用于由所培养的细胞提取细胞衍生产物的生物反应器和方法以及纳米结构化纤维素产品技术

本公开提供一种用于从所培养的细胞中提取细胞衍生产物的生物反应器，所述生物反应器包括：容器；用于将细胞培养基输入容器的入口，用于从容器中输出包含细胞衍生产物的细胞培养基的出口，所述容器包括或连接到隔室，所述隔室包含构造成接收细胞的纳米结构化纤维素，所述隔室包括第一分离表面，所述第一分离表面将所述纳米结构化纤维素与所述出口隔开，并且允许包含细胞衍生产物的细胞培养基行进通过第一分隔表面。本公开还提供一种用于从所培养的细胞中分离细胞衍生产物的方法以及一种纳米结构化纤维素产物。米结构化纤维素产物。米结构化纤维素产物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于由所培养的细胞提取细胞衍生产物的生物反应器和方法以及纳米结构化纤维素产品


[0001]本申请涉及生物反应器和从所培养细胞中分离细胞衍生产物的方法。更具体来说，本申请涉及采用纳米结构化纤维素作为细胞培养基质的生物反应器和方法。

技术介绍

[0002]活细胞将囊泡释放到局部环境中，称为胞外囊泡(EV)。通常存在有三个主要的子类EV：微囊泡、凋亡体和外泌体。微囊泡直接从细胞膜上脱落，并且其直径为50至1000nm。凋亡体来源于垂死的细胞，其直径为50至4000nm。外泌体是从多囊泡体(MVB)而不是从细胞膜释放的，其直径为20至150nm。外泌体可能含有RNA、DNA和蛋白质分子。外泌体是在细胞之间传递生物活性蛋白质和一般物质的通讯载剂。
[0003]EV可以作为细胞信号传导的中介体，因为其能够传递RNA和蛋白质的说明线索(instructional cue)，这可用于医疗目的。还有证据表明，EV可能刺激再生或调节病理条件，因此EV可以在治疗方法中用作新的潜在治疗剂。EV还可以用作疾病(如癌症)的诊断生物标志物，例如基于独特miRNA谱和本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于从所培养的细胞中提取细胞衍生产物的生物反应器(10)，所述生物反应器包括：
‑
容器(12)；
‑
用于将细胞培养基输入容器的入口(14)，
‑
用于从容器中输出包含细胞衍生产物的细胞培养基的出口(16)，
‑
所述容器(12)包括或连接至隔室(18)，所述隔室包括构造成接收细胞的纳米结构化纤维素，所述隔室包括第一分离表面(20)，其将纳米结构化纤维素与出口隔开，并且允许包含细胞衍生产物的细胞培养基行进通过所述第一分离表面(20)，并且所述隔室任选地包含其他分离表面(30)，用于气体交换。2.如权利要求1所述的生物反应器，其中，第一分离表面(20)包括可渗透含细胞衍生产物的细胞培养基且不可渗透细胞和纳米结构化纤维素的结构或以该结构的形式存在，所述结构为例如膜或网状物，例如平均孔尺寸为0.4
‑
3μm的膜。3.如权利要求1或2所述的生物反应器，所述生物反应器包括用于在隔室(18)中混合纳米结构化纤维素和细胞的装置(24)，例如其中，用于混合的装置包括混合器；用于提供培养基流的装置；和/或用于调整容器或隔室体积的装置。4.如前述权利要求中任一项所述的生物反应器，包括用于通过入口(14)和/或出口(16)提供细胞培养基流的装置，优选通过包括纳米结构化纤维素的隔室(18)，例如，从而获得灌注型生物反应器。5.如前述权利要求中任一项所述的生物反应器，其中，包括纳米结构化纤维素的隔室(18)包括在一个或多个表面上的细胞培养凝胶的涂层，例如，包含琼脂糖、胶原或透明质酸或其衍生物的凝胶，例如，浓度为0.3
‑
1.0％(w/w)的凝胶。6.如前述权利要求中任一项所述的生物反应器，其中，包括纳米结构化纤维素的隔室(18)是相对于容器(12)的单独单元(36)，例如，固定床反应器。7.如前述权利要求中任一项所述的生物反应器，其中，第一表面是中空纤维形式。8.如前述权利要求中任一项所述的生物反应器，其中，容器包括烧瓶或瓶。9.如前述权利要求中任一项所述的生物反应器，其中，第一分离表面通过纳米结构化纤维素表面形成。10.如前述权利要求中任一项所述的生物反应器，其中，纳米结构化纤维素是分离实体形式的，例如水凝胶珠和/或多孔珠。11.如前述权利要求中任一项所述的生物反应器，其中，纳米结构化纤维素包括纳米原纤维纤维素，所述纳米原纤维纤维素包括数均直径为200nm或更小的纤维素原纤维和/或原纤维束；和/或其中，当纳米原纤维纤维素分散在水中时，其提供了在22
±
1℃的水性介质中、在0.5重量％的稠度下通过旋转流变仪测定的1
‑
50Pa、如2
‑
15Pa的屈服应力和100
‑
50000Pa
·
s、如300
‑
8000Pa
·
s的零剪切粘度。12.如权利要求11所述的生物反应器，其中，纳米原纤维纤维素是化学改性的纳米原纤维纤维素，例如，阴离子改性的纳米原纤维纤维素或阳离子改性的纳米原纤维纤维素。13.如权利要求11所述的生物反应器，其中，纳米原纤维纤维素是未化学改性的纳米原纤维纤维素，优选还是未酶促改性的纳米原纤维纤维素。14.如权利要求11至13中任一项所述的生物反应器，其中，纳米原纤维纤维素包括数均
直径为2至50nm、如2至20nm的纤维素原纤维和/或原纤维束；其中当纳米原纤维纤维素分散于水中时，其提供了在22
±
1℃的水性介质中、在0.5重量％的稠度下、通过旋转流变仪测得的1
‑
50Pa、如2
‑
15Pa的屈服应力，优选地，其中，纳米原纤维纤维素是未化学改性的纳米原纤维纤维素。15.如权利要求1至10中任一项所述的生物反应器，其中，纳米结构化纤维素包括数均原纤维直径为2至40nm、如2至20nm且数均原纤维长度为100nm或更大、如100至400nm的纳米晶体纤维素。16.如前述权利要求中任一项所述的生物反应器，其中，纳米结构化纤维素的中值孔尺寸为0.1
‑
10μm2，例如，0.3
‑
2.0μm2。17.如前述权利要求中任一项所述的生物反...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：芬欧汇川集团，
类型：发明
国别省市：