一种负载d-柠檬烯的纳米给药系统及其制备方法、应用技术方案

本发明专利技术涉及一种负载d

【技术实现步骤摘要】
一种负载d
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柠檬烯的纳米给药系统及其制备方法、应用


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种载d
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柠檬烯的纳米给药系统及其制备方法、应用。

技术介绍

[0002]肺癌是全球发病率和死亡率最高的癌症，我国是肺癌的高发国家，近些年城市人口肺癌发病率持续上升，严重威胁了人们的生命健康。随着研究的不断深入，研究手段不断丰富，其中化学治疗发挥着重要作用。我国具有大量的中药临床实践积累，现代医学研究逐渐揭示中药防治肿瘤的作用机制。
[0003]据《本草纲目》记载陈皮具有理气燥湿功效，可以祛痰平喘，也是中药治疗原发性肺癌的重要药味，而右旋柠烯(d
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Limonene,DL)作为一种单萜类化合物，是陈皮的主要活性成分。
[0004]右旋柠烯抗癌活性发现已逾20多年，在动物模型中表现出广谱、一致、有效的抗癌活性和化学预防作用。早在1971年，Homburger等发现DL可以抑制A/J雌性小鼠的自发肺腺瘤形成，而抗癌药物5
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FU、橘油和右旋柠烯氧化代谢物则无明显抑制作用。专利技术人前期分别通过乌拉坦构建的自发肺癌模型及裸鼠皮下移植瘤肺癌模型说明DL可有效抑制肺癌发生发展。近些年，多位研究者证实其抗癌作用机制包括提高II相代谢酶活性、抑制增殖、诱导凋亡、抑制法尼基蛋白转移酶活性、抑制肿瘤微血管和微淋巴管生成等。
[0005]既往研究表明，DL具有不溶于水，易挥发，不稳定等特点，其临床应用受限。而改善难溶药物的溶解性，可有效增加药物的生物利用度。

