一种抑制原头蚴的鸦胆子黄酮粗提物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种抑制原头蚴的鸦胆子黄酮粗提物及其应用，涉及兽药创制与创新技术领域，其技术方案要点是：对药物进行水提，将药物水提物在体外培养原头蚴，通过对原头蚴死亡计数与形态变化选出对原头蚴具有明显抑制作用的草药，然后对草药进行活性成分黄酮、多糖、皂苷、生物碱粗提物的提取，在体外分别作用原头蚴，选出具有明显抑制效果的活性成分。其中鸦胆子黄酮粗提物对原头蚴的体外抑制率大于90％，且在适量的浓度范围内安全性高，能够为制备治疗动物包虫病的药物提供物质基础。制备治疗动物包虫病的药物提供物质基础。制备治疗动物包虫病的药物提供物质基础。

【技术实现步骤摘要】
一种抑制原头蚴的鸦胆子黄酮粗提物及其应用


[0001]本专利技术涉及兽药创制与创新
，更具体地说，它涉及一种抑制原头蚴的鸦胆子黄酮粗提物及其应用。

技术介绍

[0002]包虫病又称棘球蚴病，是由原头蚴寄生宿主引起的一种严重的人畜共患寄生虫病，分布于全球。终末宿主啮齿动物是细粒棘球蚴的主要来源，也是原头蚴传播的主要来源之一。作为细粒棘球绦虫终末宿主的犬，是包虫病传播的主要来源之一。目前有五个公认的独立物种，但主要的感染类型是细粒棘球蚴(Echinococcusgranulosus,Eg)和多房棘球蚴(Em)，它们会导致囊型棘球蚴病(Cystic echinococcosis,CE)和泡型棘球蚴症(AE)。尤其是细粒棘球蚴引起的囊型棘球蚴病最为常见，占包虫病的90％以上。据统计每年手术治疗人类CE可以达到2000多例，年感染动物约3000万只，新增感染动物700多万只，年经济损失近10亿元，受威胁人口为6600万。据国内近年普查结果显示:民众的患病率在0.6％至4.5％之间，绵羊感染率在3.3％至90％之间，犬绦虫的感染率在70％至71％，成为目前倍受关注的严重公共卫生问题。
[0003]贾丹兵等人发现槟榔承气汤对绦虫头节不仅有神经麻痹作用，对它的组织细胞也有明显损伤作用。袁庆等人研究发现，在治疗CE时，中医经常使用香榧、石榴根、大麻子、芜荑、吴茱萸根、桑根白皮和槟榔。现如今通过进一步证实，狼牙草的根、芽末或其提取物(Agrimoniapilosa)对绦虫具有积极的驱虫作用。有学者发现骆驼蓬、砂生槐、青蒿提取物青蒿琥酯(Art)、消包粉(露蜂房、雷丸、瓜萎、党参、白术、蝉蜕、槟榔、海藻、补骨脂、黄芪和使君子等)、乌雷合剂(乌药、雷丸、南瓜子、槟榔、牛尾草)、汉防己甲素(tetrandrine，Tet)等传统药物对原头蚴有一定的疗效。但是多数中草药物多是浓度在高浓度下才有高效，但在高浓度下部分是有神经或者肝肾毒性的，尚未达到低浓高效的程度。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种抑制原头蚴的鸦胆子黄酮粗提物及其应用，鸦胆子黄酮粗提物对原头蚴的体外抑制率大于90％，为制备治疗动物包虫病的药物提供物质基础。
[0005]本专利技术的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：一种抑制原头蚴的鸦胆子黄酮粗提物，所述鸦胆子黄酮粗提物体外抗原头蚴浓度为0.53905mg/mL，通过药物安全性检测，发现在合适剂量内鸦胆子黄酮粗提物剂量对于小鼠较安全，其LD
50
为32.188mg/kg。
[0006]本专利技术还提供一种抑制原头蚴的鸦胆子黄酮粗提物的应用，所述鸦胆子黄酮粗提物可用于制备治疗动物包虫病的药物。
[0007]本专利技术对已知的12种抗寄生虫中草药水提物进行体外抗原头蚴活性筛选，通过体外抗原头蚴筛选发现了四种抗细粒棘球蚴中草药，分别是鸦胆子、驱虫斑鸠菊、苦楝皮、辣蓼。
[0008]其中鸦胆子黄酮粗提物的制备方法如下：
[0009](1)称取20g鸦胆子，用粉碎机粉碎成粉末状以65％乙醇超声提取，将其以量液比1:20侵泡2h后于50℃、195kw超声60min，结束后过滤液体，收集滤液；
[0010](2)在50℃、195kw再次超声30min，过滤液体，收集滤液；
