一种降解黄曲霉毒素的菌株及其培养和应用制造技术

技术编号:39328475 阅读:11 留言:0更新日期:2023-11-12 16:05
本发明专利技术公开了一种降解黄曲霉毒素的菌株及其培养和应用,属于微生物技术领域。本发明专利技术的菌株对AFB1的降解率高且降解稳定,诱变后的菌株降解率高达93.7%,本发明专利技术的菌株培养的发酵液在降解时间为72h的情况下的降解率最高可达90.2%,发酵液在饲料应用中对AFB1的降解率为85.7%。为85.7%。为85.7%。

【技术实现步骤摘要】
一种降解黄曲霉毒素的菌株及其培养和应用


[0001]本专利技术涉及微生物
,具体为一种降解黄曲霉毒素的菌株及其培养和应用。
[0002]本申请要求优先权,在先申请名称为:一种降解黄曲霉毒素的菌株及其培养和应用,申请号为:2022109012850,申请日为:2022年7月28号。

技术介绍

[0003]黄曲霉毒素(AFT)是黄曲霉和寄生曲霉等某些菌株产生的双呋喃环类毒素。其衍生物有约20种,分别命名为B1、B2、G1、G2、M1、M2、GM、P1、Q1、毒醇等。其中以B1的毒性最大,致癌性最强。动物食用黄曲霉毒素污染的饲料后,在肝、肾、肌肉、血、奶及蛋中可测出极微量的毒素。黄曲霉毒素及其产生菌在自然界中分布广泛,有些菌株产生不止一种类型的黄曲霉毒素,在黄曲霉中也有不产生任何类型黄曲霉毒素的菌株。黄曲霉毒素主要污染粮油及其制品,各种植物性与动物性食品也能被污染。
[0004]黄曲霉毒素B1存在于土壤,动植物各种坚果,特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素。一般以热带和亚热带等南方高温、高湿地区受污染最为严重,食品中黄曲霉毒素的检出率比较高。黄曲霉毒素耐热,280℃才可裂解,故一般烹调加工温度下难以破坏。
[0005]许多细菌和真菌,如乳酸菌、芽孢杆菌、橙黄杆菌、酵母等均有抑制黄曲霉生长和产毒的能力。目前,用于降解黄曲霉毒素的多为乳酸菌、枯草芽孢杆菌,但脱毒效果不稳定。

技术实现思路

[0006](一)解决的技术问题
[0007]针对现有技术的不足,本专利技术提供了一种降解黄曲霉毒素的菌株及其培养和应用,以解决上述现有技术存在的问题。
[0008](二)技术方案
[0009]为实现上述目的,本专利技术提供了如下方案:
[0010]本专利技术的方案之一是提供一种降解黄曲霉毒素的菌株,所述菌株为解淀粉芽孢杆菌B1

ZJSY6,保藏编号为CGMCC No.25254。
[0011]本专利技术的方案之二是提供一种降解黄曲霉毒素的菌株的培养,所述培养为将菌株接种于发酵培养基中摇床发酵。
[0012]进一步的,所述菌株的接种量为5

7%。
[0013]进一步的,所述发酵培养基为酵母粉5g/L,胰蛋白胨8g/L,豆粕3g/L,糖蜜1g/L,NaCl 8g/L,KH2PO40.3g/L,MgSO4·
7H2O 0.15g/L,FeSO40.05g/L,pH 7.5。
[0014]进一步的,所述发酵条件为:摇瓶转速180

