【技术实现步骤摘要】
一种基于谱图合并策略的蛋白质组鉴定新方法
[0001]本专利技术涉及生物信息学领域,具体涉及一种基于谱图合并策略的蛋白质组鉴定新方法。
技术介绍
[0002]生物体的任一器官、组织,以及人工培养的细胞株都是由一系列不同的细胞组成的,这些细胞的不同表现在具体分子组成以及功能上的不同。探索及发现细胞异质性对于理解机体的正常生理状态和疾病的发生发展过程来说是至关重要的。作为细胞功能的分子承担者,蛋白质组是我们探究细胞异质性的最有力手段。然而现有的常量蛋白质组分析基于的是大量细胞的平均测量值,无法真正探究细胞异质性,只有单细胞蛋白质组技术才能被用于回答这个问题。然而,由于单个哺乳动物细胞中全蛋白质的含量通常低于0.4ng,而蛋白质不能像DNA、RNA那样被扩增,因此需要极高灵敏度的技术才能分析单细胞的完整蛋白质组。而现有的主流蛋白质组分析仪器——质谱(Mass spectrometer,MS)的灵敏度仍受限,因此想要完整地分析一个细胞的蛋白质组仍是巨大的挑战。
[0003]目前最广为用于提高单细胞蛋白质组分析灵敏度的途径主要有两方面,一是在生物样品前处理上尽可能减少损失,即通过一系列手段减少样品蛋白和肽段由于转移、除盐等操作引入的吸附损失,同时提高酶切效率,获得尽可能多的可用于鉴定的肽段;二是从分析仪器出发,提高LC
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MS/MS的分析灵敏度,使仪器对肽段及其碎片离子的响应更强。第一种手段相对易行一些,因为研究者即使无法开发或获得自动化的单细胞前处理机器,也可通过多种手段尽可能减少细胞蛋白前处理过程 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.单细胞或微量细胞蛋白质组分析的装置,其特征在于:所述装置包括如下模块:A1)谱图数据首次搜库鉴定模块:用于将待测单细胞或微量细胞样本的技术学重复谱图数据在搜库软件中进行首次搜库获得首次鉴定肽谱匹配;所述技术学重复次数大于等于2;A2)未鉴定谱图提取模块:用于提取所述技术学重复谱图数据中未被所述首次搜库鉴定到肽段的谱图,得到未鉴定谱图数据;A3)未鉴定谱图匹配模块:用于将所述未鉴定谱图数据基于母离子质量、电荷及保留时间在不同的所述技术学重复质谱数据间进行匹配,得到匹配文件;所述匹配文件中包含匹配在一起的未鉴定谱图;A4)未鉴定谱图合并模块:用于将所述匹配文件中所述匹配在一起的未鉴定谱图进行合并,得到新谱图数据;A5)再次搜库解析模块:用于将所述新谱图数据使用搜库软件再次搜库鉴定多肽,得到新鉴定肽谱匹配;A6)蛋白质组分析结果输出模块:用于基于所述首次鉴定肽谱匹配和所述新鉴定肽谱匹配,输出所述待测单细胞或微量细胞蛋白质组分析结果。2.根据权利要求1所述的装置,其特征在于:所述谱图数据包括色谱数据和质谱数据,A3)所述匹配在一起的未鉴定谱图的母离子的保留时间差值小于等于1min且母离子质量差小于等于10ppm。3.根据权利要求1或2所述的装置,其特征在于:所述装置为装置1或装置2,所述装置1中,A4)所述未鉴定谱图合并模块包括如下模块:A4
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1)格式转换模块:用于将所述匹配文件中的所述未鉴定谱图转换为MASCOT通用格式文件,得到mgf格式匹配文件;A4
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2)合并模块:用于将所述mgf格式匹配文件中的所述匹配在一起的未鉴定谱图进行合并,得到新谱图数据文件;所述装置2中,A4)所述未鉴定谱图合并模块包括如下模块:preA4
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1)搜库模块:用于将所述匹配文件中所述匹配在一起的未鉴定谱图使用所述再次搜库所用的搜库软件进行搜库得到匹配文件鉴定肽谱匹配,A4
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1)格式转换模块:用于将所述匹配文件中的所述未鉴定谱图转换为MASCOT通用格式文件,得到mgf格式匹配文件,A4
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2)合并模块:用于将所述mgf格式匹配文件中的所述匹配在一起的未鉴定谱图进行合并,得到新谱图数据文件,A6)所述蛋白质组分析结果输出模块还包括用于将所述蛋白质组分析结果中去除所述匹配文件鉴定肽谱匹配的模块。4.根据权利要求1
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3中任一权利要求所述的装置,其特征在于:A5)所述再次搜库解析模块通过包括如下步骤的方法实现:将所述新谱图数据中添加部分所述技术学重复谱图数据得到添加新谱图数据,将所述添加新谱图数据使用搜库软件再次搜库鉴定多肽,得到新鉴定肽谱匹配。5.单细胞或微量细胞蛋白质组分析的方法,其特征在于:所述方法包括如下步骤:B1)谱图数据首次搜库鉴定:将待测单细胞或微量细胞样本的技术学重复谱图数据在
搜库软件中进行首次搜库获得首次鉴定肽谱...
【专利技术属性】
技术研发人员:秦伟捷,陈永乐,杜卓锟,张养军,
申请(专利权)人:中国人民解放军军事科学院军事医学研究院,
类型:发明
国别省市:
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