一种分离检测丙咪嗪和三甲丙咪嗪的方法技术

本发明专利技术实施例公开了一种分离检测丙咪嗪和三甲丙咪嗪的方法，以毛细管为分离通道，三羟甲基氨基甲烷、β－环糊精和乙腈的混合溶液为分离溶液，使得丙咪嗪和三甲丙咪嗪得到分离，然后在毛细管柱末端，通过三联吡啶钌电化学发光体系对丙咪嗪和三甲丙咪嗪进行检测，最终实现对丙咪嗪和三甲丙咪嗪的分离检测。本发明专利技术提供的利用毛细管电泳电化学发光联用装置对丙咪嗪和三甲丙咪嗪分离检测具有实验装置简单、操作方法简单易行、成本低、分离效率高、检测灵敏度高等优点。通过本发明专利技术提供的方法对丙咪嗪和三甲丙咪嗪进行分离检测时，丙咪嗪和三甲丙咪嗪的检测限分别为５．０×１０－９ｍｏｌ／Ｌ和１．０×１０－９ｍｏｌ／Ｌ。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及丙咪嗪和三甲丙咪嗪
，更具体地说，涉及一种分离检测丙咪 嗪和三甲丙咪嗪的方法。
技术介绍
丙咪嗪和三甲丙咪嗪属于三环类抗抑郁药物。三环类抗抑郁药物自20世纪60年 代开始应用于治疗抑郁症，目前还用于治疗其他精神疾患，如强制性障碍、注意力缺乏性疾 病、恐慌、恐惧症、慢性疼痛综合征、周围神经病、夜间遗尿、焦虑症、进食障碍及偏头痛等。目前的分析方法有高效液相色谱法，气相色谱法，电化学方法，毛细管电泳，非水 毛细管电泳等。高效液相色谱具有很好的分离能力，但成本较高。检测技术包括紫外可见检 测、激光诱导荧光、质谱等方法，其中，紫外可见检测作为常用的检测技术，其灵敏度较低； 质谱和激光诱导荧光的仪器昂贵，操作复杂。A. G. Chen等报道了一种用高效液相色谱与紫外检测联用分离检测丙咪嗪和三甲 丙咪嗪的方法(A. G. Chen, Y. K. Wing, H. Chiu, S. Lee, C. N. Chen, K. Chan, J. Chromatogr. B 693 (1997) 153)。利用该方法得到丙咪嗪和三甲丙咪嗪的线性范围分别为0. 2 1. 6 μ M和 0. 1 1. 2 μ M ；检测限分别为160ηΜ和120ηΜ。该方法检测灵敏度较低，使用仪器价格昂贵， 分离检测中消耗溶剂量大。现有技术中，H-Kirchhen 等报道了一种用高效液相色谱与质谱联用分离 检测丙咪嗪和三甲丙咪嗪的方法(H. Kirchherr，W. N. Kuhn-Velten，J. Chromatogr. B 843(2006) 100)。高效液相色谱和质谱仪器的价格昂贵，操作复杂，分离检测成本高。本专利技术人考虑，提供，实现对丙咪嗪和 三甲丙咪嗪的分离检测，以降低成本、提高灵敏度。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供，以实现对丙咪 嗪和三甲丙咪嗪的分离检测，降低分离检测成本，提高灵敏度。本专利技术提供，步骤包括连接好毛细管电泳电化学发光装置，将配制好的丙咪嗪和三甲丙咪嗪混合样品放 在所述装置的样品池内，在所述装置的毛细管内运行分离溶液，待基线稳定后，使得丙咪 嗪和三甲丙咪嗪混合样品进入所述装置的毛细管，所述分离溶液是由三羟甲基氨基甲烷、 β-环糊精和乙腈组成的混合溶液；以所述装置的毛细管为分离通道，将所述样品在分离电压的作用下得到分离； 在所述毛细管柱末端的电化学发光检测池内进行检测，所述检测池内为三联吡啶 钌和NaH2PO4-Na2HPO4的混合溶液。优选的，所述β -环糊精的浓度为0. 15 0. 30mmol/L。优选的，所述β -环糊精的浓度为0. 20mmol/L。优选的，所述三羟甲基氨基甲烷的浓度为10 50mmol/L。优选的，所述三羟甲基氨基甲烷溶液的pH为2. 0 4. 0。优选的，所述乙腈溶液的体积百分比浓度为15 25%。优选的，所述三联吡啶钌的浓度为1 5mmol/L。优选的，所述NaH2PO4-Na2HPO4 的浓度为 40 60mmol/L。优选的，所述NaH2PO4-Na2HPO4溶液的pH值为6. 0 9. 0。优选的，所述毛细管为内径为75 μ m的未涂层融硅毛细管。从上述技术方案可以看出，本专利技术以毛细管作为分离通道，三羟甲基氨基甲烷 (简称Tris)、β -环糊精和乙腈的混合溶液作为分离溶液，使得丙咪嗪和三甲丙咪嗪得 到分离，然后通过三联吡啶钌电化学发光体系对丙咪嗪和三甲丙咪嗪进行检测，最终实现 对丙咪嗪和三甲丙咪嗪的分离检测。本专利技术提供的利用毛细管电泳电化学发光联用装置 对丙咪嗪和三甲丙咪嗪分离检测具有实验装置简单、操作方法简单易行、消耗试剂和药 品的量少、成本低、分离效率高、检测灵敏度高等优点。通过本专利技术提供的方法对丙咪嗪 和三甲丙咪嗪进行分离检测时，丙咪嗪和三甲丙咪嗪的检测限分别为5. 0 X IO-9Hio 1/L和 1. 