虎耳草水提取物在制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种虎耳草水提取物在制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒药物中的应用，涉及抗病毒治疗技术领域；本发明专利技术将虎耳草水提取物应用到抗猪繁殖与呼吸综合征病毒药物中，对细胞毒副作用小并具有良好抗PRRSV活性，为PRRS防控开拓新的应用前景。防控开拓新的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
虎耳草水提取物在制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒药物中的应用


[0001]本专利技术涉及抗病毒治疗
，具体涉及一种虎耳草水提取物在制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒药物中的应用。

技术介绍

[0002]猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是一种引起母猪流产，断奶仔猪高热、间质性肺炎和生长迟缓为特征的高度传染性疾病。由于PRRS患病猪群表现出典型的耳朵发绀的临床症状，因此，该疾病俗称“蓝耳病”。目前，我国的PRRS防控策略仍然以疫苗免疫为主。至今，我国临床中使用的PRRS商品化疫苗分为2种：灭活苗(KV)和弱毒活疫苗(MLV)。KV疫苗分别以我国C
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PRRSV CH
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1a和HP
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PRRSV JXA1为亲本株灭活后制成。MLV疫苗则通过连续细胞传代的方法致弱病毒，主要有7种：IngelvacPRRSVMLV(亲本株VR
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2332)、CH
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1R(CH
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1a)、R98(R98)、和GDr180(GD)。自2011年，我国以HP
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PRRSV为亲本株的数种弱毒活疫苗(MLV)作为商品化疫苗开始在临床中广泛使用，这些MLV在临床中能对同源毒株能提供良好的免疫保护效果，减少了HP
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PRRS的暴发，为我国预防和控制该病的发生发挥了巨大作用。然而，随着我国大面积长期、大量使用和不合理使用MLV疫苗，加上PRRSV毒株具有易变异和抗体依赖性增强(ADE)的特点，不仅增加了猪群体内的免疫选择压力，而且还促使病毒开始发生遗传变异和进化。目前，MLV疫苗在临床中主要存在4个方面问题：(1)交叉保护性差。MLV在临床中对同源毒株能提供较好的保护力，而对异源毒株却不能提供良好交叉保护效果；(2)毒力反强。MLV长期使用或用于PRRS阴性场，会出现毒力反强的可能，反而引起PRRS暴发；(3)遗传重组。临床毒株分离监测显示，我国临床中出现了大量野毒株和MLV间的重组毒株，特别是NADC30
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like毒株和QYYZ
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like毒株的出现；(4)垂直传播。接种MLV疫苗的母猪能将病毒传染给初生仔猪，可能引起仔猪出现PRRS临床症状。
[0003]近年来，除了病毒疫苗的研发外，抗病毒药物的研究也在突飞猛进的发展，为临床中预防和治疗病毒性疾病发挥了巨大作用。传统中药(Traditional Chinese medicines，TCM)在我国使用历史悠久，资源丰富，并且这些药物具有长期的临床试验和可靠的疗效，因此被认为是研发新型抗病毒药物的来源。早在1969年，我国科研学者屠呦呦团队就开始尝试从中药中提取抗疟疾药物，直到2015年，屠呦呦因从中药中提取的青蒿素(C
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O5)具有良好抗疟疾的重要作用而获得诺贝尔奖，我国的中药研发再次受到广泛关注。目前，有关TCM的研究在国内外日益增多，已有很多研究发现TCM具有广谱的抗病毒作用，从中筛选出有效抗病毒成分成为研发抗病毒药物的一个新方向。然而，目前抗人源病毒药物的研究较多，而针对抗动物病毒药物研发相对较少。
[0004]PRRS是一种猪免疫抑制性疾病，给世界养猪业造成了极大的经济损失。目前，关于抗PRRSV化学合成物、PRRSV入胞阻断剂和纳米抗体(Nanobodies)的研究逐渐增多，但是这些研究尚停留在实验室研究或临床试验阶段。由于当前商品化MLV疫苗的有限保护性和
PRRSV变异毒株的频繁出现，仅靠MLV疫苗不能提供完全有效的保护效力。因此，研发有效、经济和实用的抗PRRSV药物为我国PRRS防控具有重要意义。目前，基于我国传统中药的草药学已被广泛用作新药研发的来源，许多中草药提取物已被证明可抑制PRRSV感染，例如中药中具有清热解毒功效的金银花、黄芩、连翅等药物和有解表功效的桂枝、麻黄、柴胡等药物。2013年，Cheng等从中药中分离出17种被证明具有多种药理活性的化合物，如抗病毒，抗炎和免疫调节，基于Marc
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145细胞体外评估其抗PRRSV活性，结果显示绿原酸(Chlorogenic Acid)和野黄芩素(Scutellarin)具有潜在的抗PRRSV活性，其抗病毒机制可能是药物直接灭活或干扰了病毒的早期复制阶段。丹参酮IIA是丹参根中最丰富的成分之一，Sun等(2014)证实丹参酮IIA可以通过抑制病毒N基因表达和阻断病毒诱导的细胞凋亡来抑制PRRSV。在茶叶中富含的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)也被证实在MARC
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145细胞中可以抑制PRRSV复制。苦参碱(C
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N2O)是从苦参中分离提纯的药物成分，经研究证实，苦参碱不仅对乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)均具有明显的抑制作用，而且还有増强机体免疫调节的药理学作用。2016年，Sun从苦参根部提取出苦参碱，PAM细胞体外研究发现，苦参碱不仅具有体外抗PRRSV活性，还能同时对PCV2的感染也具有抑制作用，其抗病毒机制与抑制TLR3、4/NF
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4/NF
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κB/TNF
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α通路表达有关。有研究还发现，这些药物的抗PRRSV活性具有非特异性，能同时抑制不同病毒或同一种病毒不同株系的复制。此外，这些有效药物成分不仅具有抗病毒作用，还对机体有增强免疫能力的作用，因此，对抗PRRSV药物进一步研究和开发，将为PRRS防控开拓新的应用前景。