技术实现思路

[0006]本专利技术克服了现有技术的不足，提供了一种载d
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柠檬烯的纳米给药系统及其制备方法、应用。
[0007]为达上述目的，本专利技术采用的技术方案为：
[0008]本专利技术提供了一种负载d
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柠檬烯的纳米给药系统，所述给药系统包括：mPEG
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PLA
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DOTAP
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DL。
[0009]进一步的，在本专利技术的一个较佳实施例中，包括以下步骤：
[0010]S1配制1％w/v的胆酸钠溶液备用；
[0011]S2用精密天平称量10mg PLA，10mg PLA
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PEG，2mg DOTAP分别置于1.5ml离心管中，在离心管中依次加入100μl二氯甲烷充分溶解，备用；
[0012]S 3 1.5ml离心管中加入DL，并用二氯甲烷补齐至1ml；
[0013]S 4将S2和S3中制备的溶液混合均匀，然后加入3ml S1中制备的胆酸钠溶液，超声混合均匀；
[0014]S 5将S4中乳化的乳化液转入50ml烧杯，再加入3ml胆酸钠溶液(1％w/v)，置于通风橱搅拌约40min；
[0015]S 6将S 5中的溶液转入50ml离心管，配平离心，弃去上清，加入1ml三蒸水涡旋重溶沉淀，获取纳米粒悬液，所述纳米粒悬液为负载d
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柠檬烯的纳米给药系统。
[0016]进一步的，在本专利技术的一个较佳实施例中，还包括S 7，用HPLC检测DL的载药量和包封率。
[0017]进一步的，在本专利技术的一个较佳实施例中，S1中胆酸钠溶液配制方法为：称量0.5g胆酸钠于50ml离心管，加50ml三蒸水充分溶解，获得1％w/v的胆酸钠溶液。
[0018]进一步的，在本专利技术的一个较佳实施例中，S4中超声混合的超声条件为：200W，25S，1次。
[0019]进一步的，在本专利技术的一个较佳实施例中，S6中配平离心的条件为：10000g，30min。
[0020]进一步的，在本专利技术的一个较佳实施例中，负载d
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柠檬烯的纳米给药系统在对肿瘤细胞克隆能力抑制的应用。
[0021]进一步的，在本专利技术的一个较佳实施例中，负载d
‑
柠檬烯的纳米给药系统对细胞克隆数量的影响表现为浓度依赖，与0.25mM DL相比，0.15mM的mPEG
‑
PLA
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DOTAP/DL对细胞克隆数量的抑制作用更强，0.25mM的mPEG
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PLA
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DOTAP/DL组抑制克隆形成作用最强。
[0022]进一步的，在本专利技术的一个较佳实施例中，负载d
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柠檬烯的纳米给药系统在对肿瘤细胞侵袭能力抑制的应用。
[0023]进一步的，在本专利技术的一个较佳实施例中，负载d
‑
柠檬烯的纳米给药系统对细胞侵袭能力的影响表现为浓度依赖，与0.25mM的DL相比，0.15mM的mPEG
‑
PLA
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DOTAP/DL对细胞侵袭能力的抑制作用更强，0.25mM的mPEG
‑
PLA
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DOTAP/DL组抑制肺癌细胞侵袭作用最强。
[0024]本专利技术的有益技术效果在于：
[0025]DL具有不溶于水，易挥发，不稳定等特点，其临床应用受限。而改善难溶药物的溶解性，可有效增加药物的生物利用度。本专利技术采用两亲性双嵌段共聚物mPEG
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PLA将DL包裹在内，具有提高DL的水溶性，增加DL稳定性等明显优势。
附图说明
[0026]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他实施例的附图。
[0027]图1探究DL纳米粒对肿瘤细胞克隆能力的影响对照图。
[0028]图2探究DL纳米粒对肿瘤细胞克隆能力的影响对照图。
[0029]图3探究纳米粒对肿瘤细胞侵袭能力的影响对照图。
[0030]图4接种瘤第40天时，NC及空载纳米粒组的小鼠瘤体积快速生长图。
[0031]图5小鼠瘤体积快速生长结果分析图。
具体实施方式
[0032]为了能够更加清楚地理解本专利技术的上述目的、特征和优点，下面结合附图和具体实施方式对本专利技术进行进一步的详细描述，这些附图均为简化的示意图，仅以示意方式说
明本专利技术的基本结构，因此其仅显示与本专利技术有关的构成，需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
[0033]在本申请的描述中，需要理解的是，术语“中心”、“纵向”、“横向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本申请和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本申请保护范围的限制。此外，术语“第一”、“第二”等仅用于描述目的，而不能理解为指示或本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种负载d
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柠檬烯的纳米给药系统，其特征在于，所述给药系统包括：mPEG
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PLA
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DOTAP
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DL。2.权利要求1所述的负载d
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柠檬烯的纳米给药系统制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S 1配制1％w/v的胆酸钠溶液备用；S 2用精密天平称量10mg PLA，10mg PLA
‑
PEG，2mg DOTAP分别置于1.5ml离心管中，在离心管中依次加入100μl二氯甲烷充分溶解，备用；S 3 1.5ml离心管中加入DL，并用二氯甲烷补齐至1ml；S 4将S2和S3中制备的溶液混合均匀，然后加入3ml S1中制备的胆酸钠溶液，超声混合均匀；S 5将S4中乳化的乳化液转入50ml烧杯，再加入3ml胆酸钠溶液(1％w/v)，置于通风橱搅拌约40min；S 6将S 5中的溶液转入50ml离心管，配平离心，弃去上清，加入1ml三蒸水涡旋重溶沉淀，获取纳米粒悬液，所述纳米粒悬液为负载d
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柠檬烯的纳米给药系统。3.根据权利要求2所述的负载d
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柠檬烯的纳米给药系统制备方法，其特征在于，还包括S 7，用HPLC检测DL的载药量和包封率。4.根据权利要求2所述的负载d
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柠檬烯的纳米给药系统制备方法，其特征在于，S1中胆酸钠溶液配制方法为：称量0.5g胆酸钠于50ml离心管，加50ml三蒸水充分溶解，获得1％w/v的胆酸钠溶液。5.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：钱碧云，朱滕滕，柳莹，张凯，
申请(专利权)人：上海市同仁医院，
类型：发明
国别省市：