红藻凝集素制造技术

本发明专利技术属于药物制备技术领域，涉及红藻凝集素

【技术实现步骤摘要】
红藻凝集素G在制备抑制克里米亚
‑
刚果出血热病毒感染药物中的用途


[0001]本专利技术属于药物制备
，涉及红藻凝集素
G
在制备抑制克里米亚
‑
刚果出血热病毒感染药物中的用途
。

技术介绍

[0002]克里米亚
‑
刚果出血热病毒
(Crimean
‑
Congo hemorrhagic fever virus
，
CCHFV)
属于布尼亚病毒目
(Bunyavirales)、
内罗病毒科
(Nairoviridae)
，正内罗病毒属
(Orthonairovirus)
，为单股负链
RNA
有包膜病毒，基因组分
S、M、L
三个节段，分别编码核衣壳蛋白
NP
，包膜糖蛋白前体
GPC
以及
RNA
依赖的
RNA
聚合酶
RdRP。CCHFV
感染人可引起克里米亚
‑
刚果出血热
(Crimean
‑
Congo hemorrhagic fever
，
CCHF)
，广泛分布于非洲
、
欧洲
、
亚洲
。
由于
CCHFV
的安全等级高，通常要求生物安全等级3级或4级
(BSL
‑3，<br/>BSL
‑
4)
才可进行活病毒的操作研究，因此需要使用能够在低等级生物安全条件下操作，同时能完全替代活病毒进行药物筛选的替代物
。
[0003]转录
‑
复制样病毒样颗粒
(transcription and entry
‑
competent virus
‑
like particle
，
tecVLP)
系统是通过将携带如
NanoLuc
荧光素酶报告基因的
CCHFV
微基因组质粒
(minigenome plasmid)
和表达
CCHFV
结构蛋白
LP、NP
和
GPC
的辅助质粒
(helper plasmid)
共同转染细胞收获上清获得
。
获得的
CCHFV tecVLP
可以模拟
CCHFV
感染细胞，同时转录表达出报告基因，但因
tecVLP
单独不能完成病毒的复制组装，因此仅能感染细胞一次，安全性很高
。
同时
tecVLP
是完全模拟了
CCHFV
的病毒样颗粒，细胞嗜性
、
感染特性均与
CCHFV
活病毒一致，因此能够替代活病毒进行
CCHFV
药物的筛选评价
。
[0004]目前，尚无批准上市的可以有效治疗
CCHF
的药物
。
因此，仍迫切需要开发新型抗
CCHFV
的药物
。

技术实现思路

[0005]为了获得抑制克里米亚
‑
刚果出血热病毒感染的药物，本专利技术提供了红藻凝集素
G(Griffithsin
，
GRFT)
在制备抑制克里米亚
‑
刚果出血热病毒感染药物中的用途，所述红藻凝集素
G
对基于
CCHFV
的
tecVLP
存在抑制作用，红藻凝集素
G
可以结合病毒表面糖基化位点从而抑制病毒入胞
。
[0006]本专利技术提供了红藻凝集素
G
在制备克里米亚
‑
刚果出血热病毒感染药物中的用途
。
[0007]进一步地，所述的红藻凝集素
G
能够用于制备抑制
CCHFV tecVLP
病毒的药物
。
[0008]进一步地，所述的红藻凝集素
G
能够结合病毒表面糖基化位点从而抑制病毒进入细胞
。
[0009]进一步地，所述细胞为
Huh7
细胞
。
[0010]进一步地，所述的红藻凝集素
G
在
0.01
‑
1000ng/mL
浓度对细胞无毒
。
[0011]进一步地，所述的红藻凝集素
G
对
CCHFV tecVLP
表现出剂量依赖性的抑制作用，其
tecVLP
感染
Huh7
细胞后
NanoLuc
相对光单位
(RLU)
检测值；
[0031]B
为
0mM、50mM
和
100mM
甘露糖预处理对
100ng/mL
红藻凝集素
G
影响
CCHFV tecVLP
感染
Huh7
细胞的相对抑制率的分析结果；
[0032]C
为
0mM、50mM
和
100mM
甘露糖预处理对
1000ng/mL
红藻凝集素
G
影响
CCHFV tecVLP
感染
Huh7
细胞后
NanoLuc
相对光单位
(RLU)
检测值；
[0033]D
为
0mM、50mM
和
100mM
甘露糖预处理对
1000ng/mL
红藻凝集素
G
影响
CCHFV tecVLP
感染
Huh7
细胞的相对抑制率的分析结果
。
具体实施方式
[0034]下面结合附图和具体实施例对本专利技术进行详细说明，但不应理解为本专利技术的限制
。
如未特殊说明，下述实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，下述实施例中所用的材料
、
试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到
。
[0035]实施例1[0036]本实施例提供了红藻凝集素
G(GRFT)
在制备抑制克里米亚
‑
刚果出血热病毒感染药物中的用途，
GRFT
是从海洋红藻中提取出来的凝集素，且可通过各种蛋白表达系统表达
(GRFT
由复旦大学惠赠
)。
[0037]通过测定
GRFT
对细胞的毒性，选定对细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
红藻凝集素
G
在制备抑制克里米亚
‑
刚果出血热病毒感染药物中的用途
。2.
根据权利要求1所述的红藻凝集素
G
在制备抑制克里米亚
‑
刚果出血热病毒感染药物中的用途，其特征在于，所述的红藻凝集素
G
能够用于制备抑制
CCHFV tecVLP
的药物
。3.
根据权利要求2所述的红藻凝集素
G
在制备抑制克里米亚
‑
刚果出血热病毒感染药物中的用途，其特征在于，所述的红藻凝集素
G
能够结合病毒表面糖基化位点从而抑制病毒进入细胞
。4.
根据权利要求3所述的红藻凝集素
G
在制备抑制克里米亚
‑
刚果出血热病毒感染药物中的用途，其特征在于，所述细胞为
Huh7
细胞
。5.
根据权利要求4所述的红藻凝集素
G
在制备抑制克里米亚
‑
刚果出血热病毒感染药物中的用途，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶伟，张芳琳，甘心茹，靳晓磊，程林峰，党亚美，王媛，张惠，
申请(专利权)人：中国人民解放军空军军医大学，
类型：发明
国别省市：