技术实现思路

[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术的目的是提供一种虎耳草水提取物在制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒药物中的应用，对细胞毒副作用小并具有良好抗PRRSV活性，为PRRS防控开拓新的应用前景。
[0006]本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：提供一种虎耳草水提取物在制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒药物中的应用。
[0007]进一步，虎耳草水提取物通过以下方法制备得到：
[0008]将虎耳草粉末用滤纸包裹后放入索氏抽提器中，加入虎耳草粉末10质量倍的中性去离子水提取4
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6h，回收水提取物后在37℃水浴浓缩并定容，得虎耳草水提取物。
[0009]进一步，定容后浓缩液中，虎耳草浓度为4
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6g/mL。
[0010]进一步，定容后浓缩液中，虎耳草浓度为5g/mL。
[0011]一种抗猪繁殖与呼吸综合征病毒药物，包括上述虎耳草水提取物。
[0012]本专利技术具有以下有益效果：
[0013]1、本专利技术将虎耳草水提取物应用到制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒药物中，对细胞毒副作用小并具有良好抗PRRSV活性，为PRRS防控开拓新的应用前景。
[0014]2、使用原代PAM细胞建立抗PRRSV药物评价体系，对虎耳草水提取物用于抗PRRSV活性评价，结果本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.虎耳草水提取物在制备抗猪繁殖与呼吸综合征病毒药物中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述虎耳草水提取物通过以下方法制备得到：将虎耳草粉末用滤纸包裹后放入索氏抽提器中，加入虎耳草粉末10质量倍的中性去离子水提取4
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6h，回收水提取物后在37℃水浴浓缩并定容，得虎耳...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨丹娇，周泷，叶忠明，张敏，吴建平，蓝岚，刘怡雯，潘瑶，何宗伟，
申请(专利权)人：甘孜藏族自治州畜牧业科学研究所，
类型：发明
国别省市：