一种用于分离肿瘤浸润淋巴细胞的装置制造方法及图纸

本实用新型专利技术涉及细胞提取技术领域，具体涉及一种用于分离肿瘤浸润淋巴细胞的装置，包括酶消化解离模块、细胞培养模块和分离纯化模块，酶消化解离模块通过过滤模块与细胞培养模块连接，细胞混合物在模块间通过蠕动泵提供动力进行转移，酶消化解离模块包括解离瓶和设置在解离瓶底部的加热振荡器，细胞培养模块包括细胞培养箱和设置在细胞培养箱内的细胞培养袋，分离纯化模块包括收集管路和连接在收集管路上的细胞提纯单元和冻存管，本实用新型专利技术能够实现从肿瘤组织块的消化分离到TIL细胞的培养、分离纯化和冻存的连续操作，细胞成活率高，培养周期短，提高了TIL细胞分离提纯的效率，有利于TIL细胞的应用和标准化开发。利于TIL细胞的应用和标准化开发。利于TIL细胞的应用和标准化开发。

【技术实现步骤摘要】
一种用于分离肿瘤浸润淋巴细胞的装置


[0001]本技术涉及细胞提取
，特别涉及一种用于分离肿瘤浸润淋巴细胞的装置。

技术介绍

[0002]肿瘤浸润淋巴细胞疗法(TIL疗法)是从肿瘤附近组织中分离出TIL细胞，加入生长因子IL
‑
2进行体外大量扩增，再回输到患者体内，从而扩大免疫应答，治疗原发或继发肿瘤的方法。
[0003]现有技术中，大多通过用机械处理和酶消化方法，从肿瘤局部分离出TIL细胞，再通过加入高剂量白细胞介素
‑
2(IL
‑
2)对TIL细胞进行体外培养，残存的肿瘤细胞7
‑
13天全部死亡。分离成功率低，培养周期过长，大大限制了TIL细胞的应用和标准化开发。
[0004]因此，本技术提供一种用于分离肿瘤浸润淋巴细胞的装置以解决现有技术中存在的问题。

