一种血液中DNA和端粒的常温保存液及使用方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种血液中DNA和端粒的常温保存液。属于DNA保存技术领域。本发明专利技术保存液包括如下组分1％Proclin300、0.5mM EDTA、100

【技术实现步骤摘要】
一种血液中DNA和端粒的常温保存液及使用方法和应用


[0001]本专利技术涉及DNA保存
，更具体的说是涉及一种血液中DNA和端粒的常温保存液及使用方法和应用。

技术介绍

[0002]随着基因组学研究的发展，DNA分析逐渐成为疾病诊断、遗传分析和个体识别等领域的基本手段。端粒是存在于真核细胞线状染色体末端的一小段DNA
‑
蛋白质复合体，端粒短重复序列与端粒结合蛋白一起构成了特殊的"帽子"结构，作用是保持染色体的完整性和控制细胞分裂周期。现阶段端粒的长度反映细胞复制史及复制潜能，是评价人体老化速度的重要和准确的指标，它会随着人们年龄的增长而缩短。对于DNA和端粒最主要的来源是血液，对血液或血液中DNA和端粒样本的采集、运输和保存具有重要的实际意义。
[0003]但是在实验室外采集，常因环境限制和采集样本数量巨大，无法在采样后立即进行基因组DNA以及端粒的提取，需要将血液样本运输至实验室进行提取。在此过程中，为防止血液DNA和端粒发生降解，常规会通过冷冻的方法进行储存，但此方法成本高，且不易操作，可能存在解冻的风险。
[0004]因此，如何提供一种常温条件下有效保存血液中DNA和端粒降低保存成本和风险的保存液是本领域技术人员亟需解决的问题。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术提供了一种血液中DNA和端粒的常温保存液及使用方法和应用。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0007]一种血液中DNA和端粒的常温保存液，包括如下组分，Proclin300、EDTA、原钒酸钠、重氮烷基脲和甘氨酸。
[0008]优选地，各组分添加量分别为：Proclin300加入量为保存液总体积的1％、0.5mM EDTA、100
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1000mg/ml原钒酸钠、100
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500mg/ml重氮烷基脲和10
‑
50mg/ml甘氨酸。
[0009]优选地，各组分添加量分别为：Proclin300加入量为保存液总体积的1％、0.5mM EDTA、100mg/ml原钒酸钠、500mg/ml重氮烷基脲和10mg/ml甘氨酸。
[0010]优选地，所述血液为指尖血。
[0011]本专利技术的另一目的是提供一种上述血液中DNA和端粒的常温保存液的使用方法，包括如下步骤：
[0012](1)取保存液置于血液保存管中，于4℃长期保存；
[0013](2)使用时将采集得到的经EDTA抗凝处理的血液放入血液保存管中；
[0014](3)于200rpm下涡旋震荡让血液充分与保存液混合，然后于500
×
g下离心2分钟；
[0015](4)封管常温运输。。
[0016]优选地，使用时DNA和端粒的常温保存液与血液的体积比为1.5
‑
2:2。
[0017]本专利技术的再一目的是提供上述血液中DNA和端粒的常温保存液在保存血液DNA中
的应用。
[0018]本专利技术的再一目的是提供上述血液中DNA和端粒的常温保存液在保存血液端粒中的应用。
[0019]经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0020](1)本专利技术保存液可稳定保存血液中DNA和端粒。
[0021](2)本专利技术保存液在常温条件下可完整保存血液中的DNA和端粒至少7天。
附图说明
[0022]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
[0023]图1附图为本专利技术实施例1各组别DNA琼脂糖凝胶电泳图；
[0024]图2附图为本专利技术实施例2各组别DNA琼脂糖凝胶电泳图；
[0025]图3附图为本专利技术实施例3各组别DNA琼脂糖凝胶电泳图；
[0026]图4附图为本专利技术实施例4各组别DNA琼脂糖凝胶电泳图；
[0027]图5附图为本专利技术实施例6各组别DNA琼脂糖凝胶电泳图；
[0028]图6附图为本专利技术实施例6各组别DNASouthernblot检测结果。
具体实施方式
[0029]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0030]实施例1
[0031]为考察EDTA的加入量，分别设置4种不同量的EDTA：
[0032]1、1mM EDTA；
[0033]2、0.5mM EDTA；
[0034]3、0.25mM EDTA；
[0035]4、0.125mM EDTA；
[0036]其他各成分按照按下述比例称取各组分，1％Proclin300、100mg/ml原钒酸钠、100mg/ml重氮烷基脲和10mg/ml甘氨酸。
[0037]按照上述成分和配比配制四组保存液，采用上述保存液，对同一批次血液样本37℃进行保存，3天后，提取血液中的DNA，进行琼脂糖凝胶电泳实验，实验结果如图1附图所示。
[0038]结果分析：如图1附图所示：EDTA的加入量为0.5mM时，保存效果最优。
[0039]实施例2
[0040]为考察原钒酸钠的加入量，分别设置4种不同量的原钒酸钠：
[0041]1、50mg/mL原钒酸钠；
[0042]2、100mg/mL原钒酸钠；
[0043]3、1000mg/mL原钒酸钠；
[0044]4、0mg/mL原钒酸钠；
[0045]其他各成分按照按下述比例称取各组分，1％Proclin300、0.5mM EDTA、100mg/ml重氮烷基脲和10mg/ml甘氨酸。
[0046]按照上述成分和配比配制四组保存液，采用上述保存液，对同一批次血液样本37℃进行保存，3天后，提取血液中的DNA，进行琼脂糖凝胶电泳实验，实验结果如图2附图所示。
[0047]结果分析：原钒酸钠的加入量在100
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1000mg/mL时，条带显示较清晰，在100mg/mL时条带显示最清楚，表明原钒酸钠的加入量在100mg/mL最优。
[0048]实施例3
[0049]为考察重氮烷基脲的加入量，分别设置3种不同量的重氮烷基脲：
[0050]1、50mg/mL重氮烷基脲；
[0051]2、500mg/mL重氮烷基脲；
[0052]3、1000mg/mL重氮烷基脲；
[0053]其他各成分按照按下述比例称取各组分，1％Proclin300、0.5mM E本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血液中DNA和端粒的常温保存液，其特征在于，包括如下组分，Proclin300、EDTA、原钒酸钠、重氮烷基脲和甘氨酸。2.根据权利要求1所述一种血液中DNA和端粒的常温保存液，其特征在于，各组分添加量分别为：Proclin300加入量为保存液总体积的1％、0.5mMEDTA、100
‑
1000mg/ml原钒酸钠、100
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500mg/ml重氮烷基脲和10
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50mg/ml甘氨酸。3.根据权利要求2所述的一种血液中DNA和端粒的常温保存液，其特征在于，各组分添加量分别为：Proclin300加入量为保存液总体积的1％、0.5mMEDTA、100mg/ml原钒酸钠、500mg/ml重氮烷基脲和10mg/ml甘氨酸。4.一种如权利要求1
...

【专利技术属性】
技术研发人员：王峰，柳杨，代梦琪，
申请(专利权)人：上海复漾生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：