[0011](3)重复步骤(2)一遍；
[0012](4)合并三次滤液并抽滤，旋转蒸发浓缩至100mL，冻干备用。
[0013]进一步，鸦胆子黄酮粗提物提取率能达到107.81mg/g。
[0014]进一步，驱虫斑鸠菊、辣蓼黄酮粗提物的提取方法与鸦胆子黄酮粗提物的提取方法一致。
[0015]苦楝皮则有所不同，其步骤如下：
[0016](1)称取20g苦楝皮，用粉碎机粉碎成粉末状以65％乙醇超声提取，将其以量液比1:10侵泡2h后于60℃、195kw超声60min，结束后过滤液体，收集滤液；
[0017](2)在60℃、195kw再次超声30min，过滤液体，收集滤液；
[0018](3)重复步骤(2)一遍；
[0019](4)合并三次滤液并抽滤，旋转蒸发浓缩至100mL，冻干备用。
[0020]鸦胆子多糖粗提物的提取步骤如下：
[0021]称取20g鸦胆子浸泡2h，侵泡结束后转入至电动中药锅中，加入8倍体积蒸馏水进行煎煮，共煎煮三次，将三次煎成的药液合并用纱布过滤离心，再抽滤一次，浓缩至100mL，加入95％乙醇静置24h，过滤沉淀，在沉淀中继续加入95％乙醇静置4h离心，将沉淀用纯净水冲刷装入平皿冻干备用。
[0022]进一步，驱虫斑鸠菊、苦楝皮、辣蓼多糖粗提物的提取步骤与鸦胆子一致。
[0023]鸦胆子皂苷粗提物的提取步骤如下：
[0024]称取鸦胆子20g，用粉碎机粉碎成粉末状，量液比1:15加入60％乙醇，40℃、195kw下超声90min，再过滤收集滤液，重复三次，合并三次滤液，抽滤一次，旋转蒸发挥去乙醇浓缩至50mL。分别加入一倍的水饱合正丁醇进行萃取，收集正丁醇部分，挥去正丁醇后得到皂苷粗提物。
[0025]进一步，苦楝皮、驱虫斑鸠菊、辣蓼皂苷粗提物的提取步骤与鸦胆子一致。
[0026]鸦胆子生物碱粗提物的提取步骤如下：
[0027]称取鸦胆子20g，用粉碎机粉碎成粉末状，量液比1:20加入80％乙醇，50℃、195kw下超声50min，收集滤液，重复三次，合并三次滤液，将滤液进行抽滤。旋转蒸发浓缩至50mL，加入1％稀盐酸进行酸化，离心收集上清，在上清中加入NaCO3进行碱化处理，离心收集生物碱沉淀。
[0028]进一步，苦楝皮、驱虫斑鸠菊、辣蓼生物碱粗提物的提取步骤与鸦胆子一致。
[0029]将上述提取的粗提物进行体外抗原头蚴筛选，选出鸦胆子黄酮、鸦胆子皂苷、苦楝皮黄酮、驱虫斑鸠菊生物碱、辣蓼皂苷五种中草药活性成分。优选出体外的抗原头蚴浓度分别为0.53905mg/mL、0.7126mg/mL、2.7737mg/mL和0.5825mg/mL,并且抑制率都大于80％，其中鸦胆子黄酮的抑制率能达到90％。
[0030]综上所述，本专利技术具有以下有益效果：
[0031](1)在体外抗原头蚴方面上，相较于现有技术中常使用的阿苯达唑，鸦胆子黄酮对原头蚴的抑制率明显更高，且其抑制率大于90％。
[0032](2)鸦胆子黄酮粗提物提取率高，提取率为107.81mg/g。
[0033](3)本专利技术提供了鸦胆子黄酮的一种新用途，将其应用于制备治疗动物包虫病的药物，在此之前从未有过相关报道。
附图说明
[0034]图1是本专利技术实施例1中天然药物水提物在同一时间不同浓度对原头蚴的抑制效果；
[0035]图2是本专利技术实施例1中天然药物水提物在同一浓度不同时间对原头蚴的抑制效果；
[0036]图3是本专利技术实施例2中各药物黄酮粗提物对原头蚴活性的作用；
[0037]图4是本专利技术实施例2中各药物多糖粗提本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抑制原头蚴的鸦胆子黄酮粗提物，其特征是：所述鸦胆子黄酮粗提物体外抗原头蚴浓度为0.53905mg/mL，所述鸦胆子黄酮粗提物的LD
50
为32.188mg/kg。2.根据权利要求1所述的一种抑制原头蚴的鸦胆子黄酮粗提物的应用，其特征是：所述鸦胆子黄酮粗提物可用于制备治疗动物包虫病的药物。3.根据权利要求1所述的一种抑制原头蚴的...

【专利技术属性】
技术研发人员：翟少华，加依娜尔，
申请(专利权)人：新疆农业大学，
类型：发明
国别省市：