一种包载核酸的金属有机框架纳米粒及其制备方法与应用技术

本发明专利技术提供了一种包载核酸的金属有机框架纳米粒及其制备方法与应用，该金属有机框架为包载促胞葬功能核酸

【技术实现步骤摘要】
一种包载核酸的金属有机框架纳米粒及其制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及纳米材料和纳米生物医药领域，具体涉及一种包载核酸的金属有机框架纳米粒及其制备方法与应用
。

技术介绍

[0002]动脉粥样硬化
(Atherosclerosis,AS)
是多种心血管疾病的主要诱因，而斑块的形成是
AS
的病理基础
。
现有的
AS
治疗药物以降脂治疗为主，仅能减少血浆中的脂质，延缓斑块的形成，对已形成的斑块清除能力弱
。
斑块的清除目前主要依赖外科手术，但治疗费用昂贵
、
常有术后并发症及术后复发的风险，且对特定斑块的清除存在手术难度大的问题，这都导致其临床应用效果欠佳
。
因此，临床急需能有效清除
AS
斑块的药物治疗手段
。
[0003]恢复巨噬细胞的胞葬作用是清除
AS
斑块的关键，大量研究聚焦于通过阻断
CD47
的“don't eat me”信号来实现，但不可避免的导致贫血等副作用
。
寡核苷酸
CpG
可协助巨噬细胞避开
CD47
介导的抗胞葬通路，恢复其对斑块中凋亡细胞的吞噬功能
。
然而，胞葬作用的恢复，仅仅是斑块清除的第一步，若吞噬的脂质斑块未能及时消化
、
降解并排出，可能导致更多的泡沫细胞形成，增加斑块负担
。
[0004]此外，
CpG ODN 1826
作为核酸分子，其在应用中存在因核酶降解导致半衰期短的问题，且由于其带负电较难进入细胞，因此常常需要载体对其进行有效递送以发挥作用
。
传统的核酸类药物递送载体主要包括阳离子聚合物和脂质体等，但这类载体经系统给药后易与带负电荷的血液成分相互作用，导致载体结构重组
、
聚集或解离，使核酸药物提前释放被降解，同时也会产生急性毒性
。
因此，开发一种具有自身活性的高效低毒药物载体，在递送
CpG ODN 1826
以促胞葬的同时，还能接力斑块清除的后续步骤，促进脂质的降解和排出，最终清除斑块以实现
AS
治疗，具有重要临床意义
。

技术实现思路

[0005]为解决上述技术问题，本专利技术通过
Zn
2+
与表没食子儿茶素没食子酸酯
(EGCG)
的配位作用，构建递送促胞葬功能核酸
CpG ODN 1826
的纳米金属有机框架
(EZC)。
在该结构中，
CpG ODN 1826
通过促胞葬作用，促进巨噬细胞对斑块凋亡细胞的摄取；
Zn
2+
激活细胞自噬，将胞内的脂质负担降解为游离胆固醇；而
EGCG
上调
ABCA1
转运蛋白，使游离胆固醇外排出细胞；三者协同，激活“胞葬
‑
降解
‑
外排”通路，实现斑块脂质清除，为
AS
斑块的清除提供一种高效低毒的非手术策略
。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术首先提出一种包载核酸的金属有机框架纳米粒，包括核酸
CpG ODN 1826
和金属有机框架
EGCG/Zn2+MOF
，所述
EGCG/Zn2+MOF
由
EGCG
和
Zn2+
在缓冲液中经搅拌自组装而成，所述核酸
CpG ODN 18
被包载在
EGCG/Zn2+MOF
中形成包载核酸的金属有机框架
EGCG/Zn
2+
/CpG
纳米粒
。。
[0007]作为优选，所述核酸
CpG ODN 18
序列如
SEQ ID NO.1
所示
。
[0008]作为优选，所述
EGCG/Zn
2+
/CpG
纳米粒呈球形
。
[0009]作为优选，所述
EGCG、Zn
2+
、CpG ODN 18
的摩尔比为
500
：
500
：
1。
[0010]基于一个总的专利技术构思，本专利技术提出一种包载核酸的金属有机框架纳米粒的制备方法，包括以下步骤：
[0011]S1、
将
EGCG
溶于丙酮中得到
EGCG
母液，
PLGA
溶于丙酮中得到
PLGA
溶液；再将
EGCG
母液与
PLGA
溶液混合得到有机相溶液；
[0012]S2、
将
Hepes
缓冲液依次与
Zn
2+
、CpG ODN 1826
混合得到混合溶液，在混合溶液体系中边水浴超声边滴加步骤
S1
制得的有机相溶液，加入后继续水浴超声；
[0013]S3、
将步骤
S2
制得的体系在水浴避光搅拌以挥发丙酮，再通过离心得到本专利技术包载
CpG ODN 1826
的金属有机框架
EGCG/Zn
2+
/CpG
纳米粒
。
[0014]作为优选，所述
PLGA
溶液浓度为
20mg/mL。
[0015]作为优选，所述
S1
步骤中
EGCG
母液与
PLGA
溶液体积比为1：
1。
[0016]作为优选，所述
S2
步骤中
Hepes
缓冲液
pH
＝
7.4。
[0017]作为优选，所述
S2
步骤中水浴温度为
30℃
，超声时间为
5min。
[0018]作为优选，所述
S2
步骤中
Hepes
缓冲液的浓度为
10mM。
[0019]作为优选，所述
S3
步骤中水浴温度为
30℃
，搅拌时间为
3h
；离心转速为
16000rpm
，离心时间为
10min。
[0020]基于一个总的专利技术构思，本专利技术还提出一种包载核酸的金属有机框架纳米粒在制备治疗动脉粥样硬化药物中的应用
。
[0021]本专利技术
EGCG/Zn
2+
/CpG
纳米粒可制备治疗动脉粥样硬化药物的机理为：
[0022]通过
Zn
2+
与表没食子儿茶素没食子酸酯本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种包载核酸的金属有机框架纳米粒，其特征在于，包括核酸
CpGODN1826
和金属有机框架
EGCG/Zn
2+
MOF
，所述
EGCG/Zn
2+
MOF
由
EGCG
和
Zn
2+
在缓冲液中经搅拌自组装而成，所述核酸
CpGODN18
被包载在
EGCG/Zn
2+
MOF
中形成包载核酸的金属有机框架
EGCG/Zn
2+
/CpG
纳米粒
。2.
根据权利要求1所述的一种包载核酸的金属有机框架纳米粒，其特征在于，所述核酸
CpGODN18
序列如
SEQ ID NO.1
所示
。3.
根据权利要求1所述的一种包载核酸的金属有机框架纳米粒，其特征在于，所述
EGCG/Zn
2+
/CpG
纳米粒呈球形
。4.
根据权利要求1所述的一种包载核酸的金属有机框架纳米粒，其特征在于，所述
EGCG、Zn
2+
、CpGODN18
的摩尔比为
500
：
500
：
1。5.
一种如权利要求1‑4任一项所述的包载核酸的金属有机框架纳米粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、
将
EGCG
溶于丙酮中得到
EGCG
母液，
PLGA
溶于丙酮中得到
PLGA
溶液；再将
EGCG
...

【专利技术属性】
技术研发人员：阳国平，周文虎，唐翠，
申请(专利权)人：中南大学，
类型：发明
国别省市：