菌注射用水；
[0026]进一步的，第二流动相为含
0.1
％甲酸的乙腈；
[0027]进一步的，两个流动相由各自的泵驱动汇入色谱柱进样器
。
[0028]进一步的，所述普瑞巴林标准曲线的线性范围为
20
‑
20000ng/ml
；
[0029]进一步的，所述利鲁唑标准曲线的线性范围为2‑
2000ng/ml。
[0030]进一步的，所述液相色谱
‑
质谱法中所用仪器的型号为
Triple Quad
TM 5500+
质谱
。
[0031]进一步的，所述液相色谱
‑
质谱法中所用仪器的型号为
Eclipse Plus C18 3.5
μ
m 4.6
×
100mm。
[0032]与现有技术相比，本专利技术所达到的有益效果：
[0033]本专利技术能够同时测定普瑞巴林的浓度和利鲁唑的浓度，具有高效率性；
[0034]相对于传统的液液萃取方法，本专利技术的方法能够避免使用多种易挥发试剂，具有高安全性；
[0035]本专利技术的方法采用简单快速的蛋白沉淀进行预处理，去除干扰普瑞巴林和利鲁唑含量测定的蛋白质，并利用色谱柱分离普瑞巴林和利鲁唑和样品中的干扰物质，使测量结果更精确，具有高精确性；
[0036]本专利技术的测定方法能同时测定普瑞巴林和利鲁唑浓度，具有高效率性；能将生物基质中普瑞巴林定量测定的下限达到
20ng/ml
，利鲁唑定量测定的下限达到
2ng/ml
，具有高灵敏度；
[0037]本专利技术的方法操作步骤简单，可执行性强，测定成本低，易于推广适用
。
附图说明
[0038]图1为本专利技术实施例1中普瑞巴林定量下限
20ng/ml
的质谱图；
[0039]图2为本专利技术实施例1中利鲁唑定量下限
2ng/ml
的质谱图
。
具体实施方式
[0040]下面结合附图对本专利技术作进一步描述
。
以下实施例仅用于更加清楚地说明本专利技术的技术方案，而不能以此来限制本专利技术的保护范围
。
[0041]本专利技术的测定普瑞巴林和利鲁唑浓度的方法，是基于液相色谱
‑
质谱法实现浓度测定
。
[0042]本专利技术的测定普瑞巴林和利鲁唑浓度的方法主要包括两部分：
S1
预处理待测样品和
S2
定量分析普瑞巴林和利鲁唑浓度
。
[0043]S1
预处理待测样品，具体包括以下步骤：
[0044]基于蛋白沉淀法，去除待测样品中干扰普瑞巴林和利鲁唑含量测定的蛋白质，并基于色谱分离法，将待测样品中的普瑞巴林和利鲁唑以及干扰物质分离
。
[0045]本专利技术的方法采用简单快速的蛋白沉淀进行预处理，去除干扰普瑞巴林和利鲁唑含量测定的蛋白质，并利用色谱柱分离普瑞巴林和利鲁唑和样品中的干扰物质，使测量结果更精确
。
[0046]其中，样品为生物基质，生物基质包括血浆
、
全血和
/
或组织匀浆液
。
[0047]应用时，将内标乙腈溶液与待测样品涡旋混匀后，离心处理混合液，使得待测样品中的普瑞巴林和利鲁唑以及干扰物质分离
。
[0048]其中，内标为甲苯磺丁脲；内标乙腈溶液与待测样品的体积比为
20。
[0049]本申请离心处理后获得本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种测定普瑞巴林和利鲁唑浓度的方法，其特征是，包括：预处理待测样品，所述样品包括血浆
、
全血和
/
或组织匀浆液；基于液相色谱
‑
质谱法定量分析待测样品中普瑞巴林和利鲁唑的检测值，并根据预设的标准曲线，利用检测值确定普瑞巴林和利鲁唑的每毫升纳克级浓度；其中，标准曲线包括普瑞巴林标准曲线和利鲁唑标准曲线
。2.
根据权利要求1所述的测定普瑞巴林和利鲁唑浓度的方法，其特征是，所述预处理待测样品包括以下步骤：基于蛋白沉淀法，去除待测样品中干扰普瑞巴林和利鲁唑含量测定的蛋白质，并基于色谱分离法，将待测样品中的普瑞巴林和利鲁唑以及干扰物质分离
。3.
根据权利要求1所述的测定普瑞巴林和利鲁唑浓度的方法，其特征是，所述预处理待测样品包括以下步骤：将内标乙腈溶液与待测样品涡旋混匀后，离心处理混合液，使得待测样品中的普瑞巴林和利鲁唑以及干扰物质分离；离心处理后获得的上清液包括普瑞巴林和利鲁唑；离心处理后获得的沉淀物包括干扰物质
。4.
根据权利要求3所述的测定普瑞巴林和利鲁唑浓度的方法，其特征是，所述内标为甲苯磺丁脲；和
/
或，所述内标乙腈溶液与待测样品的体积比为
20。5.
根据权利要求3所述的测定生物基质中普瑞巴林和利鲁唑浓度的方法，其特征是，所述离心处理过程中：转速为
3200
‑
4000
转
/
分钟；和
/
或，离心时间为5‑
20
分钟
。6....

【专利技术属性】
技术研发人员：叶双双，吴胜男，刘大伟，葛明玉，胡明文，吴津津，刘燕，陈玲玲，娄华意，
申请(专利权)人：苏州华测生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：