技术实现思路

[0005]本技术目的是：提供一种用于分离肿瘤浸润淋巴细胞的装置，以解决现有技术中从肿瘤组织中分离培养TIL细胞的成功率低，培养周期过长的技术问题。
[0006]本技术的技术方案是：一种用于分离肿瘤浸润淋巴细胞的装置，包括：
[0007]酶消化解离模块，包括解离瓶和设置在所述解离瓶底部的加热振荡器，在所述解离瓶上设置有消化酶注射部、和细胞输出端口，在所述细胞输出端口的连接管路上连接有第一蠕动泵；
[0008]细胞培养模块，包括细胞培养箱和设置在所述细胞培养箱内部的细胞培养袋，所述细胞培养袋设置为单向透气的透析袋；在所述细胞培养袋上设置有细胞进入端口和细胞移除端口，在所述细胞移除端口的管路上连接有第二蠕动泵，所述细胞输出端口通过过滤模块与所述细胞进入端口连接；
[0009]分离纯化模块，包括收集管路和连接在所述收集管路上细胞提纯单元和冻存管；
[0010]肿瘤细胞组织通过消化酶在所述解离瓶内消化解离，所述加热振荡器对肿瘤组织和消化酶振荡混匀；消化后的细胞混合物通过所述第一蠕动泵泵送至所述细胞培养袋内，并在输送过程中通过所述过滤模块过滤解离杂质，培养后的细胞混合物在所述第二蠕动泵驱动下沿所述收集管路输送，且细胞通过所述提纯单元提纯后收集在所述冻存管。
[0011]优选的，在所述细胞培养袋上设置有取样检测窗口，通过所述取样检测窗口对细胞和培养基进行取样检测，并在所述细胞培养袋上安装有用于检测细胞和培养基状态的酸碱度传感器和气体传感器。
[0012]优选的，所述过滤模块包括管路连接的一级过滤器和二级过滤器，在所述一级过滤器和所述二级过滤器上分别设置有培养基添加端口。
[0013]优选的，所述加热振荡器的加热温度为恒定37摄氏度，确保消化酶的活性。
[0014]优选的，所述细胞提纯单元包括连接在所述收集管路上的提纯辅料添加部和凝集物移除过滤器；所述提纯辅料添加部向所述冻存管路内添加辅料，所述凝集物移除过滤器用于剔除细胞与辅料混合后产生的成团细胞杂质。
[0015]与现有技术相比，本技术的优点是：
[0016]本技术通过将酶消化解离模块、过滤模块、细胞培养模块和分离纯化模块组合在一起，能够实现从肿瘤组织块的消化分离、TIL细胞培养、分离纯化和冻存的连续操作，细胞成活率高，培养周期短，提高了TIL细胞分离提纯的效率，有利于TIL细胞的应用和标准化开发。
附图说明
[0017]下面结合附图及实施例对本技术作进一步描述：
[0018]图1为本技术实施例提供的TIL细胞分离纯化装置整体结构示意图；
[0019]其中：1、酶消化解离模块；2、细胞培养模块；3、分离纯化模块；4、过滤模块；5、第一蠕动泵；6、第二蠕动泵；7、酸碱度传感器；8、气体传感器；
[0020]11、解离瓶；12、加热振荡器；13、消化酶注射部；14、细胞输出端口；15、废液口；21、细胞培养箱；22、细胞培养袋；23、细胞进入端口；24、细胞移除端口；25、取样检测窗口；
[0021]31、收集管路；32、提纯辅料添加部；33、凝集物移除过滤器；34、冻存管；35、夹具；41、一级过滤器；42、二级过滤器；43、培养基添加端口。
具体实施方式
[0022]下面结合具体实施例，对本技术的内容做进一步的详细说明：
[0023]如图1所示，一种用于分离肿瘤浸润淋巴细胞的装置，包括酶消化解离模块1、细胞培养模块2、分离纯化模块3。
[0024]为了描述方便，肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte)，简写为TIL细胞。
[0025]酶消化解离模块1包括解离瓶11，解离瓶11设置为玻璃材料，在解离瓶11上设置有消化酶注射部13、细胞输出端口14及废液口15，在细胞输出端口14的连接管路上连接有第一蠕动泵5。
[0026]在解离瓶11内高压灭菌，将手术获得的肿瘤组织切成3
‑
5mm的肿瘤组织块，并放入解离瓶11中进行酶消化，酶消化液通过消化酶注射部13添加到解离瓶11内，消化酶注射部13设置为橡胶塞材质，还可以在消化酶注射部13的添加管路上设置夹具，以控制酶消化液的添加速度。消化后的肿瘤细胞和TIL细胞混合液从细胞输出端口14输出，解离产生的废液则从废液口15排出。
[0027]同时在解离瓶11底部设置一个加热振荡器12，加热振荡器12的加热温度保持在37摄氏度，确保消化酶的最佳消化活性，在消化过程中不断振荡解离瓶11，使得肿瘤组织块和酶消化充分混合均匀，更好地解离。
[0028]根据不同类型的肿瘤组织，消化酶一般选用胰酶,I型，IV型和VIII胶原酶，消化酶一般采用基础培养基进行配置，消化酶浓度根据不同肿瘤组织控制在1％
‑
10％之间。
[0029]细胞培养模块2主要对消化后的肿瘤细胞和TIL细胞进行分离培养，包括细胞培养
箱21和设置在细胞培养箱21内部的细胞培养袋22，细胞培养袋22设置为单向透气的透析袋，提供细胞培养袋22内所需的二氧化碳。
[0030]在细胞培养袋22上设置有细胞进入端口23和细胞移除端口24，在细胞移除端口24的管路上连接有第二蠕动泵6，细胞输出端口14通过过滤模块4与细胞进入端口23连接。
[0031]过滤模块4包括管路连接的一级过滤器41和二级过滤器42，在一级过滤器41和二级过滤器42上分别设置有培养基添加端口43。
[0032]酶消化解离模块1中消化后的肿瘤细胞和TIL细胞通过第一蠕动泵5提供动力，在输送过程中，经过一级过滤器41和二级过滤器42取出肿瘤碎片，将消化后的肿瘤细胞和TIL细胞的混合物转移到细胞培养袋22中，同时在一级过滤器41和二级过滤器42上预留出培养基添加端口，将TIL细胞培养所需点的培养基与所培养的细胞混合。
[0033]在细胞培养袋22上安装有用于检测细胞和培养基状态的酸碱度传感器7和气体传感器8，并在细胞培养袋22上设置有本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于分离肿瘤浸润淋巴细胞的装置，其特征在于，包括：酶消化解离模块，包括解离瓶和设置在所述解离瓶底部的加热振荡器，在所述解离瓶上设置有消化酶注射部和细胞输出端口，在所述细胞输出端口的连接管路上连接有第一蠕动泵；细胞培养模块，包括细胞培养箱和设置在所述细胞培养箱内部的细胞培养袋，所述细胞培养袋设置为单向透气的透析袋；在所述细胞培养袋上设置有细胞进入端口和细胞移除端口，在所述细胞移除端口的管路上连接有第二蠕动泵，所述细胞输出端口通过过滤模块与所述细胞进入端口连接；分离纯化模块，包括收集管路和连接在所述收集管路上的细胞提纯单元和冻存管；肿瘤细胞组织通过消化酶在所述解离瓶内消化解离，所述加热振荡器对肿瘤组织和消化酶振荡混匀；消化后的细胞混合物通过所述第一蠕动泵泵送至所述细胞培养袋内，并在输送过程中通过所述过滤模块过滤解离杂质，培养后的细胞混合物在所述第二蠕动泵驱动下沿所述收集管路输送，且细胞通过所述提纯单元提纯后收集在所...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁辉，沈琦，苏冰，
申请(专利权)人：苏州思萃免疫技术研究所有限公司，
类型：新型
国别省市：