200r/min、发酵温度30℃、发酵时间60

72h。
[0015]更进一步的,所述发酵条件为摇瓶转速180r/min、发酵温度30℃、发酵时间72h。
[0016]进一步的,所述培养具体为:按照6%的接种量将菌株种子菌液接入1.25L发酵培养基中,培养基初始pH7.5,置于30℃、180r/min摇床中发酵72h。
[0017]本专利技术的方案之三是提供一种菌株在降解黄曲霉毒素中的应用。
[0018]本专利技术的方案之四是提供一种菌株培养的发酵液在降解黄曲霉毒素中的应用。
[0019](三)有益效果
[0020]与现有技术相比,本专利技术提供了降解黄曲霉毒素的菌株及其培养和应用,具备以下有益效果:
[0021]本专利技术的菌株耐高温、耐胃酸、耐胆盐,对不同的真菌毒素的抑制能力强,且具有产淀粉酶和产蛋白酶的能力;本专利技术的菌株对AFB1的降解率高且降解稳定,诱变后的菌株降解率高达93.7%,本专利技术的菌株培养的发酵液在降解时间为72h的情况下的降解率最高可达90.2%,发酵液在饲料应用中对AFB1的降解率为85.7%。
[0022]生物保藏说明
[0023]本专利技术所用的菌株,其保藏编号为CGMCC No.25254;分类命名:解淀粉芽孢杆菌 Bacillus amyloliquefaciens ;2022

07

08保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所。
附图说明
[0024]图1为本专利技术的菌株在营养琼脂上的菌落形态;
[0025]图2为本专利技术的菌株菌体形态;
[0026]图3为本专利技术的菌株的芽孢形态;
[0027]图4为本专利技术的菌株在不同降解时间菌株对AFB1的降解率。
具体实施方式
[0028]现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式,该详细说明不应认为是对本专利技术的限制,而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
[0029]应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式,并非用于限制本专利技术。另外,对于本专利技术中的数值范围,应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
[0030]除非另有说明,否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料,但是在本专利技术的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入,用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时,以本说明书的内容为准。
[0031]在不背离本专利技术的范围或精神的情况下,可对本专利技术说明书的具体实施方式做多种改进和变化,这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本专利技术的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。
[0032]关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等,均为开放性的用语,即
意指包含但不限于。
[0033]实施例1
[0034]菌株的分离筛选:将采集的土壤样品10g,加入90mL无菌生理盐水中充分振摇20min后,取菌悬液静置5~10min,取上清液1mL,用无菌生理盐水按照10
‑1、10
‑2、10
‑3、10
‑4、10
‑5、10
‑6的比例依次梯度稀释,取不同稀释度的稀释液,分别吸取100μL涂布于初筛培养基上,37℃条件下培养24~48h。选取能够在初筛培养基上生长良好的单菌落,采用平板划线法进一步纯化,纯化后的菌株通过复筛培养后检测其降解AFB1标准品溶液的能力,最终获得高效降解黄曲霉毒素B1的菌株(降解率73.2%),命名为B1

ZJS。将该菌株制备斜面菌种,备用。经复合诱变后的菌株为本专利技术的菌株B1

ZJSY6,降解率高达93.7%。
[0035]初筛培养基配方(%):(NH4)本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种降解黄曲霉毒素的菌株,其特征在于:所述菌株为解淀粉芽孢杆菌B1

ZJSY6,保藏编号为CGMCCNo.25254。2.一种权利要求1所述的一种降解黄曲霉毒素的菌株的培养,其特征在于:所述培养为将菌株接种于发酵培养基中摇床发酵。3.根据权利要求2所述的一种降解黄曲霉毒素的菌株的培养,其特征在于:所述菌株的接种量为5

7%。4.根据权利要求2所述的一种降解黄曲霉毒素的菌株的培养,其特征在于:所述发酵培养基为酵母粉5g/L,胰蛋白胨8g/L,豆粕3g/L,糖蜜1g/L,NaCl8g/L,KH2PO40.3g/L,MgSO4·
7H2O0.15g/L,FeSO40.05g/L,pH7.5。5.根据权利要求2所述的一种降解黄...

【专利技术属性】
技术研发人员:张晓静龚婷樊明明侯文静张晓峰白天禾黄海
申请(专利权)人:河南牧业经济学院
类型:发明
国别省市:

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