0Xl(T9mol/L。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现 有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本 专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以 根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术实施例公开的三联吡啶钌与丙咪嗪、三甲丙咪嗪在钼盘电极上的循 环伏安曲线及其相对应的电化学发光曲线；图2为本专利技术实施例公开的丙咪嗪、三甲丙咪嗪标准溶液的电泳图谱。 具体实施例方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完 整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于 本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他 实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术实施例公开了，以实现对丙咪嗪 和三甲丙咪嗪的分离检测，降低分离检测成本，提高灵敏度。本专利技术提供，步骤包括连接好毛细管电泳电化学发光装置，将配制好的丙咪嗪和三甲丙咪嗪混合样品放 在所述装置的样品池内，在所述装置的毛细管内运行分离溶液，待基线稳定后，使得丙咪 嗪和三甲丙咪嗪混合样品进入所述装置的毛细管，所述分离溶液是由三羟甲基氨基甲烷、 β-环糊精和乙腈组成的混合溶液；以所述装置的毛细管为分离通道，将所述样品在分离电压的作用下得到分离；在所述毛细管柱末端的电化学发光检测池内进行检测，所述检测池内为三联吡啶钌和NaH2PO4-Na2HPO4的混合溶液。按照本专利技术，对所述毛细管电泳电化学发光联用装置并无特别限制，例如可以选 用西安瑞迈分析仪器有限责任公司出售的MPI-A型毛细管电泳电化学发光检测仪。按照本 专利技术，光电倍增管的电压优选为700V 900V，更优选为800V。所述检测池内为三电极体系，所述三电极体系优选为直径为500 μ m的Pt盘工作 电极、Ag/AgCl参比电极(KCl饱和溶液)和Pt丝对电极。按照本专利技术，分离后的样品进入电化学发光检测池内进行检测。本专利技术对所述检 测电位优选为1. 0 1. 4V，更优选为1. 2V。所述检测池内为三联吡啶钌和NaH2PO4-Na2HPO4 的混合溶液，所述三联吡啶钌的浓度优选为1 5mmol/L，更优选为2mmol/L。所述 NaH2PO4-Na2HPO4缓冲溶液的pH值优选为6. 0 9. 0，更优选为7. 0。所述NaH2PO4-Na2HPO4 缓冲溶液浓度优选为40mmol/L 60mmol/L，更优选为50mmol/L。按照本专利技术，进样电压和进样时间影响进样量。进样时间优选为2 8s，更优选为 4s。所述进样电压优选为10 20kV，更优选为20kV。所述毛细管内为分离溶液，所述分离溶液包括三羟甲基氨基甲烷(简称Tris)、 β -环糊精和乙腈溶液，所述Tris缓冲溶液的pH值优选为2. 0 4. 0，更优选为2. 0 ；所述 Tris缓冲溶液浓度优选为10mmol/L 50mmol/L，更优选为20mmol/L。β-环糊精能与丙咪嗪和三甲丙咪嗪形成包和物，由于丙咪嗪和三甲丙咪嗪结构 的不同，与环糊精形成的包合物的稳定常数不同，从而最终实现两种物质的分离。所述 β -环糊精的浓度为 0. 15mmol/L 0. 30mmol/L，优选为 0. 2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离检测丙咪嗪和三甲丙咪嗪的方法，其特征在于，步骤包括：　　连接好毛细管电泳电化学发光装置，将配制好的丙咪嗪和三甲丙咪嗪混合样品放在所述装置的样品池内，在所述装置的毛细管内运行分离溶液，待基线稳定后，使得丙咪嗪和三甲丙咪嗪混合样品进入所述装置的毛细管，所述分离溶液是由三羟甲基氨基甲烷、β－环糊精和乙腈组成的混合溶液；　　以所述装置的毛细管为分离通道，将所述样品在分离电压的作用下得到分离；　　在所述毛细管柱末端的电化学发光检测池内进行检测，所述检测池内为三联吡啶钌和ＮａＨ↓［２］ＰＯ↓［４］－Ｎａ↓［２］ＨＰＯ↓［４］的混合溶液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：由天艳，于彩霞，唐小风，袁柏青，李霞，
申请(专利权)人：中国科学院长春应用化学研究所，
类型：发明
国别省市：82[中国|长春]